双酶法酶解制备怀山药多肽的研究.pdf

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1、品工素●工艺技术双酶法酶解制备怀山药多肽的研究朱玉端’，李小强，董怀灿’，李敏’，陈茂彬1．焦作市易生元酒业股份有限公司(焦作454000)：2湖北工业大学生物工程学院，发酵工程教育部重点实验室(武汉430068)摘要以怀山药为原料，选用中性蛋白酶和加链霉蛋白酶，研究了双酶分步酶解和双酶混合同步酶解制备山药多肽的效果，对双酶分步酶解的加酶顺序，加酶比例以及在加第二种酶之前是否需要使第一种酶失活进行了讨论。关键词怀山药多肽；双酶复合酶解StudyOnPreparationofHuaiChineseYamPeptidesbVCompositeProt

2、easesZhuYu-duan。，LiXiao—Qiang，DongHuai—can‘，LiMin11ChenMao—bin1．JiaoZuoShiYiShengYuanLiquorIndustry．．CoLtd(Jiaozuo454000)；2．KeyLaboratoryofFermentationEngineering(MinistryofEducation)，CollegeofBioengineering，HubeiUniversityofTechnology(Wuhan430068)AbstractTakingHuaiChineseyam

3、，neutralproteaseandpronaseasrawmaterial，thedouble-enzymehydrolyzedinstepsandmixeddouble—enzymehydrolyzedsimultaneouslywerebothstudied．Thesequenceofaddingenzymeintheformer,proportionofenzymesandwhethertodenaturethefirstenzymebeforeaddingthesecondonewerealsodiscussed．KeywordsHH

4、aiChineseyampeptides；double—enzymecompositehydrolysis近年来，多肽在生物体内的生理功能受到越来越怀山药：河南焦作铁棍山药；多的重视。大量研究结果表明，蛋白质由于其分子量蛋白酶：加链霉蛋白酶40X10U／g、中性蛋白酶大，结构复杂，摄入人体后不易被消化吸收，从而影120×10U／g，郑州聚亿鑫化工原料有限公司。响了其生理功能和营养价值的有效发挥⋯。山药多肽1．2试剂与仪器是一种新型的比较理想的山药深加工产品，它是以新1．2．1主要试剂鲜山药为原料经蛋白酶水解而成的蛋白质水解产物，l％酚酞指示剂，l

5、mol／LNaOH标准溶液，甲醛，主要南多种小分子肽组成，另外还含有少量游离氨基中性甲醛，邻苯二甲酸氢钾，三氯乙酸。各试剂均为酸成分。山药多肽的氨基酸组成与山药蛋白的完全一分析纯。样，并且与山药蛋白相比它具有更丰富的加工特性、1．2．2主要仪器设备营养特性和生理活性功能。数显恒温水浴锅：江苏省金坛市荣华仪器制造有水解蛋白质制备多肽的方法主要包括酸法水解、限公司；磁力加热搅拌器：江苏省金坛市荣华仪器制碱法水解和酶法水解，目前酶法生产蛋白多肽的应用造有限公司；pH计：Metter—ToledoGroup；高速离心较为普遍，其生产的多肽具有很多优点僻]

6、。蛋白酶在机：长沙平凡仪器有限公司；KDN一04型蛋白质检测水解时具有很强的特异性和位点专一性p】，当位点全仪：上海纤检仪器有限公司；搅拌机：BM253C：广部断裂以后，即使蛋白酶没有完全失活，酶解反应也东美的精品电器制造有限公司。不会进行下去，山药多肽的得率也难以提高。如果利1_3试验方法用不同酶的位点专一性，而将两种或几种酶结合起来1．3．1山药多肽双酶法水解方案使用，就可以扩大它们的作用范围，提高酶解效率，通过单酶水解解试验，筛选出中性蛋白酶、加链进而提高山药多肽的得率。霉蛋白酶，作为本试验用酶。在单酶试验基础上，采试验通过双酶法对山药蛋白

7、进行酶解，在单酶水用双酶同步或分步酶解的方法来研究其对山药多肽解的基础上，来进行双酶法制备山药多肽的研究，并得率的影响。根据单酶试验条件，确定蛋白酶的最详细的分析了双酶法酶解过程的具体工艺。适酶解条件：加链霉蛋白酶酶解温度40oC，pH5、酶解时问3h、加酶量6％；中性蛋白酶酶解温度45cC，1材料与方法pH6、酶解时间3h、加酶量3％。1．1材料将新鲜山药与去离子水以1：5的料液比混合打《食品工业)2012年第33卷第9期+通讯作者。，、●工艺技术品工素浆，90qC下加热预处理20rain，分别同步和分步加人1·4，中性蛋白酶和加链霉蛋白酶进行

8、酶解，酶解过程中不÷1·21断用0．1mol／LNaOH调节酶解pH不变；反应结束后，o-s置于沸水中灭酶10rain，冷却，四层纱布过