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1、第卷第期温和瑞等荧光指示剂在细胞内金属离子侧定中的应用,,,化学试剂荧光指示剂在细胞内金属离子测定中的应用”温和瑞黄振泉,。。翰南师范学院化学系翰州、。。一、一。一、摘耍概述了荧光指示剂测定细胞内金属离子的原理仪器及进展简要介绍了、,、。和分别用于细胞内和的测定,,,关傲词荧光指示剂金属离子细胞应用’的,生物体中的许多生理活动都包含着金属离选择性仍较差激发光波长受到细胞。十·。,,,「,,子的作用例如
2、对细胞的代谢与功能自发荧光的千扰等年【’,”。,十’干有着重要的调节作用是一种细胞等发展了目前使用最为广泛的第二代荧。,光指示剂一一比一产内部结构稳定剂和内酶的辅因子它对生的〔”‘,。的复制和蛋白质的生命合成必不可少飞荧光强倍对有较好的选择性十的主要生理功能是维持细胞正常的渗透压现在已经合成出了第三代钙离子荧光指示剂。十一〔,,。一’,一结后荧光强度比和膜电位作为细胞内酶的辅基细胞内合十一,外和的浓度梯度是膜电位的主要来游离态强
3、倍以上而且最大吸收激。,,、,、,源因此研究细胞内和发光波长位于能远离,,等离子浓度的变化在生命科学中具有重的激发光范围避免了透镜的吸收和细胞自发。。要的意义应用荧光指示剂测定细胞内金属离荧光的干扰,年,「’。,等合成出一类以冠醚子是八十年代发展起来的一门新技术它具有十。、、为分子骨架的。和的荧光指示剂其高敏感响应快对细胞无损伤和测定简便等,。十一。〔”】优点因而具有广泛的应用前景中性能较好的是和,小一。一。等合成出荧光指示剂图。
4、荧光指示剂的发展为几种荧光指示剂的分子结构最早用于细胞内金属离子测定的荧光剂是,〔,侧定原理氯四环素用它来测定细胞内的十。,、,、,。’但氯四环素在非极性溶剂中荧光强度很和等金属离子它,,,强而在极性溶剂水中却很弱这一缺点影响本身在可见光范围内没有荧光但当它与荧光’。「,’,它用于细胞内的侧定年指示剂结合后能使荧光指示剂的荧光光谱发。。一。’十合成出一种类似于结构的钙荧光指示生变化下面我们以侧定细胞内。,一一,’一剂双邻氨基苯氧基乙基四乙为例来说明其
5、测定原理用于细胞内余属离。,子甜定的荧光指示剂均有两种形式游离酸形酸这种荧光剂的醋可以渗透到细胞中但它。。,〔”的离子选择性较差年等进一式和其醋的形式游离酸能与金属离子步对该化合物进行结构改进合成出能适用于细。’十一。收稿日期年月日胞内侧定的第一代荧光指示剂”本文部分内容,在《全国微元素与健康学术交流一,一。。但仍然存在一些不足如对会》上交流江西省青年科学甚金资助课月年’’,一一入一喊、‘,、’分’‘〔·二毛》冲、,
6、一议邻氨从苯俄从氯四环东乙华一夕一四乙队‘卜自袱丫一、’‘之““、“”“,‘‘‘广’之文全一一’,,‘求“又犷丫勺一劝叮丫丫淤。一卜,’‘,全峭‘“”。一”丁。尹,诊入一是卜全址。”入一‘飞知火。、又方初乡二丫灯守‘图几种荧光指示剂的分子结构,。结合但不能渗入细胞不能与金属离子,。一结合但能渗人细胞进人细胞,,后在胞浆醋酶的作用下水解脱醋释放出一。一
7、’十与胞内结合形成一。一一一,较荧光增强且最、叭。‘”,。大吸收激发光波长从移至二,同时测得和激发的荧光强度根据这两种荧光强度的比值即可计算出细胞内,十,十,〔,,游离的浓度〔。一二。二二二一及〔刀人咖。,一“。式中刀二为实测荧光减去细胞自发图测定〔」的生化原理。一.r一。。;2ua2A、I,sterase荧光强度后的荧光强度比值2/AMF/E;..
8、r一一一auauraF;F3242C。二为一一的离解常数二为胞内一,十,。。被饱和时的荧光
