HCV核心蛋白通过LXRα核受体介导HepG2细胞甘油三酯合成增加-论文.pdf

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1、6基础论著·HCV核心蛋白通过LXR0c核受体介导HepG2细胞甘油三酯合成增加王晶晶刘顺爱张锦前全敏冯胜虎王琦赵龙凤成军【摘要】目的观察丙型肝炎病毒(HCV)的核心蛋白(core)对月_卜细胞甘油j酯(TG)合成的影响。方法将HCVlb基因型core表达载体pcDNA3．1一myc／his(一)一coreIb和HCV3a基因犁core表达戟体pcDNA3．1-myc／his(一)一core3a分别转染至HepG2细胞，利用定量测定法检测细胞内TG含量，用实时荧光定董逆转录聚合酶链反应法(realtimeqPC

2、R)、篮免疫E【J迹(Westernblot)方法观察脂质合成相关基因肝x受体Ⅱ(LXR~t)、甾醇调节元件结合蛋f]lC(SREBP1C)和脂肪酸合酶(FASN)的mRNA和蛋白的表达变化，并进行比较分析。结果HepG2细胞转染两个皋型HCVcore表达载体之后均能显著增加细胞内的TG含晕(P<0．05)，尤以基因型core3a组为筹异更显著(P<0．001)。Rea1．timePCR结果显示，两个基冈型core均上调LXRc~的mRNA水平(JP<0．05)，基囚型core3a组差异史为显著(P<0．叭)；

3、FASN的mRNA水平只在仪在基因型core3a组卜调(P<0．05)，而基因型corelb组差异无统计学意义。Westernblot结果显示，HCVcore表达町以明显上调表达可以显著上调SREBPlc的蛋白水甲，尤其基型core3a组更为著。对FASN蛋白水平，荩因型core3a上调其表达，但基型corelb组无明显变化。结论HCV可能通过LXRct介导月十细胞内的脂质合成诱导肝脂肪变，有待进一步研究。【关键词】肝炎病毒，丙型；核心蛋F1；肝x受体a；脂肪变HCVcoreproteinincreasedth

4、esynthesisoftriglycerideinHepG2cellsbyliverXreceptoralphaWANGJingjinf,LIUShunai,ZHANGJinqian．QUANMin,FENGShenghu,WANGOi,ZHA0Longfeng,CHENGJun．*DepartmentofInfectiousDiseasesFAtHospitalofSbanxiMedicalUniversity,Taiyuan，03000，，ChinaCorrespondingauthors．"ZHA0Lo

5、ngfeng,Email：zhaoltD06@163，corn；CHENGJun，EmaiL"jun．cheng．ditan@gmail．corn[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheeffectofHCVcoreproteinontheintracellulartriglycerideaccumulationinHepG2cells．MethodsHCVcoregeneswereclonedandexpressed．1ntracellulartriglyceridewasass

6、essedbyquantificationwithadipogenesisassaykit．TheinfluenceofHCVcoreproteinontheliverXreceptor(LXRa)，sterolregulatoryelementbindingprotein一1C(SREBP1c)andfattyacidsynthase(FASN)mRNAexpressionwereanalyzedinvitrobyreal—timePCR．IncreasedproteinexpressionofSREBP1C

7、andFASNwereobservedbyWesternblot．ResultsThereweresignificantaccumulationoftriglyceridesinbothcore1bandcore3a—expressingHepG2cells<0．o5)．whilecore3aproteinexpressioninducedsignificantTGaccumulation<0．001)．LXRc~mRNAexpressionwereupregulatedinbothcellsexpressin

8、gofHCVcore1b(P<0．05)andcore3a<0．01)．FASNmRNAlevelwasincreasedincore3a—expreessionHepG2cells(尸<0．05)，however,SREBPlcmRNAlevelwaselevated，butwithnosignificantdifference．Thiswasaccompaniedbyanincre