后交联法制备大孔吸附树脂及其对灯盏乙素的分离研究.pdf

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1、离子交换与吸附，2014，30(4)：376—384IONEXCHANGEANDADSORPTIoN文章编号：1001—5493(2014)04-0376—09后交联法制备大孔吸附树脂及其对灯盏乙素的分离研究李世东徐环昕，2刘坐镇，2¨宁方红1,2江邦和1,21华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海2002372上海华震科技有限公司，上海200237摘要：通过种球溶胀法合成的粒径为15pro，交联度为80％的聚(苯乙烯一二乙烯苯)微球(PS．DVB)，以三氯化铁为催化剂，通过悬挂双键后交联反应，制备出具有较高比表面积的大孔吸附树脂色谱填料；

2、利用上述色谱填料装填成规格为4．6mmx250mm的色谱柱，对灯盏乙素进行高效液相色谱分离，以分离度、选择因子、柱效和保留时间为考察指标，研究了流动相比例、流动相流速、柱温和进样浓度等对分离过程的影响。在流动相为乙腈：0．4％冰乙酸(27：73，v：们，流速为1．0mL／min，柱温为30℃，进样浓度为300~g／mL的条件下，灯盏乙素和灯盏甲素的分离度为2．20，两组分可完全分离，保留时间为7．1rain，为灯盏乙素的大规模制备提供了可能。关键词：后交联；灯盏乙素；高效液相色谱；分离中图分类号：0647．3文献标识码：A1前言灯盏乙素又名灯盏花素

3、，是从菊科植物短葶飞蓬的干燥全草(灯盏细辛)中分离得到的黄酮类生物活性成分【l】，在临床上灯盏花素主要有抗凝血、抗血栓形成，改善血液流变性，提高机体耐缺氧能力和抗心肌缺血等作用【2】，可用于治疗缺血性脑血管疾病，对脑溢血、脑血栓形成等所致后遗症瘫痪病人【3】具有较好疗效。目前，以灯盏花素为原料制备的药剂主要有复方化瘀片、灯盏细辛注射液和益脉康片等。市售灯盏花提取物中约含有80％的灯盏乙素和少量的灯盏甲素，由于灯盏甲素会对灯盏乙素药剂的使用产生副作用，除去灯盏花提取物中的灯盏甲素就变得尤为重要。工业上通常以传统的萃取法来分离纯化灯盏乙素【4J，伴随大

4、量酸碱和有机溶剂的使用，符合注射剂标准的灯盏乙素生产路线较长，收率偏低，产品质量波动也较大。目前已有一些关于利用大孔吸附树脂分离灯盏乙素的报道【5】，但是普遍存在回收率偏低的问题。本文利用后交联法制备的比表面积较高的大孔吸附树脂，在高效液相色谱仪上对灯盏乙素粗品进行分离纯化，并讨论了利用上述填料大规模制备注射用灯盏乙素的可能性。’收稿日期：2o14年1月l7日作者简介：李世东(1989一)，男，湖北省人，硕士研究生．”通讯作者：E-mail：lzz@~eusLedu．cn第30卷第4期离子交换与吸附2实验部分2．1仪器与试剂MP．200A型电子天平

5、，上海天平仪器厂；KQ一100DE型数控超声波发生器，昆山市超声仪器有限公司；ZKJ一1型循环水真空泵，上海嘉鹏科技有限公司；BC—W205型恒温浴锅，上海贝凯生物化工设备有限公司；CS101型电热鼓风干燥箱，重庆实验设备厂；HY-HPLC3型标准色谱装柱机，北京海德利森科技有限公司；Agilent1100型高效色谱仪，美国Agilent公司。灯盏乙素原料粗品(纯度为76．9％)；苯乙烯(st)(纯度为99％)，二乙烯基苯(DVB)(纯度为80％)，聚乙烯醇(eVA)(试剂纯)，淄博东大化工股份有限公司；聚乙烯吡咯烷酮(PVP)(试剂纯)，中国医药

6、总公司；过氧化苯甲酰(BPO)(分析纯)，上海试四贺维化工有限公司；偶氮二异丁腈(AIBN)(分析纯)，上海试剂四厂；邻苯二甲酸二丁酯(DBP)(分析纯)，十二烷基硫酸钠(SDS)(分析纯)，乙酸(分析纯)，上海凌峰化学试剂有限公司；无水乙醇(分析纯)，无水三氯化铁(分析纯)，国药集团化学试剂有限公司；浓盐酸(分析纯)，江苏永华精细化学品有限公司；乙腈(色谱纯)，霍尼韦尔有限公司；去离子水(色谱纯)，广州屈臣氏有限公司；二氯乙烷(分析纯)，上海化学试剂有限公司。2．2实验过程2-2．1聚苯乙烯种球的合成采用分散聚合法培】，以苯乙烯为单体，偶氮二异丁

7、腈为引发剂，聚乙烯吡咯烷酮为稳定剂，在乙醇／水介质中升温至70"C，反应24h：产物依次用乙醇洗涤3次，蒸馏水洗涤3次，最后再用乙醇洗涤，真空干燥后得到聚苯乙烯种球。2．2．2聚(苯乙烯一二乙烯基苯)微球的合成采用种球溶胀聚合法[加】，以上述分散聚合法合成的聚苯乙烯微球为种球，加入邻苯二甲酸二丁酯(种球质量的3倍)和十二烷基硫酸钠溶液，超声使其充分溶胀；然后加入含有苯乙烯、二乙烯基苯、甲苯、过氧化苯甲酰和十二烷基硫酸钠的混合溶液；充分溶胀后加入适量5．O％的聚乙烯醇溶液；升温至70~C反应10h，产物依次用水、乙醇洗涤，80"C真空干燥12h后，得

8、到交联度为80％的聚(苯乙烯．二乙烯基苯)微球。2．2．3悬挂双键后交联反应将种球溶胀法制备的聚(苯乙烯．二乙烯基苯)微球