光合细菌的分离鉴定及其对废水净化效果研究-论文.pdf

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1、Vlo1．33No．2第203l3耄第成都大学学报(自然科学版)4年6月JournalofChengduUniveFsity(NaturalScienceEdition)Jun．20l4文章编号：1004—5422(2014)02—0121—04光合细菌的分离鉴定及其对废水净化效果研究朱文优，周守叙，郭春晓，王新惠(1．宜宾学院生物工程研究所发酵资源与应用四川高校重点实验室，四川宜宾644000；2．宜宾职业技术学院，四川宜宾644003；3．曲阜师范大学生命科学学院，山东曲阜273165；4．成都大学生物产业学院，四川成都61010

2、6)摘要：为筛选能够高效净化当地废水的光合细菌，采用双层平板法，从宜宾当地废水中分离得到1株光合细菌，将其命名为YBX一1，并对该茵株进行形态学和生理生化实验，鉴定为红色假单胞菌．该菌株的最适生长条件为：45w的白炽灯为光源，pH值为6．0～6．5，接种量为15％一20％．该茵株对宜宾本地3种废水的净化能力与外购对照茵株相当，最高CODc去除率可以达到63．2％，具有潜在的应用价值．关键词：光合细菌；分离鉴定；废水处理；CODcr中图分类号：Q93．331文献标志码：A1．1．2培养基．0引言1)液体培养基J：乙酸钠3．0g、丙酸钠0

3、．3g、光合细菌(photosyntheticbacteria，PSB)是地球上氯化钠1．0硫酸铵0．3硫酸镁O．5g、磷酸氢二出现最早且普遍存在的，能在厌氧光照或好氧黑暗钾0．7g、氯化钙0．05g、硫酸锰O．0025g、硫酸铁条件下利用有机物作供氧体兼碳源，进行不放氧光0．005g、酵母膏0．1谷氨酸1．0g，蒸馏水定容至合作用的原核微生物uJ．利用PSB进行废水处理，1L，调pH值至7．4，121℃灭菌20min．因其可同时实现污染物的去除和有用生物量的积2)分离培养基：乙酸钠3．0g、酵母膏3．0g、氯化累，而越来越受到人们的

4、重视．研究发现，PSB能有钙O．3g、硫酸镁0．5g、琼月旨20g，调节pH值至7．4．效去除废水中的有机物、氮、磷和硫化物，适合处理1．1．3实验仪器．各类工农业废水，如豆制品废水和啤酒废水-4J，同实验所用的仪器包括：超净工作台(苏净集团安时，PSB菌体含有多种营养物质，可用作饲料和肥料泰公司制造)，LDZX一40B1型高压蒸汽灭菌锅(上海等进行综合利用l5]．本研究拟从宜宾当地水体中申安医疗器厂)，JH一752型分光光度计等．分离出可处理本地污水且性能优良的PSB，为污水1．2方法处理用PSB的筛选以及污水处理系统强化菌株的1．

5、2．1PSB的富集培养．选用，提供基础数据．将采集的污水水样先用滤网除杂，然后将5OmL除杂污水转人装有300mL液体培养的三角瓶1材料与方法(5oomL)中，混合均匀，在液面上加一层无菌液体石1．1材料蜡(高约3cm)，最后置于光照培养箱中，于28～1．1．1实验材料．30qC下培养2周．按上述方法，重复3次富集培养，1)菌株分离水样．水样分别取自宜宾学院莲花选择呈血红色的富集液为作PSB分离的材料．池、本地酒厂排污河沟和纸厂排污河沟，装于无菌玻1．2．2PSB的分离纯化．璃瓶中．用1mL移液管取不同稀释度的样品富集液2)对照菌株．

6、沼泽红假单胞菌，自命名为DZJ，(10～、10～、10～、10crv／mL)3n到灭菌的试管中，购于广州绿辉生物科技有限公司．后加入15mL灭菌的45℃光合细菌分离培养基，混收稿日期：2014—03—25．作者简介：朱文优(1980一一)，男，博士研究生，讲师，从事食品生物技术研究·l22·成都大学学报(自然科学版)第33卷合均匀后，倒人平皿；待培养基冷凝后，上层加5mL的OD值，以此来判断菌种的生长状况．分离培养基，冷却后置30℃培养箱中，3Ow的日光2)COD测定．采用重铬酸钾法测定污水的COD灯照射下培养24h，如果菌落不明显，

7、则继续培养值E．24h；挑取红色不同形态菌落，采用双层平板法，用2结果与分析纯化培养基反复划线纯化2～3次，待菌落形态一致后进行菌种保藏备用．2．1PSB的分离结果1．2．3PSB种子的制备．按“1．2．1”和“1．2．2”项下方法进行实验，从本挑取3环PSB纯培养物，接人装有300mL液体地酒厂排污河沟和纸厂排污河沟中的污水中只分离培养的三角瓶(5o0mL)中，混合均匀，在液面上加一到绿色菌落，而从宜宾学院莲花池水体中分离到红层无菌液体石蜡(高约3cm)，在30w的日光灯照色菌落，这些菌落的形态完全相同，本研究将其编号射下，于28～

8、30℃培养7d．为YBX一1．根据相关文献报道，PSB中的红螺菌的1．2．4PSB的初步鉴定．光能异养特性具有忍受和分解高浓度有机物的能在纯化培养基上，对已纯化的菌株进行菌落形力，而绿色菌落基本可基本判定为绿硫菌类光合菌