TLR4和NF-kB在肝内胆管结石相关的肝内胆管细胞癌中的表达及临床意义-论文.pdf

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1、安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2014May；49(5)·625-TLR4和NF．KB在肝内胆管结石相关的肝内胆管细胞癌中的表达及临床意义陈佳，余宏铸，王正林，张晓亮摘要目的探讨Toll样受体4(TLR4)和核因子KB(NF—的肝内胆管细胞癌中的表达情况以及TLR4和NF—KB)在肝内胆管结石相关的肝内胆管细胞癌组织中的表达KB的相关性分析。该研究通过免疫组织化学(PV)及其临床意义。方法收集110例胆管病理组织蜡块，包括法检测TLR4和NF—KB在肝内胆管结石相关的肝内40例肝内胆管结石相关的肝内胆管细胞癌组织、4

2、0例肝内胆管细胞癌组织、肝内胆管结石旁胆管组织和正常胆管结石旁胆管组织和30例正常肝内胆管组织(肝血管瘤肝内胆管组织(肝血管瘤旁正常胆管组织或者肝外旁正常胆管组织或者肝外伤后切除肝组织的正常胆管组伤后切除肝组织的正常胆管组织)中的表达情况，织)，采用免疫组织化学(PV)法检测各组织中TLR4和NF一并分析其相关性与临床意义。．cB的表达情况并分析结果。结果肝内胆管结石相关的肝内胆管细胞癌组织中的TLR4和NF—KB表达量明显高于肝1材料与方法内胆管结石旁胆管组织和正常肝内胆管组织(P<0．05)。在肝内胆管结石相关的肝内胆管细胞癌组织中TLR4和NF—1．1病例资料收

3、集安徽医科大学第一附属医院KB的表达呈正相关(r=0．709)。TLR4和NF—KB的表达与病理科2003年1月～2013年1月与本课题相关的患者的性别、年龄、肿瘤分化程度及淋巴结转移的组问比较，110例肝内胆管组织蜡块标本，分为3组：I组为40差异无统计学意义(P>0．05)。结论．rLR4和NF—KB的表例肝内胆管结石相关的肝内胆管细胞癌组织；1I组达与肝内胆管结石到肝内胆管结石相关的肝内胆管细胞癌为40例肝内胆管结石旁胆管组织；m组为30例正的逐步发展具有密切相关性，且两者表达呈正相关。常肝内胆管组织(肝血管瘤旁正常胆管组织或者肝关键词胆管细胞癌；TLR4；NF

4、—KB；肝内胆管结石外伤后切除肝组织的正常胆管组织)。I组在术前中图分类号R735．8未接受过任何放疗、化疗和抗炎治疗。文献标志码A文章编号1000—1492(2014)05—0625—041．2方法1．2．1石蜡切片将病理科切取的石蜡切片放置肝内胆管细胞癌是来自于肝内胆管上皮细胞的于98cC烤片机中20min，经二甲苯两次脱蜡，再经恶性肿瘤。有研究⋯表明，肝内胆管结石与肝内胆由高到低的3种梯度乙醇水化，蒸馏水冲洗后待用。管细胞癌的发生具有密切关系，但是由于在临床上1．2．2抗原微波修复及处理将切片置于柠檬酸缺乏特异性的症状、体征以及检查依据，以至于肝内盐缓冲液中，放

5、于微波炉中加热20min，取出冷却。胆管结石相关的肝内胆管细胞癌的早期诊断一直较3％HO去离子水室温下孵育15min，以阻断内源困难。脂多糖(1ip叩olysac0harides，LPS)-Toll样受体性过氧化物酶，PBS冲洗3min×3次。滴加一抗4(To111ikereceptor4，TLR4)．核因子KB(nuclearfac—(TLR4的一抗工作浓度为1：120，NF—KB的一抗工torkappaB，NF．KB)信号转导通路是目前发现的重作浓度为1：100)，4℃冰箱过夜。第2天取出后置要的炎性通路之一，已有研究表明NF—KB在肝内于37℃温箱复温40min

6、，PBS冲洗3min×3次。滴胆管结石相关的肝内胆管细胞癌组织中呈现过度表加通用型IgG抗体．HRP多聚体，37℃温箱孵育20达，但是没有文献报道TLR4在肝内胆管结石相关min，PBS冲洗3min×3次。1．2．3显色和封片应用DAB显色液显色，约52o14—02—25接收min后置于水中终止反应。蒸馏水冲洗、复染、脱基金项目：2o13年安徽省年度重点科研项目(编号：1301043034)作者单位：’安徽医科大学第一附属医院普通外科，合肥230022水、透明封片。用PBS缓冲液代替一抗作为阴性对安徽医科大学病理学教研室，合肥230032照，试剂商提供的阳性片作为阳性

7、对照。作者简介：陈佳，男，硕士研究生；1．3结果判定标准采用荧光显微镜观察染色结余宏铸，男，副教授，硕士生导师，责任作者，E—mail：hong—果。其中TLR4表达于胆管细胞膜和(或)细胞质zhu．620929@aliyun．aom内，NF—KB表达于胆管细胞核和(或)细胞质内。染安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2014May；49(5)·627·2．3肝内胆管结石相关的肝内胆管细胞癌组织中导内毒素／LPS应答的最重要受体。当TLR4与相TLR4和NF-KB的表达与临床病理参数的关系应配体结合后会将