低氧预处理对大鼠心肌成纤维细胞NLRP3基因表达的影响.pdf

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1、东南大学JSSoutheastUn学iv眷(M‘ed医Sc学iE版dij)2一0⋯14’⋯0’33(、4。)．’4⋯65_4⋯67·465·低氧预处理对大鼠心肌成纤维细胞NLRP3基因表达的影响齐斌，任威，李春江，张锐(中国人民解放军第202医院心血管内科，辽宁沈阳110003)[摘要]目的：研究NLRP3基因在缺氧大鼠心肌成纤维细胞中的表达。方法：将大鼠心肌成纤维细胞体外原代培养，以氯化钴和低氧模拟心肌缺氧刺激，利用Real—timePCR和Westernblot检测NLRP3基因在大鼠心肌成纤维细胞中的表

2、达。结果：成功地体外培养出鼠心肌成纤维细胞，NLRP3基因在大鼠心肌成纤维细胞缺氧状态下表达明显增高。结论：NLRP3基因在大鼠心肌成纤维细胞缺氧状态下表达上调可以作为心肌梗死发生评判的重要因子。[关键词]低氧；NLP家族pyrin结构域3；实时定量聚合酶链反应[中图分类号]R587．1[文献标识码]A[文章编号]16716264(2014)04。046503doi：10．3969／j．issn．1671-6264．2014．04．014ExpressionofNLRP3geneafterhypoxicpre

3、conditioninginratcardiacfibroblastsQIBin，RENWei，LIChun。Jiang，ZHANGRui(DepartmentofCardiovascularMedwine，No．202HosphalofPIA，Shenyang110003，China)[Abstract]Objective：ToinvestigateexpressionofNLRP3geneafterhypoxicpreconditioninginratcardiacfibroblasts．Methods：

4、Ratcardiacfibroblastcellswerecuhuredinvitro．AftertreatedwithcertainconcentrationofCoC12orhypoxia’mimickedmyocardialinfarction，expressionofNLRP3genewasdetectedbyReal。timePCRandWesternblotinratcardiacfibroblasts．Results：Ratcardiacfibroblastscellsmodelhadbeens

5、uccessfullyestablished．TheexpressionofNLRP3genesignificantlyincreasedunderCoC12一mimickedhypoxiainratcardiacfibroblasts．Conclusion：NLRP3geneisup—regulatedafterhypoxicpreconditioninginratcardiacfibroblasts，andmaybeasignificantcontributortomyocardialinfarction

6、development．[Keywords]hypoxic；LRRandPYDdomains’containingprotein3；real—timepolymerasechainreaction已有研究显示，心肌梗死的发生与炎症反应相目前研究较多的是Toll样受体家族，它能够识别微生关。炎症反应是组织能够愈合的条件，但同时也能引物来源的保守序列。起组织的进一步损伤，影响心室重塑，导致心肌梗死和NLP家族pyrin结构域3(NLRP3)是细胞质识别心肌功能的下。越来越多的证据表明，心肌组织受体，通过形成复合体

7、调节先天免疫反应和炎症。损伤反应与先天免疫系统相关，包括多种受体家族。NLRP3炎症体是多蛋白复合体，它能够活化炎症细胞[收稿日期]2013·09—25[修回日期]201401—28[作者简介]齐斌(1972一)，男，辽宁沈阳人，主治医师，医学硕士。E—mail：qibin202@gmail．corn[引文格式]齐斌，任威，李春江，等．低氧预处理对大鼠心肌成纤维细胞NLRP3基因表达的影响[J]．东南大学学报：医学版，2014，33(4)465-467．·466·东南大学学报(医学版)2014年8月，33(4

8、)因子白介素1(IL。1卢)和白介素l8(IL。18)的前体。RNA进行反转录，合成cDNA，操作步骤按照TaKaRa活化的NLRP3炎症体也能够诱导细胞死亡[3]。我们公司反转录说明书进行。对心肌缺血缺氧状态下NLRP3在心肌成纤维细胞中1．5实时定量PCR检测NL砌P3表达的表达作一观察，为心肌梗死及心肌缺血的诊断和治利用安捷伦Mx3000P。‘Real-timePCR系统进行疗提供分子理论研究