养营活血汤对肝纤维化大鼠血清TNF-α和IFN-γ的影响-论文.pdf

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1、宁夏医科大学学报第36卷6期·628·JournalofNingxiaMedicalUniversity2014年6月文章编号：1674—6309(2014)06—0628—04·论著·养营活血汤对肝纤维化大鼠血清TNF一0c和IFN—y的影响范庆寅，牛阳，唐理蒙，刘广辉，周波(1．宁夏医科大学回医药现代化省部共建教育部重点实验室，银川750004；2．宁夏医科大学基础医学院人体解剖学系，银川750004)摘要：目的研究养营活血汤对肝纤维化大鼠的治疗作用以及对其血清TNF一和IFN～．y水平的影响。方法选取60只SPF级的Wistar大鼠，随机分为6组：正常对照组，模型对照组，秋水仙碱治

2、疗组，养营活血汤低、中、高剂量组。采用复合因素制备大鼠肝纤维化模型，12周后全部采用乙醚麻醉处死，心脏采血并在肝左叶同一部位取肝组织标本，HE染色，进行组织纤维化评定，并用ELISA法检测大鼠血清TNF—和IFN一的含量，观察养营活血汤对其含量的影响。结果经养营活血汤低、中、高剂量治疗后大鼠肝组织纤维化增生均减少，汇管区内炎性细胞均减少，肝细胞水肿程度均明显减轻。肝纤维化分级显示秋水仙碱治疗组、养营活血汤中、高剂量组肝纤维化程度明显低于模型组(P<0．05或P<0．01)；养营活血汤高剂量组肝纤维化程度明显低于养营活血汤低剂量组和秋水仙碱治疗组(P<0．01)；养营活血汤中剂量组肝纤维化

3、程度明显低于低剂量组(P<0．05)。细胞因子检测显示：养营活血汤中、高剂量组大鼠血清中IFN一的浓度与模型对照组相比，明显降低(P<0．O1)；养营活血汤低、中、高剂量组大鼠血清中TNF—的浓度与模型对照组相比，明显降低(P<0．05或P<0．01)。结论养营活血汤可减轻大鼠肝纤维化程度，其作用与降低大鼠血清TNF～0【和IFN一含量有关。关键词：养营活血汤；肝纤维化；细胞因子中图分类号：R575文献标识码：A肝藏血、主疏泄、喜条达，营虚血瘀导致了肝观察该方药对大鼠肝纤维化的治疗作用。纤维化。目前肝纤维化作为肝细胞肝癌的高危因1材料和方法素在临床上已经得到足够的重视。临床中运用温1．1

4、实验动物60只雄性SPF级Wistar大鼠，病营血理论对其进行辨证治疗往往能取得良好的6—8周龄，体重180～220g，均购于宁夏医科大学疗效，但缺乏客观的实验依据。有研究表明_1J，实验动物中心。众多的细胞因子参与了门静脉高压和肝纤维化的1．2实验用药黄芪、当归、川I芎、生地黄、熟地形成。其中较为主要的因子有肿瘤坏死因子一OL黄、赤芍、白芍、陈皮、丹参、泽兰、炙甘草、红枣购(TNF一仪)和干扰素一(IFN一)，TNF—oL对肝于宁夏医科大学中医门诊部。养营活血汤由黄芪纤维化的发生和发展起着至关重要的作用，体内30g、当归12g、川芎12g、生地黄12g、熟地黄12g、大量TNF—Ot的

5、释放最终引起肝脏大量细胞外基赤芍15g、白芍10g、陈皮lOg、丹参15g、泽兰12g、质的合成与沉积，从而导致肝纤维化J，肝纤维化炙甘草9g、红枣3枚配伍组成，用常规方法熬制时血清中TNF一仅的含量明显升高。IFN一^y则成中药煎剂并按照5：1的比例进行浓缩处理，浓能激活巨噬细胞并增强其吞噬能力，加重肝脏炎症缩液含生药比例为2g·mL～。秋水仙碱粉剂的发生进一步引起肝纤维化j。本实验以温病卫10g，购于上海展云化工有限公司，临用前用蒸馏气营血理论为基础，从营卫失调导致肝纤维化的角水配制成悬浊液。度人手并运用调治营卫的方剂来观察养营活血汤1．3实验主要试剂和设备对肝纤维化大鼠TNF—Ot

6、和IFN—的影响，并且1．3．1试剂四氯化碳，分析纯，购于北京博大化学试剂有限公司；液体石蜡，购于无锡市展望化收稿日期：2013—12—23工有限公司；猪血清，购于上海恒远生物科技有限基金项目：2010年宁夏医科大学特殊人才启动项目(XT201004)公司；大鼠TNF—Ot和大鼠IFN一ELISA检测试作者简介：范庆寅，男，在读硕士研究生。E—mail：358117743@qq．corn剂盒购于欣博盛生物科技有限公司；HE染色试通信作者：周波，男，副教授。E—mail：zhoubo790325@qq．corn剂盒购于北京华越洋生物科技有限公司。6期范庆寅，等．养营活血汤对肝纤维化大鼠血清

7、TNF一和IFN一^y的影响·629·1．3．2设备DNM一9602A酶标分析仪产自北2结果京普朗新技术有限公司；HH一1900B石蜡切片2．1大鼠肝组织形态学变化及分级根据病毒机产自杭州艾普仪器设备有限公司。性肝炎防治方案J，将肝纤维化按照S1、S2、S31．4实验方法和S4的级别划分。1．4．1肝纤维化大鼠模型制备正常对照组不正常组大鼠肝脏细胞核大，细胞核呈圆形，位做任何处理，其他实验大鼠均皮下注射40％CCL于细胞中央，排列规