正交试验优选减味寿胎丸总黄酮提取工艺.pdf

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1、JIANGXIJOURNALOFTRADITIONALCHINESEMEDICINE正交试验优选减味寿胎丸总黄酮提取工艺★刘秀明罗颂平冯婷方家陈静静(广州中医药大学广东广州510405)摘要：目的：确定减味寿胎丸总黄酮的最佳提取工艺。方法：以芦丁为对照品，利用比色法测定寿胎丸提取液中的总黄酮含量，采用单因素考察及正交试验设计法优选减味寿胎丸中总黄酮的回流提取工艺参数。结果：芦丁对照品在0．112～0．56mg／mL内线性良好(r=0．9998)，回流提取减味寿胎丸总黄酮的最佳条件：乙醇浓度为60％，料液比为1：10，回流提取2次。每次提取时间为0．5h。结论：本提取工艺简单、合理、稳定，重

2、复性好，可为减味寿胎丸总黄酮提取工艺的确定提供参考依据。关键词：寿胎丸；总黄酮；提取工艺；正交试验中图分类号：11284．1文献标识码：A寿胎丸源自清代名医张锡纯的《医学衷中参西究员鉴定。录》，由菟丝子、桑寄生、川续断和阿胶4味中药组2方法与结果成，为妇科安胎常用名方，临床上具有补脾益肾，养2．1总黄酮的测定血固摄，安胎之功，能有效防治先兆流产。在临床2．1．1对照品溶液的制备精密称取在120℃减上，较多学者选用寿胎丸加减或寿胎丸联合西药治压干燥至恒重的芦丁对照品约10mg，精密称定至疗胎漏、胎动不安及滑胎，从目前的报道来看，有效10mL容量瓶，用60％乙醇超声溶解，放冷定容，得率均在90

3、％左右，疗效确切¨J。课题组前期证实芦丁对照品溶液浓度为0．112mg／mL。去阿胶的减味寿胎丸具有与寿胎丸基本相同的安胎2．1．2标准曲线的制备精密吸取0，1．0，2．0，效果，明确了该方最佳药效组合及配伍剂量，亦对减3．0，4．0，5．0mL芦丁标准溶液，放人1O毫升容量瓶味寿胎丸进行了拆方研究，初步确定减味寿胎丸的内，分别加入5．0，4．0，3．0，2．0，1．0，0mL的60％乙黄酮类物质药效较为显著。。。为了使减味寿胎醇溶液；加入5％亚硝酸钠溶液0．3mL摇匀，放置丸的黄酮进一步合理开发和利用，本研究采用单因6rain；加入10％硝酸铝溶液0．3mL，放置6rain后；素结合正交

4、试验设计法优选出减味寿胎丸中总黄酮加入4％氢氧化钠溶液4．0mL，加60％乙醇定容，摇的最佳提取工艺，为减味寿胎丸药效物质的提取提匀后，放置15rain；在510nm处测定吸光度。用0mL供参考。作为空白，用浓度()作为横坐标，以吸光度(Y)为1仪器与试药纵坐标作标准曲线。得到回归方程为：Y=1．205X，r1．1仪器旋转蒸发仪系统(BUCHI)；实验室专=0．9998，线性范围为0．112～0．56rag／mE。用超纯水机(德国sartorius公司)；恒温水浴锅(上2．2单因素考察海一恒)；万分之一电子天平(德国sartorius公司)；2．2．1乙醇浓度的考察准确称取菟丝子4g，桑十

5、分之一电子天平(双杰牌)；紫外分光光度计(尤寄生3g，续断3g，粉碎过2号筛，分别加入10倍量尼科(上海)仪器有限公司)。的30％，50％，60％，70％，80％，95％乙醇，回流提1．2试药芦丁对照品(中国药品生物制品检定取1次，提取时间1．0h，滤过，用少量相应溶剂洗涤研究院，批号：10080—200707)；乙醇、亚硝酸钠、硝药渣和容器，滤液与洗涤液定容至250mL容量瓶酸铝、氢氧化钠为分析纯试剂(天津大茂化学厂有中，精密移取lmL至10mL的容量瓶中，用相应的溶限公司)；水为纯水；菟丝子(批号：121002111，产剂稀释至刻度，精密移取lmL样品稀释液，按标准地：山东)和续断(批

6、号：110108341，产地：山东)均曲线制作项下“加入5％亚硝酸钠溶液0．3mL摇购自康美公司，由广州中医药大学黄海波教授鉴定。匀”起，同法操作，显色后于510nm波长处测定吸光桑寄生采摘自华南植物园，由华南植物园叶华古研度，计算总黄酮浸出量。结果显示，乙醇浓度在·72·江西中医药2014年7月第7期总45卷第379期30％一60％内，随着醇浓度升高，总黄酮浸出量逐渐素，分别设定3个水平，根据因素水平表(见表4)，增加，当乙醇浓度超过60％后，随浓度增加而递减。选择正交表(见表5)进行试验，以减味寿胎丸总黄可见，当乙醇浓度达到60％时，总黄酮浸出量达到酮浸出量为指标，可见分光光度法测定含

7、量，利用最大值。minitab软件对正交试验的结果进行分析，结果见图表1乙醇浓度考察1、表7。乙醇浓度／％总黄酮浸出量／mg根据图1主效应图和表6minitab统计结果显3O537．34示乙醇浓度及料液比对产出的影响先是正效应，后5O647．3O是负效应，当乙醇浓度在50％一60％间，随乙醇浓60717．8470676．35度增加而总黄酮浸出量增加，同理料液比亦然，系数8O568．47列中绝对值：47．78>39．17>