三种抑菌剂对蛋白核小球藻生物量和脂质含量的影响.pdf

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1、第36卷第4期武汉工程大学学报VoI．36NO．42O14年4月J．WuhanInst．Tech．Apr．2O14文章编号：1674～2869(2014)040001—06三种抑菌剂对蛋白核小球藻生物量和脂质含量的影响王存文，孟阳，汪铁林，吕仁亮，王成成，张艳芳[1．武汉工程大学化工与制药学院，湖北武汉430074；2．绿色化工过程教育部重点实验室(武汉工程大学)，湖北武汉430074]摘要：为寻找能够抑制或消灭产油微藻非共生菌且对产油微藻培养有促进作用的抑菌剂，推动富油微藻生产生物柴油的进程，研究了盂加拉红、硫酸链霉素和制霉菌素3种抑菌剂单独和组合分别对蛋白核小球藻生长的影响，

2、并利用超临界二氧化碳萃取法和索氏提取法测定了藻类细胞中的脂质含量的变化．结果表明，制霉菌素会抑制蛋白核小球藻的生长；孟加拉红和硫酸链霉素对蛋白核小球藻的生长表现出积极的促进作用，藻细胞密度的最大值分别为4．216×lOcells／mL和3．512×10cells／mL，高于不加任何抑菌剂的对照组3．325×10cells／mI，而对油脂含量几乎没有影响．孟加拉红和硫酸链霉素的混合抑菌剂对蛋白核小球藻的生长起抑制作用．关键词：蛋白核小球藻；抑菌剂；孟加拉红；硫酸链霉素；制霉菌素中图分类号：Q819文献标识码：Adoi：10．3969／j．issn．1674—2869．2Ol4．04

3、．O01存的细菌被称为共生菌，存在竞争关系的则被称0引言为非共生菌．非共生菌对微藻的生长是有害的，生物柴油作为一种可再生的环保能源，在过甚至有些具有溶藻性的细菌对微藻来说是致命去几十年里引起了全世界的广泛关注I】]．植物油、的_1．抑菌剂对于细菌具有良好的抑制作用，采用动物脂肪和微生物油脂是生产生物柴油的主要原抑菌剂可消除非共生菌对微藻生长的影响_】．关料≈]．其中，微生物油脂的脂质产量高，而且与传于抑菌剂在微藻培养中的应用的报道主要集中在统农业相比，微生物细胞增殖快、生产周期短、生藻类遗传转化中的选择性标记．微藻在培养过产成本低、生长所需的原料来源广泛『4]．在众多的程中通常会

4、受到放线菌和霉菌的污染．孟加拉红、微生物中，微藻的油脂成分较为单一、组成与普通制霉菌素和硫酸链霉素能够有效抑制放线菌和霉植物油相似，且产率较高(在特定培养条件下可达菌的繁殖线菌_1．据笔者所知，至今未见孟加拉到自身干重质量分数的85)l5]。微藻适应环境的红对小球藻生长影响的报道．能力很强，在整个生物圈均有分布，不会与农作物本实验选用孟加拉红、制霉菌素和硫酸链霉争抢良田Ⅲ6]．微藻具有较高的光合效率，可以提供素作为抑菌剂，研究其对蛋白核小球藻生长的影更有效的方法来回收营养物质[7]，其代谢产物量响，旨在寻找可抑制或消灭微藻非共生菌而对微比传统微生物要高得多]．用葡萄糖异养发酵培藻

5、本身影响较小或有促进作用的抑菌剂．养微藻可达到51．2g／L的生物量]，而富油微藻1实验部分能够产生大量的单细胞油脂(SCOs)，产量可超过其干重质量分数的2OClO]，这些单细胞油脂的主1．1材料要成分是非常适合于生产生物柴油的甘油三酯孟加拉红(生物纯级)购自阿拉丁试剂，硫酸(TAGs)[1．其中，蛋白核小球藻因繁殖能力强、链霉素EAmresco0382，Potency(drybasis)：65O～用途广泛而受到广泛的关注，本研究选取蛋白核850mcg／mg]和制霉菌素Amresc0418，Potency小球藻作为研究对象．(anhydrous)：4400u／mg]购自武汉华顺

6、生物技微藻在培养过程中通常会受到其他微生物的术有限公司．BG一11培养基根据文献[18]配置，所污染．这些微生物会对其生长速度及藻密度产生用试剂全部为分析纯级．蛋白核小球藻购自中国影响，其中细菌的影响较为显著．可与微藻共同生科学院武汉水生生物研究所．收稿日期：2014—03～19作者简介：王存文(1964一)，男，湖北鄂州人，教授，博士，博士研究生导师．研究方向：能源化工、化学工程．*通信联系人2武汉工程大学学报第36卷1．2微藻培养加至1．790×10cells／mL．随后藻密度急剧增加，培养温度为25℃，将微藻置于100mI锥形培养时问为120h时增加至2．264×10cel

7、ls／mL，瓶中培养，培养基为BG一11培养基，并用强度为到168h，达到4．216×10cells／mL，而不经处理的4000lx的冷白光灯对微藻进行光照，光暗周期对照组小球藻细胞密度仅为3．325×10cells／mL．L：D=12h：12h．同时每天摇动培养瓶数次，以这是因为低浓度的活性氧可激活蛋白酶，调节基防止微藻下沉或附壁．在实验组中加入抑菌剂，依因表达的合成和诱导，导致细胞增殖

8、2，可出现文献选取3种抑菌剂的质量浓度分别为：孟加拉毒物兴奋效应_2，即低含量的毒性介质所