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1、植物组织培养的应用学号：20094011214姓名：唐浩班级：09级(2)班指导老师：鞠世杰专业：农学黑龍沁小一激奎丈孝墨兰的组织培养一、参考文献：项艳，於凤安，彭镇华•《墨兰离体快繁研究》•《林业科学研究》,2003,16(4):434一438二、概述：项艳等人以墨兰的茎尖和腋芽作为外植体的材料。用材料的表面灭菌，类原球茎的诱导与增值，芽的诱导与增值，根的诱导，移植的多种方法。得到组织松脆、密集的绿色类原球茎能分化为不定芽，而组织松软、含水丰富、潮湿的黄色类原球茎则不能［5］。同时，墨兰在生长素比例较
2、大、激动素比例较小的培养基中，易于增殖类原球茎，而不易于分化的结果和正交试验筛选的芽增殖］匚佳培养基为:MS+6-BA4.0mg・L一】+NAA1.0mg・L「+琼脂8g・L_】+蔗糖30g・L「。筛选出的最佳生根培养基为：1/2MS+NAA3.0mg・1＞一】的结果三、结论：①再生途径：外植体-类原球茎"芽；外植体-类原球茎"芽f根②灭菌方法：材料的表面灭菌取6〜13cm的新芽，从植株茎部切离，用利刀除去根、脏物和外包叶2〜3片，充分洗净后将材料再切取2〜3cm,在10%次氯酸钠药液中消毒10min,
3、灭菌后用无菌水冲洗数次，再放到灭菌滤纸上吸干水份，然后在解剖镜下无菌操作剥取茎尖和腋芽，一般茎尖大于2mm,带2个原叶基，接种到培养基中。最后移植炼苗3〜4d,取出苗后洗净粘在根上的培养基，晾干后，栽植在通气、透水、保湿的介质中。先在高湿、弱光条件下缓苗6〜10d,以后放在15-25°C＞空气相对湿度80%左右的条件下养护，定期补施营养液。③培养基：芽增殖最佳培养基为MS+6—EA4・0mg・L一】+NAAl.Omg・L_】+琼月旨8g・L「+蔗糖30g・L「。筛选出的最佳生根培养基为：1/2MS+NA
4、A3.0mg•L-1④培养条件：外殖体接种后放置在23-25£的黑暗条件下，培养1〜2个月。栽植在通气、透水、保湿的介质中，先在高湿、弱光条件下缓苗6〜10d,以后放在15〜25£、空气相对湿度80%左右的条件下养护,定期补施营养液。一、参考文献：傅雪琳,张志胜，何平2,欧秀娟，何琼英・《墨兰根状茎绿芽分化的研究》・《华南农业大学学报》，2003,(7):53—55二、概述：傅雪琳等人以墨兰根状茎为材料，用绿芽分化的基本培养基是MS及在MS基础上自行设计的ZW。根据实验处理的需要添加不同的激素、活性炭等
5、的方法。得到激素配比对绿芽分化的影响不同激素配比对绿芽产率和绿芽生长势的影响结果表明，5.00mg・L—】处理的绿芽产率最高，绿芽长势也最旺盛，其次是处理C和E,处理E最差，但在处理E上根状茎有增殖生长，个别绿芽亦有白色根长出的结果。三、结论：①再生途径：种子-绿芽分化的根状茎②灭菌方法：用作绿芽分化的根状茎是从墨兰成熟种子诱导出，经继代繁殖3-4代、稳定正常生长且较均匀一致的材料。绿芽分化的基本培养基是MS及在MS基础上自行设计的ZW根据实验处理的需要添加不同的激素、活性炭等•所有培养基均添加蔗糖50
6、g・琼脂8g・L—】,pH5・8s6.0③培养基：MS和ZW为基本培养基加入5.00rng・L一】6—BA+0.50mg・L—】NAA④培养条件：MS,ZW培养基，所有培养基均添加蔗糖50g・f1,琼脂8g・L-1,pH5.8s6・0,Cox一射线辐照处理以MS+6-BA5.00mg・L_】+NAA0.50mg・L一】+蔗糖50g・L一】+琼脂8g・L一】为分化培在根状茎转入分化培养基7d后进行不同剂量的辐照处理•以MS和ZW为基本培养基，设置了不同的激素浓度配比.在分化培养基中添加了活性炭，分别为0.
7、25,0.50,0.75丄00g”L-结果不同浓度的活性炭对根状茎绿芽分化的影响相一致一、参考文献：陈丽，潘瑞炽，陈汝民•《墨兰原球茎生长的研究》・《热带亚热带植物学报》，1999,7（1）:59—64二、概述：陈丽等人以墨兰种子胚经培养诱导萌发形成的原球茎为材料，用组织培养使种子萌发获得原球茎的方法,得到在不同培养基上培养的原球茎，其鲜重增长百分率有显著差异。以及原球茎前期鲜重增加较慢是原球茎接种后的诱导适应过程，而后期较慢是因培养基营养成分逐渐减少。由于原球茎分生能力很强，如果继代培养则可无限增殖
8、的结果。三、结论：①再生途径：种子胚-原球茎②灭菌方法：原球茎的获得供试材料为墨兰栽培种“企黑“组织培养方法使种子萌发获得。原球茎的生长速度以鲜重表示。取培养一定时间的原球茎，去净表面琼脂，用滤纸吸干水分。③培养基：MS培养基为基本培养基。④培养条件：原球茎的获得培养基用改良MS,固体静止培养，培养温度25士2C,照光时间12hd一】，经过3・6个月的后熟阶段萌发形成。墨兰原球茎培养在pH4.0一7.0对照（MS配方的pH5.8）多31%条
