益肾化湿颗粒治疗大鼠糖尿病肾病中ERK表达及意义.doc

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1、益肾化湿颗粒治疗大鼠糖尿病肾病中ERK表达及意义[摘要]目的探讨益肾化湿颗粒在治疗大鼠糖尿病肾病中的ERK表达及其意义。方法将40只SD(Sprague-Dawley)大鼠随机分为正常对照组(N组)、糖尿病肾病组(DN组)、益肾化湿颗粒治疗组(DN+Y组)、贝那普利治疗组(D7+B组)。对照组用等量柠檬酸缓冲液腹腔注射,糖尿病肾病组和各治疗组制备糖尿病模型,取血检测血糖(GIX)、血清肌酊(SCr)、血清尿素氮(BUN)、24h尿蛋白定量,以免疫组化方法检测各组肾组织P-ERK1/2表达及其意义。结果治疗后8周

2、,DN组大鼠血糖明显升高,血清肌酊(SCr)、血清尿素氮(BUN)、24h尿蛋白定量等指标与N组相比明显升高,二者差异有统计学意义(P0.05)。结论在糖尿病肾病的产生、发展过程中,ERK参与其中,其表达增加可能对DN的进一步发展造成影响;益肾化湿颗粒能够对DN大鼠肾皮质中ERK的活性予以有效限制,从而对DN肾脏起到一定的保护作用,这说明益肾化湿颗粒在糖尿病肾病的治疗中表达明显,具有较高的临床应用价值。[关键词]益肾化湿颗粒;糖尿病肾病;细胞外信号调节激酚[中图分类号]R587.2[文献标识码]A[文章编号]1

3、672-4062(2016)02(b)-0052-04糖尿病是当前在临床上一种发牛几率较高的慢性代谢性疾病,影响患者的口常生活,甚至对生命健康直接造成威胁,而糖尿病肾病(diabeticnephropathy,DN)则是该病诸多并发症中最为严重的一种[1]。DH的临床症状集中变现为早期水肿、高血压,晚期肾功能损害[2]。由于目前糖尿病的发病率高居不下,且愈演愈烈之势,针对糖尿病肾脏疾病的临床研究与诊治已经刻不容缓,然而当前学界关于DN的具体发病机制依然没有达成一致共识。一般认为,DN的发生可能与包括细胞因子、糖

4、脂异常代谢活动、生长因子等诸多综合因素的影响作用有关[3]。近年来的文献报道显示,胞外信号调节激酶(ERK)与DN之间存在密切关联;同时学界也开始尝试探讨益肾化湿颗粒在DN临床上的疗效及其病理表达[4]o该次实验通过研究益肾化湿颗粒治疗大鼠糖尿病肾病中ERK表达及意义,取得了一定成效,现报道如下。1资料与方法1.1一般资料1.1.1动物雄性SD大鼠40只,6~8周龄,体重(200±20)go1.1.2试剂p-ERKl/2(Thr202/Tyr204)多克隆抗体。益肾化湿颗粒,广州康臣药业有限公司生产,生产批号0

5、40930,国药准字Z20090250,规格:10g/袋X9袋。1.2方法1.2.1动物模型制备与分组40只SD大鼠饲养一周后,随机抽取10只为止常对照组(N组),喂养普通饲料;其余30只喂养高糖高脂饲料,30d后予以腹腔注射50mg链腺佐菌素(STZ)造成糖尿病模型,连续两次血糖216.7mmol/L者即为造模成功。30只大鼠分为糖尿病肾病组(DN组)、益肾化湿颗粒治疗组(D7+Y组)、贝那普利治疗组(DN+B组)各10貝。对糖尿病组和各治疗组制备糖尿病模型,对照织则用筹量柠檬酸缓冲液腹腔注射。成模后各治疗组

6、大鼠每天分别用益肾化湿颗粒溶液[150mg/(kg?d)]、贝那普利水溶液(浓度为0.11%)按10mg/(kg?d)的剂量进行治疗性灌胃,对照组和糖尿病肾病组用等彊生理盐水灌胃。所有大鼠实验期间均食用标准饲料,自由饮水,不使用胰岛素和其他降糖药物,连续观察8周后收集标本[5-6]。1.2.2标本留取观察8周后称体重,留24h尿,24h尿蛋白(mg)=24h尿量(inL)X尿蛋白含量(g/L)。经乙讎麻醉后,采血,抗凝分离血浆,留待检测。迅速打开腹腔,游离并摘除双肾,称取肾重,左肾去包膜后,切取10mni3组织

7、块,放入4%多聚甲醛中固定,4°C保存;常规石蜡包埋,4Pin切片,予以HE染色、PAS染色;切取1nm)3组织块,放入0.25%戊二醛溶液中,4°C保存[7]。1.2.3观察指标P-ERK1/2表达、肾功能指标(包括血糖GLU、血清肌BfSCr、血清尿索氮BUN、24h尿蛋白定量)。1.3统计方法应用SPSS19.0统计软件进行数据统计处理,以均数土标准差(x±s)表示计量资料,两组均数比较采用t检验。2结果2.1对血糖(GLU)的影响治疗8周后,DN组大鼠的血糖(22.17±1.03)mmol/L与N组(4

8、.88±0.26)mmol/L相比明显升高,二者差异有统计学意义(P0.05)。见表1。2.2对SCr、BUN、24h尿蛋白定量的影响治疗8周后,DN组大鼠的SCr(132.41土7.42)umol/L>BUN(126.24±3.78)mmol/L、24h尿蛋白定量(25.57±2.13)mg/24h与N组相比明显升高,二者差异有统计学意义(P0.05)。2.3大鼠肾组织p-ERKl/

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