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时间:2019-07-01
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1、抗原抗体反应第一节抗原抗体反应原理第二节抗原抗体反应特点第三节抗原抗体反应影响因素第四节抗原抗体反应类型一、基本原理第一节抗原抗体反应原理Ag决定簇和Ab分子超变区相互作用(相互吻合,具有互补性)分子表面特异的可逆的弱结合力在极短距离内才能发生基本条件:结合力亲和性亲水胶体转化为疏水胶体抗原和抗体的结合是互补性的特异性结合不形成牢固的共价键,通过非共价键结合这种弱的结合力涉及几种分子间的作用力一、抗原抗体结合力一、抗原抗体结合力*1.静电引力*2.范德华引力*3.氢键结合力*4.疏水作用力抗原抗体结合力示意图抗原抗体氢键结合力ONONH
2、H静电引力--++范得华力-++-+--+疏水作用力排斥的水二、抗原抗体亲和性(affinity)*亲和性是抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间的相适应性而存在着的引力,这是抗原与抗体之间固有的结合力。*亲和力(avidity)是指反应系统中复杂抗原与相应抗体之间的结合能力。亲和力与亲和性、抗体的结合价和抗原的有效决定簇数目相关。亲和力越大,抗原抗体结合越牢固。亲和常数亲和常数K=K值大的抗体与抗原牢固结合,不易解离,说明该抗体有高亲和力。抗体与抗原结合是可逆的反应,在平衡时其血清学反应条件下,抗原抗体均带负电荷,使极化的水分
3、子在其周围形成水化层,成为亲水胶体。三、亲水胶体转化为疏水胶体当抗原与抗体结合后,表面电荷减少,水化层变薄;而且由于抗原抗体复合物形成后,与水接触的表面积减少,由亲水胶体转化为疏水胶体。在电解质作用下,各疏水胶体之间靠拢,形成可见的抗原抗体复合物。亲水胶体转化为疏水胶体示意图亲水胶体疏水胶体转化NaCl可见反应第二节抗原抗体反应的特点*1.特异性*2.比例性*3.可逆性一、特异性(specificity)*概念:抗原分子,只能与由它刺激所产生的抗体结合而起反应的专一性能。一、特异性*决定因素:由抗原决定簇和抗体分子超变区之间空间结构的互
4、补性决定的。抗体分子N端可变区形成3nm×1.5nm×0.7nm的槽沟,只有与其空间结构互补的抗原决定簇才能如楔状嵌入。*交叉反应(crossreaction)两种不同的抗原物质具有部分相同或类似结构的抗原决定簇,则可与彼此相应的抗体反应。特异性示意图*最适比(optimalratio)或等价点(equivzlencepoint)最迅速出现沉淀时的抗原抗体的浓度比或量比。二、比例性(proportionality)等价带(equivalencezone)抗原与抗体分子比例合适的范围。带现象:Ag与Ab比例不适而不出现可见反应。*前带(p
5、rozone)抗体过量时。*后带(postzone)抗原过量时。比例性示意图抗体过量比例合适抗原的量抗原过量抗体沉淀的量前带等价带后带三、可逆性(reversibility)概念:是指抗原与抗体结合成复合物后,在一定条件下可解离为游离抗原与抗体的特性。解离后抗原抗体仍保持原有特性。一定条件:低pH、高浓度盐等。常用于解离抗原抗体复合物的物质有:3mol/L硫氰化钾、pH2.40.1mol/L甘氨酸、7mol/L尿素等。抗体混有SPAg抗体-SPAg抗体-SPAg分离剂一、抗原抗体结合二、分离抗体可逆性示意图抗体第三节抗原抗体反应影响因素
6、一、反应物自身因素*抗原:1.理化特性2.Ag决定簇数量3.Ag决定簇种类*抗体:1.来源2.特异性与亲和力3.浓度二、环境条件:*电解质:0.85%NaCl*酸碱度:pH6~9*温度:15~40℃*酸凝集:当pH为3左右时,接近细菌Ag的等电点,可出现非特异性凝集。
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