动物试验2014.9.23

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1、动物试验杨俊贤2014.9.23王修启研究员课题组1肉品质测定胚蛋注射孵化实验饲养实验样品采集2场地选择饲养实验实验条件：养殖场的生产规模（动物数量、栏舍情况）、生产管理水平（动物健康）天气情况人员配合情况路程王修启研究员课题组3试验设计的基本原则健康动物年龄、体重相近性别比例一致单因素试验：唯一变量处理间及重复（栏）间起始条件一致王修启研究员课题组4动物分组---如何设置处理和重复根据试验目的，设置对照组和若干处理组，每个处理组设重复。以栏为重复单位猪：设4-6个重复鸡：5个重复以上以个体为重复单

2、位猪：6个重复鸡：12个重复王修启研究员课题组5动物分组---如何保证不同处理、重复试验条件的一致性动物条件一致环境条件一致称重分组前根据肉眼观察初步调整动物王修启研究员课题组6动物分组门中间走廊A1A2A3A4A5A1B1C3D3B4D1A4C1A2A5A3C4C2C5B2B5B3D4D2D5王修启研究员课题组7动物分组王修启研究员课题组8日常管理自由饮水自由采食防疫措施动物保健王修启研究员课题组9孵化实验孵化机准备种蛋筛选种蛋分组及入孵孵化管理孵化机操作说明王修启研究员课题组10孵化机准备清洁：

3、将孵化机内外灰尘、蛋壳等残留物清理干净。消毒：将孵化机所有出风口堵死，向孵化机内放一盛有自来水的塑料盆，将装有（15g/m3孵化机体积）高锰酸钾的烧杯放到塑料盆内，向烧杯中倒入（30mL/m3孵化机体积）甲醛溶液，并迅速关好孵化机的门。熏蒸1~2小时后打开孵化机的门，疏通所有出风口，更新孵化机内空气。注意：请戴口罩，注意防护！试运行：调好各种参数，试运行1~2天，各项参数均正常后方可开始正式试验。王修启研究员课题组11种蛋筛选蛋品质：去除畸形、肮脏、沙壳、破蛋。重量：按顺序在每个蛋的大头编号，称重，

4、将超出（1±10%）×平均蛋重的蛋剔除。剩余的蛋为合格种蛋，可用于孵化试验。王修启研究员课题组12种蛋分组与入孵按照试验计划，将种蛋分成若干组，使组间蛋重无显著性差异（P＞0.90）。以组为单位，将种蛋摆放于蛋托内，组与组之间有明显的分界。入孵：采样以组为单位取样，根据采样的先后顺序，入孵时将相邻采样点所要采集的种蛋安放在孵化机内空间上相对应的位置。王修启研究员课题组13种蛋分组与入孵将种蛋编好号，称重。按重量大小排序。按照试验计划，以“S”型顺序将种蛋分成若干组，使组间蛋重无显著性差异。王修启研究

5、员课题组14照蛋时间：鸡为9和19胚龄鸽为7胚龄。环境：光、温度熟悉胚胎发育情况（光蛋、死胚、弱胚），动作迅速。王修启研究员课题组15孵化管理每天早晚各检查一次孵化机的运行情况：温湿度水（两天加一次）翻蛋其他王修启研究员课题组16孵化机操作说明王修启研究员课题组17胚蛋注射胚胎期的生长速度对鸡出壳后的生长发育至关重要。胚蛋注射源于鸡胚接种技术，即通过向禽胚中注射外源物质（如氨基酸、生长因子等）以研究这些外源因子在动物个体生长发育中的作用。王修启研究员课题组18王修启研究员课题组气　室鸡　胚卵黄囊尿囊

6、腔羊膜腔绒毛尿囊膜卵　白卵膜19卵白注射在鸡胚10d时尿囊绒毛膜已将卵白完全覆盖，找不准卵白注射位点，故卵白注射一般在2~9d进行。外源物质注射到卵白后，会与卵白内的其它营养物质混合，可能不会立即被胚胎吸收、利用，因此，一般取样时间是在注射后3~7d开始。注意避开血管，针头插入0.5mm即可，注射液体积一般在0.1~1.5mL。王修启研究员课题组20卵黄囊内注射卵黄是胚胎发育的重要营养来源，卵黄囊内注射的外源物质能较好地被胚胎吸收。鸡胚发育到18~21d时卵黄囊被收入腹腔，因此卵黄囊内注射应在18d

7、前进行.注意注射前溶液要预热至孵化温度。王修启研究员课题组21羊膜腔注射羊膜腔是离胚胎最近的腔室，注射到羊膜腔的外源物质利用效率高，而且，羊膜腔内的营养物质可提供给整个发育期的胚胎，没有注射时间的限制。但羊膜腔处于胚蛋内部的中心，注射操作上有一定难度，注射后对胚胎发育会产生较大干扰阻碍了它的应用。王修启研究员课题组22尿囊注射尿囊注射运用得最早、最成熟，但尿囊内营养成分较少，且利用效率有限。鸡胚在19d开始肺呼吸，尿囊绒毛膜开始萎缩，因此尿囊注射应该在19d前进行。王修启研究员课题组23尿囊血管注射

8、一般胚蛋注射，都会力求避开血管，以降低对胚胎的直接应激。尿囊血管在10~17d较为粗大，清晰，因此注射操作多集中在这段时间。优点：注射后的物质胚胎吸收快、利用率高，从而及时衡量注射因子的作用效果。王修启研究员课题组24气室注射气室注射的外源物质主要通过渗透作用被胚胎吸收利用。鸡胚在19d后尿囊绒毛膜开始萎缩，渗透作用开始减弱，3~18d是适宜的注射时间。气室内物质的吸收效率较其它注射方式差，吸收利用受多方面影响，只能做出定性的判断。王修启研究员课题组25样品采集采样流