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《高效液相色谱法测定牛奶中黄曲霉毒素M1的含量-论文.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、2014年8月食品研究与并发第35卷第15期FoodResearchAndDevelopment检测分析DOI:10.3969~.issn.1005-6521.2014.15.027高效液相色谱法测定牛奶中黄曲霉毒素M1的含量周贻兵,林野,李磊,王娅芳,刘利亚(贵州省疾病预防控制中心,贵州贵阳550004)摘要:采用高效液相色谱荧光法测定牛奶中的黄曲霉毒素M。。牛奶中的黄曲霉毒素M用乙腈超声提取,离心,上清液浓缩后用50mLPBS缓冲液稀释,过免疫亲和层析柱净化,10%甲醇水溶液10mL淋洗柱,2mL甲醇洗脱,洗脱液氮吹干后,用1O%乙腈水溶液1mL
2、蜗旋溶解残渣,过O.22m滤膜,上机测定。对加入乙腈比例、淋洗液及洗脱液进行了优化,结果表明:m}*:V。=1:2有效的沉淀蛋白避免了过柱堵塞问题,提高了过柱效率。用1O%甲醇水溶液淋洗免疫亲和柱,能有效的去除掉杂质,避免了洗脱液成浑浊现象。该方法的线性范围宽,回收率为89.1%93.5%,相对标准偏差在6.5%一9.7%之间,检出限为O.01I~g/kg,低于1/lO现行食品安全国家标准对食品中黄曲霉毒素M.的限量标准,符合检测要求,适用于对牛奶中黄曲霉素素M.的检测。关键词:黄曲霉毒素M;牛奶;免疫亲和层析柱;高效液相色谱法Determinati
3、onofAflatoxinM1ContentinMilkbyHigh-performanceLiquidChromatographyZHOUYi-bing,LINYe,LILei,WANGYa—fang,LIULi—va(GuizhouCenterforDiseasesControlandPrevention,Guiyang550004,Guizhou,China)Abstract:AnatoxinMlinmilkweredeterminatedusinghigh-performanceliquidchromatographywithfluores-
4、eencedetection.AflatoxinMlinmilkwerefirstlyultrasonicextracted,centrifuged,concentratedandthenpurifiedthroughimmunoafinitycolumn,using10%methanolaqueoussolutionleachingcolumn,driedinnitrogen,vol-umedby10%acetonitrileaqueous.Fheratioofadditionacetonitrile.1eachingsolutionandelue
5、ntwereoptimized.Theresultsshowedthattheratioofthemilksampletoacetonitrilewas1to2inmasstovolumecouldeffectivelypre—cipitateproteinandavoidthecolumnplug.Washingimmunoaffinitycolumnwith10%methanolaqueouscanef-fectivelyremoveimpuritiesandavoidtheturbidphenomenonofeluent.Therecovery
6、ofmethodwithwidelylinearrangewasbetween89.1%to93.5%.relativestandarddeviationbetween6.5%to9.7%andthedetectionlimitis0.01Ixg/kgwhichwaslessthan1/10ofcurrentnationalfoodsafetystandardswithlimitthequantityofaflatoxinMIIThemethodcanbeappliedtothedeterminationthecontentofaflatoxinMl
7、inmilksample.Keywords:aflatoxinMl;milk;immunoaffinitycolumn;high-performanceliquidchromatography黄曲霉毒素M于1993年被世界卫生组织癌症产生尿液中。牛乳及其制品是易受黄曲霉毒素M污研究机构划定为I类致癌物,是一种毒性极强的剧毒染的食品之一,对牛奶中黄曲霉毒素M。准确定量,了物质,主要表现在致癌、致畸、致突变。黄曲霉毒素M.解真实污染水平,对维护人群健康具有重要意义。测是哺乳动物摄入被黄曲霉毒素B.污染的饲料或食品定黄曲霉毒素M.的方法主要有高效液相色谱一
8、串联后,在体内的肝微粒体单氧化酶系催化下,被羟基化质谱法、高效液相色谱法、荧光光度法、酶联免疫法和生成的二次
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