与蓖麻果刺性状连锁的RAPD标记.pdf

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1、●CT●●口日口R射EiC[UiL-TSUIHRI^CE_华北农学报·2014,29(1):83—88与蓖麻果刺性状连锁的PJ~PD标记黄凤兰,赵永,彭木,张智勇,陈晓凤,包春光。,邹千稳,吴春桃(1.内蒙古民族大学生命科学学院,内蒙古通辽028000;2.内蒙古自治区高校蓖麻产业工程技术研究中心,内蒙古通辽028000;3.内蒙古民族大学农学院,内蒙古通辽028000;4.内蒙古通辽市农业科学研究院,内蒙古通辽028000)摘要:为探讨蓖麻果刺性状相关分子机理,以9个果实有刺和5个果实无刺的蓖麻为研究对象,对蓖麻果刺性状进行R

2、APD分析,结果表明:用单因素法优化后的蓖麻果刺相关性状的RAPD—PCR反应体系为Taqpolymerase0.9LLL、10×Bufer2.5p.L、dNTP2.5L、Mg1.3IxL、SBS126号Primer1.4tzL、DNA1.4ILL、ddH2O15.0L,Total25;优化后的反应条件为94oC4min30;94℃45s,38℃45s,72℃45s,35个循环;72℃5rain;4℃保存。利用优化后的反应体系与反应条件,在果实有刺材料中得到了约1800bp的片段,测序结果表明,9个材料的条带上游同源性非常差,但

3、是距离下游约28bp之前有长度为112bp的序列完全相同,推断蓖麻果实有刺性状的发育可能与包含组氨酸的磷酸转移蛋白2有关。关键词:蓖麻;果刺;RAPD;磷酸转移蛋白中图分类号:$565.6文献标识码:A文章编号:1000~7091(2014)01—0083—06TheRAPDMarkerofFruitThornTraitsforCastorHUANGFeng—lan’,ZHAOYong,PENGMu,ZHANGZhi—yong’,CHENXiao—feng,BAOChun—guang。,ZOUQian—wen,WUChun—ta

4、o(1.CollegeofLifeScience,InnerMongoliaUniversityf0rNationalities,Tongliao028000,China;2.InnerMongoliaIndustrialEngineeringResearchCenterofUniversitiesforCastor,Tongliao028000,China;3.AgriculturalCollege,InnerMongoliaUniversityforNationalities,Tongliao028000,China;4.T

5、ongliaoAcademyofAculturalScience,Tongliao028000,China)Abstract:Weselectedninefruitthornsandfivefruitnon.thornsofcastorastheresearchobiectusingtheRAPDmarkerforthethorntraitsanalysis.Theresultswereasfollows:theRAPD.PCRreactionsystemwithopti.mizedbysinglefactorwas0.9Lof

6、Taqpolymerase,2.5LofTaqpolymerase10×Buffer,2.5LofeachdNTP,1.3LofMg,1.4Lof10pmol/LprimerSBS126,1.4txLofDNA,ddH2O15.0txL,Total25txL;Andtherelatedamplificationconditionwas1cycleof4min30sat94℃:35cyclesof45sat94℃.45sat38℃and45sat72℃。followedbyafinalcycleof5rainat72℃,thens

7、avein4℃.Usingtheoptimizedreactionsystemandcondition,severall800bpfragmentsamplifiedbySBS126wasfoundinallthefruitthornmaterial,andsequen.cingresultsshowedthattheupstreamhomologyoffragmentwasverylow,whereasthedownstreamhastheidenticalsequencewithaboutl12bplength.Basing

8、ontheseresults,wededucedthatthedevelopmentoffruitthornmaybeassociatedwithhistidine—containingphosphotransferprotein2.andthisJaidafo

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