真菌的形态观察与革兰氏旧真菌的形态观察与革兰氏染色aspan class=.doc

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1、实验、真菌的形态观察与革兰氏染色%1.目的1、学习并掌握酵母菌和霉菌形态结构的观察方法；2、加深理解酵母菌和霉的形态特征。3、巩固显微镜(油镜)的使用方法。%1.试剂与器材1•材料菌种：啤酒酵母、霉菌装片2、仪器及相关用品：显微镜，香柏油，二甲苯(或1：1的乙瞇酒精溶液)，擦■镜纸、吕氏碱性美蓝染液(或草酸鞍结晶紫染液)、齐氏石炭酸复红染液。3、G•和G菌种%1.内容1、酵母菌形态和无性胞子的观察2、霉菌形态和无性孑包子的观察，由菌丝(hypha)和彳包子(spore)组成，菌丝与孑包子交织在一起

2、。各种霉菌的菌丝和孑包子形态不同，是鉴别真菌的重要标志。3、革兰氏染色简单染色法：涂片干燥一固定T染色水洗-*干燥f镜检步骤(1)涂片：取一洁净载玻片，滴一小滴生理盐水于玻片中央，按无菌操作要求，先用接种环，挑取少量某菌培养物于玻片中央水滴中，涂布均匀。要求涂片薄而均匀。使其自然干燥。(2)干燥、固定：涂片干燥后，快速通过火焰2-3次，进行固定。固定时不可过热。以载玻片不烫手为宜。(3)染色：a)初染：滴加结晶紫染色液覆盖玻片涂布区，染色1分钟，用水冲洗。b)媒染：滴加革兰氏碘液冲去残水，并覆盖1

3、分钟，水洗。c)脱色：甩净载玻片上水分，倾斜玻片，并衬以白纸，用95%乙醇滴洗至无紫色褪下时为止，时间20-30So立即用水缓缓冲洗，注意脱色时间不可过长，以免呈现假阴性。d)复染：滴加番红染色液，染色3-5分钟，水洗。(4)镜检：待其自然干燥，镜检。%1.关键及注意事项1、使用油镜后要用二甲苯清洗高倍镜头；2、涂片时，生理盐水及取菌不宜过多，涂片应尽可能均匀；3、水洗步骤水流不宜过大，过急，以免涂片薄膜脱落；4、革兰氏染色各步骤的时间控制；特别是脱色时间的控制。%1.作业简述染色结果，并指出革兰

4、氏染色的关键步骤，为什么要进行复染？