前列腺素E1的工艺优化.pdf

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1、·734·实用药物与临床2014年第17卷第6期PracticalPharmacAndClinRemed塑，!．!Io．·药学研究·前列腺素E的工艺优化陈玉威，张月辉，董慧明[摘要]目的对前列腺素El提取工艺进行优化。方法以前列腺素El含量为考察指标，对前列腺素El提取工艺中孵育温度、提取时间、pH值、通氧纯度4个因素进行优化。结果最佳提取工艺条件为：孵育温度37℃、pH值8、提取时间1h、通氧纯度为纯氧。结论在此条件下，前列腺素El提取工艺稳定可行，能有效提高前列腺素E1的含量。[关键词]前列腺素E；工艺；优化；正交试验Processoptimizationofprostaglandin

2、ElCHENYu．wei，ZHANGYue—hui，DONGHui—ming(PharmaceuticalResearchInstituteofLiaoningProvince，Shenyang110015，China)[Abstract]0bjecfiveToexplorethebestofprostaglandinElextraction．MethodsWithprostaglandinElcontentasindex．theincubationtemperature，pH，extractiontime，purityofoxygenwereoptimizedbyorthogonalex

3、peri—ment．ResultsTheoptimalconditionswereasfollows：incubationtemperature37℃，pHvalueof8，extractiontime1h，pureoxygenpurity．ConclusionUndertheaboveconditions，theoptimalextractionprocessofprostaglandinE1wasfeasibleandstable，caneffectivelyimprovethecontentofprostaglandinE1．Keywords：ProstaglandinE1；Proc

4、ess；Optimization；Orthogonaltest0引言有限公司)；日本岛津LC2010高效液相色谱仪；色谱柱：Diamonsil—C18柱(200mmx4．6mm，5p．m)。前列腺素(PG)在体内由不饱和脂肪酸合成，1．2试剂氯化钾、枸橼酸、磷酸氢二钾、磷酸二结构为一个五环和两条侧链构成的20碳化合物。氢钾、EDTA．2Na、氢氧化钾、氢醌、谷胱甘肽、丙按其结构，前列腺素分为A、B、C、D、E、F、G、H、I酮、乙醚、石油醚(30～60oC)、盐酸、二氯甲烷、无等类型，而前列腺素E是这个大家族的一员。前水硫酸钠等，以上试剂均为分析纯。乙腈等试剂列腺素E的化学名称为(11A，

5、13E，15S)一11，15一为色谱纯。二高一一亚麻酸(通河医药有限公司，纯二羟基．9一氧代前列腺一13．烯一1一酸，PGE为白色或度90％)、绵羊精囊(黑龙江)。淡黄色针状结晶，Mpl15～116oC，比旋度为一61．6。(C=0．56，THF)。易溶于乙醚(ethy1)。现2制备方法研究有技术中的前列腺素E产品收率低，使用受到限2．1制备流程羊精囊一(KC1，EDTA—Na2，制。为使更多患者能充分利用前列腺素E。所研pH8)一酶的混悬液一孵育(氢醌，谷胱甘肽，二高一制的各种品种，我们对前列腺素E的提取工艺进-亚麻酸)一反应液一提取(丙酮，乙醚，二氯甲行研究及优化的选择。烷)一前列腺素

6、粗品一前列腺素E粗品(分离，硅1仪器与试剂胶柱)。2．2样品溶液的制备酶的制备过程：取冷藏的1．1仪器JJ．2(2003-61)组织捣碎匀浆机；羊精囊(一3OoC)200g，去除结缔组织和脂肪，加JY98—1IDN超声波细胞粉碎机(宁波新芝生物科入0．154moVL氯化钾液200mL，匀浆后，在技股份有限公司)；H一1850R台式高速冷冻离心机10000r／m_in下离心10min，取上清液，以双层纱(长沙湘仪离心机仪器有限公司)；pHSJ一2F型实布过滤，得清液。残渣再加氯化钾液，捣匀浆，离验室pH计(上海精密科学仪器有限公司)；旋转蒸心过滤后，合并2次上清液。以2moL／L枸橼酸调发器

7、RE一2000E(巩义予华仪器有限责任公司)；pH5±0．2，于10000转／min下离心15min，弃除BP211D型电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统清液，用磷酸盐缓冲液(0．2mol／L，pH=8)洗下沉收稿日期：2013—08—26淀，再加等量的EDTA一2Na(6．25~moL／L)溶液搅作者单位：辽宁省药物研究院，沈阳110015匀，以氢氧化钾(2mol／L)调节pH8±0．1，作为酶实用药物与临床2014年