食品免疫学 6抗原和抗体的制备

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1、GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.第六章单克隆抗体的制备和应用GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.本章内容第一节单克隆抗体的概念和基本原理第一节单克隆抗体的概念和基本原理第二节单克隆抗体制备的主要步骤第二节单克隆抗体制备的主要步骤Generated

2、byFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.NielsK.JerneGeorgesJ.F.KöhlerCésarMilsteinGeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.克隆（Clone）又名无性繁殖系，指由一个祖先细胞经分化、增殖所产生的遗传性状完全相同的细胞群Generated

3、byFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.多克隆抗体（Polyclonalantibody,pAb）用包含多种抗原决定基的抗原物质免疫动物，从而刺激多个B细胞克隆产生针对多种抗原表位的不同抗体的总和，称为多克隆抗体单克隆抗体（MonoclonalAntibody,mAb）由一个杂交瘤细胞克隆所产生的，针对单一抗原决定簇的抗体，称为单克隆抗体GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSo

4、ftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.单克隆抗体的优点单特异性和均一性无限供应用混合的抗原制备出识别一个抗原决定簇的抗体GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.BB淋巴细胞杂交瘤技术的基本原理骨髓瘤细胞B细胞杂交瘤细胞GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.fo

5、xitsoftware.comForevaluationonly.杂交细胞（hybridcell）在外界某些条件干预下（如PEG、电穿孔），当两个细胞紧密地接触的时候,其细胞膜可能发生融合，产生具有原来两个细胞染色体/基因的单个细胞，称为杂交细胞GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.杂交瘤细胞（Hybridomas）若用一种肿瘤细胞与另一种体细胞（如淋巴细胞）融合，所形成的杂交细胞称为

6、杂交瘤细胞，简称杂交瘤。其既具有肿瘤细胞无限增殖的能力，也具有淋巴细胞的一些特性B淋巴细胞杂交瘤骨髓瘤细胞与免疫B细胞融合所产生的杂交瘤细胞GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.第二节单克隆抗体制备的主要步骤第二节单克隆抗体制备的主要步骤抗原制备免疫动物骨髓瘤细胞及饲养细胞的制备细胞融合杂交瘤细胞的选择培养杂交瘤细胞的筛选及克隆化单克隆抗体的鉴定单克隆抗体的制备GeneratedbyF

7、oxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.一、抗一、抗原原颗粒性抗原：细胞、细菌和病毒等，一般具有较强的免疫原性，可不加佐剂。例如，直接腹腔注射1~2×107个细胞。可溶性抗原：可溶性抗原的来源主要是天然纯化，或者用目的基因在原核或真核细胞内表

8、达。可溶性抗原需与弗氏完全或不完全佐剂混匀，进行免疫。GeneratedbyFoxitPDFCreator©FoxitSoftwarehttp://www.foxitsoftware.comForevaluationonly.二、免疫动物免疫目的：BB淋巴细胞在目的抗原刺激下增殖、分化，形成能分泌特异性抗体的BB淋巴细胞，有利于细胞融合形成分泌