化学发光酶免疫法测牛奶中3种喹诺酮类药物.pdf

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1、2013年8月霞盛磷究与羿发第34卷第16期FoodResearchAnd1)evelooment检测分析78DOI:10.3969/j.issn.1005-6521.2013.16.022化学发光酶免疫法测牛奶中3种喹诺酮类药物李源珍,生威,刘恩梅,韩静,秦沛,王硕(天津科技大学食品工程与生物技术学院食品营养与安全省部共建教育部重点实验室,天津300457)摘要:建立可同时检测牛奶中氧氟沙星(OFL)、麻保沙星(MAR)、氟罗沙星(FLE)残留的直接竞争化学发光酶免疫~(dc-CLEIA),方法的检出限分别为O.01、0.03、0.04n

2、g/mL。牛奶中的氧氟沙星、麻保沙星、氟罗沙星用7.5%的三氯乙酸提取,测定200、100、50、20、10ng/mL5个添加水平的回收率,平均回收率在75.4%~94.1%之间。HPLC与dc—CLE1A测定的结果有很好的相关性,说明所建立的dc—CLEIA可用于实际样品的检测,结果准确可靠。关键词:氧氟沙星;麻保沙星;氟罗沙星;增强化学发光酶免疫法;牛奶DeterminationofQNsResiduesinMilkbyEnhancedChemiluminescentEnzymeImmunoassayLIYuan—zhen,SHENGW

3、ei,LIUEn—mei,HANJing,QINPei,WANGShuo(KeyLaboratoryofFoodNutritionandSafety,MinistryofEducationofChina,CollegeofFoodEngineeringandBiotechnology,TianjinUniversityofScienceandTechnology,Tianjin300457,China)Abstract:Adirectcompetitiveenhancedchemiluminescentenzymeimmun0assay(d

4、c—CLEIA)fordeterminationofofloxacin(OFL),marbofloxacin(MAR),flerofloxacin(FLE)residuesinmilkwasdeveloped.Thedetectionlimitofassaywere0.01.0.O3.0.04ng/mLrespectively.Thespikedmilksampleswereextractedwithtrichloroaceticacidandanalyzedbydc-CLEIA.Theaveragerecoveriesatfivespik

5、edlevelsof200,100,50,20.10ng/mLwerebetween75.4%and94.1%.Therewasagoodcorrelationbetweendataobtainedusingthedc-CLEIAandHPLC,indicatingthegoodperformanceofthisdc-CLEIA.Therefore,theproposedmethodwassimple,aecurateandandsuitablefortherapiddeterminationofofloxacin,marbofloxaci

6、nandflerofloxacininmilksamples.Keywords:ofloxacin;marbofloxacin;fleroxacin;dc—CLEIA;milk喹诺酮类药物(Quinolones,QNs)是一类人工合成究的热点和趋势[61。的含有4一喹酮母核的抗菌药物⋯,主要作用于细菌目前用于喹诺酮类兽药残留的检测方法主要有DNA螺旋酶,通过抑制细菌DNA的合成和复制而导微生物法[71、高效液相色谱法、高效毛细管电泳法[81、液致细菌死。因其抗菌活性强、生物利用率高、抗菌谱质联用、免疫分析法等。其中微生物法检测限过高,广等特

7、点而广泛应用于临床及畜牧业生产中。随着特异性不强,不够灵敏,适合于快速筛选;色谱及其联QNs的广泛应用,其残留问题已经引起了人们的高度用技术虽然具有高效、灵敏、准确等特点,但前处理较重视,QNs类药物的残留[2-51不仅危害人的身体健康,诱复杂,所需仪器昂贵;免疫分析法具有很高的灵敏度导人类致病菌产生耐药性,导致肠道菌群失调,还会和特异性,而且不需要昂贵的仪器设备,适用于大量导致环境污染,不利于养殖业的健康发展及畜禽产品样品的快速筛选,因此免疫分析法成为检测喹诺酮类的出口。此建立高效灵敏的QNs药物多残留检测方药物残留的必然趋势u1。化学发

8、光酶免疫测定是常法将具有重要意义,这也是目前QNs药物检测方法研用的分析方法之一,与传统的ELISA分析方法相比,化学发光酶免疫测定方法具有更高的灵敏度,检测所摹金项目:天津市科

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