脂肪酶固定化方法的研究进展.doc

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1、脂肪酶固定化方法的研究进展生物工程2班周明20091525摘要：酶的固定化是生物技术中最为活跃的研究领域之一。脂肪酶能发生催化水解、醇解、酯化、酯交换等反应，是一种重要的生物催化剂。而由于脂肪酶的特性，其能否工业化利用很大程度取决于固定化技术的成功与否，酶的固定化方法是酶固定化技术的重要研究内容。固定化脂肪酶由于其易与底物分离且可重复使用而备受关注。为此，本文综述了常用的固定化方法，包括物理吸附法、共价结合法、交联法和包埋法，不同的固定化方法对酶的性质有不同的影响。本文对近年来固定化脂肪酶方法的研究进行了综述，为固定化方法的进一

2、步探讨提供了研究基础。关键词：固定化；脂肪酶；载体材料TheresearchprogressoflipaseimmobilizedAbstract：Ofenzymefixedisinthebiotechnologyresearchfieldofthemostactive.Fatenzymeswouldhappencatalyticwaterandalcohol,ester,esterexchangeforisamajorcatalystofbiological.Andthefat,theenzymescanbeverymuchd

3、ependsontheuseoftechnologyonthesuccessoftheenzymeisafixedsetofthetechnicalcontentofimportantresearch.Intoafattybecauseoftheenzymesthatareandseparateandcanreusehaveamajorconcern.Thecommonimmobilizationmethodsweregenerallyintroducedincludingphysicaladsorption,covalentc

4、ross-linkingmethodandentrapmentmethod.Differentimmobilizationmethodshaddifferenteffectsontheenzyme.Ofthefewyears,theenzymesastudyofthereview,asafurtherexplorethemethodprovidesresearch.Keywords：immobilization;lipase;carrier脂肪酶（LipaseEC3.1.1.3，甘油酯水解酶）是一类特殊的酰基水解酶它的底物是油脂

5、其水解部位是油脂中脂肪酸和甘油相连接的酯键[1]；人们对脂肪酶的研究已有上百年的历史，是最早被研究的酶类之一[2]。脂肪酶作为生物催化剂，可用于许多有机合成反应，列如能在油—水界面上催化酯水解或醇解、酯合成、酯交换、内酯合成、多肽合成、高聚物合成及立体异构体拆分等有机合成反应，是目前被重点研究的酯催化剂[3]。有关脂肪酶(1ipase)较确切的定义是20世纪70年代由Brockerhoff等首先提出的，他将水解长链脂肪酸酯或水解油酸酯类的酶类定义为脂肪酶[4]。自由酶对所处环境十分敏感，在强酸、强碱、高温、高离子浓度和部分有机溶

6、剂中均不够稳定，容易导致酶蛋白的变性，从而降低甚至丧失其催化活性。同时，自由酶反应后不易与底物和产物分离，既影响反应产物纯度又难以重复使用，这在很大程度上限制了酶促反应的广泛应用[5]。固定化酶(Immobilizedenzyme)技术克服了自由酶的上述不足，提高了酶的储存稳定性，实现了重复使用及连续自动化生产，降低了成本，在生物工程、食品工业、医药和精细化学工业等领域有着广泛的应用前景。酶大分子包含疏水头和亲水尾两部分酶的反应部位与疏水头不同位，但很靠近，亲水尾使酶分子在界面上的定向更为稳定。因此，酶在界面上具有较大的亲和力，

7、脂肪酶催化作用需要一定的水份必须水，以维持酶分子的活性构象，这些必须水与酶分子的带电基团相互作用，使酶分子具有一定的柔韧性而表现出催化活力。脂肪酶的固定化方法大致分为4类：吸附法、共价法、交联法和包埋法。分析和比较了各种固定化方法。1固定化脂肪酶的方法1.1吸附法吸附法包括物理吸附和离子吸附。物理吸附是最简单的固定化方法，利用离子键或吸附作用将酶固定到载体上，操作相对简单，很少用到有机试剂。主要依靠蛋白质和载体间的结合力联结，作用力较弱，酶易脱落但载体选择范围较广，固定化操作过程简单，吸附法是经济上最具吸引力的固定化方法。高阳[

8、6]等以不同大孔树脂吸附法固定化假丝酵母99—125脂肪酶，在微水有机相中的应用表明，非极性树脂NKA是最佳的固定化载体。结果表明，在给酶量为1.92/1（初始酶粉与树脂的质量比），pH为7.4，体系水含量为15%（水与油的质量比），反应温度为40℃条件下，固定