hplc测定大鼠肝微粒体温孵体系中二氢血根碱的含量

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1、·34·中国兽药杂志2012，46(11):34～36/伍勇，等HPLC测定大鼠肝微粒体温孵体系中二氢血根碱的含量11221伍勇，刘兆颖，姚芳芳，朱若岑，孙志良(1．湖南农业大学动物医学院，长沙410128;2．湖南农业大学东方科技学院，长沙410128)［收稿日期］2012－03－20［文献标识码］A［文章编号］1002－1280(2012)11－0034－03［中图分类号］R917［摘要］建立了测定大鼠肝微粒体温孵体系中血根碱代谢产物二氢血根碱含量的高效液相色谱法。色谱柱为ShimadzuVP

2、－ODSShim－pack(150mm×4．6mm，5μm);流动相为水∶乙腈(37∶63，V/V);流速1mL/min;柱温35℃;检测波长285nm;进样量10μL。结果显示50nmol/L和1000nmol/L二氢血根碱标准溶液的方法回收率分别为101．72%和98．82%;50、100、500nmol/L标准溶液的日内RSD分别为2．26%、2．57%和3．02%，日间RSD分别为6．21%、4．33%和3．95%;二氢血根碱在25～1000nmol/L内与峰面积呈良好的线性关系(r=0．

3、9996)。本分析方法快速简便，灵敏度高，重现性好，符合方法学验证的要求，可满足二氢血根碱在体外代谢中的定量研究。［关键词］高效液相色谱法;二氢血根碱;大鼠;肝微粒体;DeterminationofDihydrosanguinarineinRatLiverMicrosomesIncubationSystembyHPLC11221WUYong，LIUZhao－ying，YAOFang－fang，ZHURuo－cen，SUNZhi－liang(1．HunanAgriculturalUniversity

4、VeterinaryFaculty，Changsha410128China;2．HunanAgriculturalUniversityEastScienceandTechnologyFaculty，Changsha410128，China)Abstract:AnHPLCmethodforthequantitativedeterminationofdihydrosanguinarineinratlivermicrosomesincubationsystemwasdeveloped．Chromatog

5、raphywasperformedonaShimadzuVP－ODScolumn(150mm×4．6mm，5μm)．Acetonitrile－water(63∶37，V/V)asthemobilephasewasusedat285nmand35℃．Therecoveryrateof50and1000nmol/Lstandardsolutionwas101．72%and98．82%respectively．Therelativestandarddeviationof50，100and500nmol/

6、Lstandardsolutionforthewithin－dayandbetween－daywas2．26%，2．57%，3．02%and6．21%，4．33%，3．95%respectively．Thecalibrationcurvewaslinearwithintherangefrom25to1000nmol/L(r=0．9996)．Theresultsdemonstratedthatthemethodwassimple，fastandsuitableforthequantification

7、ofdihydrosanguinarinemetabolisedinvitro．Keywords:HPLC;dihydrosanguinarine;rat;livermicrosomes血根碱是一种苯菲啶异喹啉类生物碱，主要存的提取分离、药理作用、毒理作用等方面开展了较在于罂粟科、蓝堇科及芸香科的植物中，具有抗菌、深入的探索，但对血根碱的药物代谢研究甚少，仅抗炎、抗高血压、抗肿瘤、增强免疫力、杀虫及促进有一些以大鼠作为试验动物的初步研究，从报道中［1］动物生长等作用。国内外研究者已经对血根碱仅获知

8、将大鼠灌胃血根碱后，二氢血根碱的生成是作者简介:伍勇，讲师，在读博士，从事药物代谢研究。通讯作者:孙志良。E－mail:sunzhiliang1965@yahoo．com．cn2012，46(11):34～36/伍勇，等中国兽药杂志·35·［2］血根碱在体内代谢的主要途径。同时，在血根碱mmol/L二氢血根碱甲醇储备溶液。然后加入空白转变成二氢血根碱这个过程中，参与的代谢酶研究肝微粒体，用0．05mol/LTris－HCl缓冲液(pH未见任何报道。因此，建立血根碱的代谢产物二氢7．