低磷胁迫下杉木针叶蛋白的提取与表达差异分析-论文.pdf

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1、福建林学院学报2014，34(3)：203—207第34卷第3期JournalofFujianCollegeofForestry2014年7月低磷胁迫下杉木针叶蛋白的提取与表达差异分析赵中华，刘爱琴，吴鹏飞，刘鑫鼎，何琳琳(福建农林大学林学院，福建福州1350002)摘要：采用TCA一丙酮沉淀高速离心法，对杉木针叶蛋白质组双向电泳技术中全细胞蛋白的提取、蛋白的裂解、电泳条件等环节进行了优化改良，获得了高重复性、高清晰度的杉木针叶响应低磷胁迫的差异蛋白图谱。在此基础上对低磷处理5d的杉木进行针叶蛋白提取，并使用ImageMaster2D

2、Platinum7．0软件分析比较杉木针叶在对照与低磷处理下的蛋白表达谱。研究表明，图谱中有59个蛋白点存在显著差异，可能与低磷胁迫有关，其中，上调表达点52个，下调表达点7个。关键词：杉木；针叶；蛋白；低磷胁迫；双向电泳中图分类号：Q945．78文献标识码：A文章编号：1001—389X(2014)03—0203—05VarianceanalysisofproteinextractionandexpressionforChinesefirneedlesunderlowphosphorusstressZHAOZhong—hua，LIU

3、Ai—qin，WUPeng—fei，LIUXin—ding，HELin—lin(CollegeofForestry，FujianAgricultureandForestryUniversity，Fuzhou，Fujian350002，China)Abstract：InordertoobtaintheproteinprofilewithhJighrepeatabilityandresolutionundertheconditionofphosphorusdeficiency，thehigh—speedcentrifugationofTC

4、A—acetoneprecipitationandtheoptimizedelectrophoresisincludingtheextractionofwhole—cellproteininChinesefirneedles，theproteincleavageandtheconditionofelectrophoresiswereusedinthisstudy．Theproteinextractionoffirneedlesunder5dayslow—phosphorustreatmentwasconducted，andthecom

5、parisonofproteinprofilebetweencontrolandthetreatmentsamplesweremadebyusingImageMaster2DPlatinum7software．Theresultsshowedthattherewere59proteinpointsoflowphosphorustreatmentsignificantlydifferentfromthecontrolsample，whichincluded52upregulatedand7downregulatedpoints．Keyw

6、ords：Chinesefir；needles；protein；low—phosphorusstress；two—dimensionalelectrophoresis近年来分子生物学的迅速发展，显示出传统的生理、生态方法揭示杉木的抗逆性等信息非常有限，且易受其它因素影响，很难满足现代杉木研究的需要，因此蛋白质双向电泳技术应运而生⋯。它不但能揭示蛋白质方面的差异而排除环境差异所造成的表型变异，还能拓宽研究材料的选择，虽然所需经费较多，但是该方法快速可靠。因此，人们越来越关注蛋白质组学在生命科学研究的重要性。双向电泳技术作为蛋白质组学研究

7、平台之一_2J，因其快速高效、简单易上手的特点，在相关研究中得到了广泛应用j，尤其在禾本植物方面的研究日益增多。但是，有关杉木蛋白质组学的研究相对较少，这与针叶树种的研究起步较晚有关。杉木(Cunninghamialanceolata)是中国特有的树种，也是中国南方主要的造林树种之一，它在中国森林资源总量中占有极为重要的地位j。长期以来，杉木多代连栽导致人工林产量下降日趋明显，林地养分亏缺一直是限制杉木人工林产量的重要因素。大量研究表明，磷素匮乏是植物生长主要制约因子之⋯一。耐低磷性是广泛存在于自然界中的一种植物的性质，关于植物的耐低

8、磷性以及它在生态系统中可以提高植物的抗性，提高植物对营养物质的吸收等作用已经得到普遍认同¨。研究表明，磷胁迫会导致植物干物质累积量下降和植物根系参数减小，根系特异分泌物种类及数量发生变化，营养物质在根部积累增多¨。但目前