低温胁迫下桂蕉6号幼苗叶片差异蛋白表达研究.pdf

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1、安徽农业科学,JournalofAnhuiA.Sci.2015,43(20):32—34责任编辑李占东责任校对李岩低温胁迫下桂蕉6号幼苗叶片差异蛋白表达研究庞异泽,孙洁,榻维言,冯斗(广西大学农学院,广西南宁530005)摘要[目的]研究低温胁迫下桂蕉6号幼苗叶片差异蛋白的表达。[方法]分别用TCA/丙酮法和酚抽提法提取桂蕉6号幼苗叶片总蛋白:用2.DE电泳分析低温胁迫处理和常温下桂蕉6号叶片差异蛋白的表达。[结果]酚抽提法提取的总蛋白垂直电泳效果更好;从2一DE图谱中获得了一些具明显差异表达的蛋白点I6个,其中表达上调的8个,表达下调的7个,低温处理幼苗叶片

2、特有蛋白1个;成功鉴定9个。[结论]酚抽提法更适合提取香蕉叶片总蛋白。关键词桂蕉6号;低温胁迫;双向电泳;差异蛋白中图分类号S188文献标识码A文章编号o517—6611(2015)20—032—03PreliminaryResearchonDifferencesinProteinExpressionofGuijiaoNo.6SeedlingLeavesunderLowTemperatureStresPANGSheng-ze,suNJie,xuANWei-yan,FENGDou(CoUegeofAgi4cuhure,GuangxiUniversity,Nann

3、ing,Guangxi530005)Abstractf0biective]T0researchdiferencesinproteinexpressionofGuijiaoNo.6seedlingleaves.fMethod1TCA/acetonemethodandphenolextractionmethodwerebothusedtoextractthetotalproteinofGuiji袖No.6seedlingleaves.2一DEelectrophoresiswasusedtoanalyzedifferencesinproteinexpressiono

4、fGuijiaoNo.6seedlingleavesunderlOWtemperaturestress.1Result]eefectofverticalelectrophoresisofproteinextractedbyphenolextractionmethodwasthebetterone.Somesignificantlydiferentiallyexpressedproteinspotswerediscoveredon2一DEmaps.16obviouslydifferentialexpressedproteinspotswerediscovered

5、,including8spotsup,7spotsdownand1uniquespotfortheseedlingleavesunderlowtemperaturestressindiferentialproteinelectmphoresisof2一DE.9spotsweresuccessfullyidentified.IConclusionlPhenolextractionmethodWasmoresuitabletoextractthetotalproteinofbananaleaves.。KeywordsGuijiaoNo.6;Lowtemperatu

6、restress;Two—dimensionalelectrophoresis;Diferencesinprotein香蕉是芭蕉科(Musaceae)芭蕉属(Musa)植物,原产于1.2材料处理将选取的香蕉幼苗置于温室培养15d后,亚洲东南部,包括中国东南地区、马来西亚、新几内亚和菲律移16盆到光照培养箱(白天光照强度为7500lx,晚上为0宾。香蕉是世界上产量最大的三大水果之一,也是许多发展lx,光照时间12h/d)中,将温度控制在7℃,其他培养条件不中国家除水稻、小麦、玉米之外的重要粮食作物。香蕉是变。于12、24、48、96h后分别取样,取样时剪取倒三叶

7、迅速热带水果,对温度条件的要求较高,喜高温多湿,怕低温,忌与液氮保存,取样完毕后放人一80℃保存备用。其中,0h作霜寒,最适宜温度为24~32℃,15℃以下就会发生低温冷为对照。害。低温会抑制香蕉发育,降低其生长速率,更为严重的1.3香蕉叶片总蛋白质的提取低温会使香蕉遭受不可逆的危害,从而极大地影响香蕉生1.3.1TCA/丙酮法。采用改良的TCA/丙酮法。产,导致减产低产。2008年1月中旬至2月中旬,广西受到1.3.2酚抽提法。参照Carpentier等的方法。建国以来最强的一次平流型低温阴雨灾害天气影响,给香蕉1.4蛋白质的裂解与定量裂解液成分为7mol/

8、L尿素,2等热带水果造成严重寒害。mo

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