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1、第37卷第3期海洋与湖沼Vol137,No132006年5月OCEANOLOGIAETLIMNOLOGIASINICAMay,2006氨氮胁迫对中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)*免疫功能的影响黄鹤忠李义宋学宏王永玲杨彩根(苏州大学生命科学学院苏州大学水产科学研究所苏州215006)提要在实验室条件下构建不同氨氮浓度环境和养殖时间的组间差异,研究氨氮胁迫对中+华绒螯蟹免疫功能的影响。结果表明,中华绒螯蟹在NH4-N310mg/L10天或110mg/L20天+时,其血淋巴血细胞密度极显著地低于对照组(P<0101)。NH4-N210mg/L
2、和310mg/L无论10天或20天,血细胞吞噬百分率均分别为显著(P<0105)和极显著(P<0101)地低于对照+组。NH4-N310mg/L10天或210mg/L20天,血细胞吞噬指数显著低于对照组(P<0105)。+NH4-N110mg/L和210mg/L分别20天时,血清溶菌酶(LSZ)活力分别为显著(P<0105)和极+显著(P<0101)地低于对照组。NH4-N110)510mg/L10天时,血清酚氧化酶(PO)活力均极+显著(P<0101)下降;但NH4-N110)410mg/L20天时,血清PO活力水平均比10天时有所+上升。NH4-N
3、310)410mg/L10天或110)210mg/L20天,以及510mg/L10天或310)510mg/L20天时,超氧化物歧化酶(SOD)活力分别为显著(P<0105)和极显著(P<0101)地低于对照组。上述结果表明,随着氨氮胁迫浓度的增加和胁迫时间的延长,会引起中华绒螯蟹血细胞数量、血细胞吞噬能力、溶菌酶活力、酚氧化酶活力和超氧化物歧化酶活力等的逐渐下降,使机体非特异性免疫防御系统遭到损伤,同时机体清除自由基的能力下降,机体细胞和组织受到伤害甚至出现死亡。关键词中华绒螯蟹,氨氮胁迫,血细胞,免疫功能中图分类号Q48在集约化养殖系统中,由于养殖动
4、物的排泄体质下降、各种蟹病不断发生。例如,传统的中和残饵的氨化作用,造成氨氮不断积累,影响养华绒螯蟹静水充气育苗中后期即便通过大量换水殖生物的生长,甚至发生毒害。氨氮已成为水产改善水质,水中的氨氮含量仍然高达2197mg/L,是养殖系统中最普遍的毒性物质,但人们很少了解导致成活率下降的重要原因(王武等,1999)。目氨氮对甲壳动物免疫系统的影响(Gillesetal,前还未见到国内外有关氨氮胁迫对中华绒螯蟹2000)。已有报道表明,氨氮能对水生生物的许免疫功能影响的研究报道。本试验中作者采用多器官造成损伤,是十分有害的物质(Coltetal,实验生态学
5、方法,研究了养殖中华绒螯蟹在不同1981)。中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)是目前我氨氮胁迫环境条件下10天和20天以后血淋巴血国内陆水域中最重要的名特优养殖品种之一,其细胞数、吞噬细胞吞噬能力、血清酚氧化酶(PO)养殖规模不断扩大、养殖产量不断提高。但许多活力、血清溶菌酶(LSZ)活性、血清超氧化物歧化养殖地区盲目追求产量、片面地增加放养密度和酶(SOD)5种非特异性免疫指标的变化情况,为投饵量而忽视了养殖水质的保护,导致氨氮等有中华绒螯蟹的环境生理和免疫机制以及养殖水害物质在水中大量积累,引起养殖蟹生长缓慢、环境调控提供基础数据和理
6、论依据。*江苏省科技厅社会发展项目,BS2002016号;苏州市重点科技攻关项目,ZN0308号。黄鹤忠,副教授,E-mai:lhuanghz@suda.edu.cn、suda-shu@i163.com收稿日期:2005-01-10,收修改稿日期:2005-08-153期黄鹤忠等:氨氮胁迫对中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)免疫功能的影响1991材料与方法115血清酚氧化酶(PO)活力的测定111实验用蟹与用水以L-dopa为底物,参照(Ashida,1971)的方中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)于2004年3法进行。将3
7、ml011mol/L的pH为610的磷酸缓月20日取自江苏省常熟市水产养殖场池塘养殖冲液与011ml0101mol/L的L-dopa及011ml待测的健康个体,体重(65132?3146)g,至分组实验血清于室温下混匀,每次间隔1min读取在490nm前在养殖生态室PVC水槽内适应性暂养2周,暂波长下的光吸收值。以A490对反应时间作图。以养期间水温逐渐升至21e并保持恒定,气石连续试验条件下A490每分钟增加01001定义为1个酶充气,每天吸污换水1/4池水,饵料投喂采取上活力单位(Unit)。午为泡软的玉米粒,傍晚为新鲜洗净的螺蛳肉,116血清溶菌
8、酶(LSZ)活力的测定确保摄食充足。养殖环境安静,无攀爬出水面和取溶壁微球菌(Micrococ
