资源描述：
《氢化可的松对体外培养的皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、氢化可的松对体外培养的皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响作者：卫俊霞，冯光珍，孙红,于大山，汪培铭，李冬梅【关键词】细胞增殖[Abstract】ATM:Tostudytheeffectsofhydrocortisoneontheproliferationandcollagensynthesisofskinfibroblastsinvitroandtoexplorethemechanismofsteroidinthetreatmentofabnormalscars.METHODS:Humanscarfibroblas
2、tswereisolatedandculturedfromhumanskinbymechanicalseparationmethods.Afterbeingstimulatedbyhydrocortisonewithdifferentconcentration,theproliferationandcollagensynthesisofhumanskinfibroblastsweredeterminedbyMTTmethodsand3IIProlineincorporationrespectively.RESULT
3、S:Hydrocortisone(0.1g/L)inhibitedtheproliferation(MTT0.523±0.051vs0.347±0.036,P<0.05)andcollagensynthesis[3HProline(248±6)Bqvs(181+6)Bq,P&It;0.05]ofhumanskinfibroblastsinvitroinaconcentrationdependencemanner(r=-0.8208).CONCLUSION:Ilydrocortisonemaytreatabno
4、rmalscarsbyinhibitingtheproliferationandcollagensynthesisofhumanskinfibroblasts.【Keywords]hydrocortisone;skinfibroblasts;proliferation;collagen;scars【摘耍】目的：研究激素对体外培养的成纤维细胞增殖及分泌功能的影响，初步探讨其治疗瘢痕的作用机制.方法：采用MTT比色法和3H脯氨酸掺入法，观察氢化可的松对体外培养的皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响.结果：氢化可的松(0.
5、1g/L)能够抑制体外培养成纤维细胞增殖(MTT值0・523±0.051vs0.347±0.036,P<0.05)及分泌胶原的功能[3H脯氨酸掺入量(248±6)Bqvs(181±6)Bq,P<0.05],并呈剂量依赖性(r=-0.8208).结论：氢化可的松可通过抑制瘢痕成纤维细胞增殖及胶原的合成，从而达到治疗瘢痕的作用.【关键词】氢化可的松；皮肤成纤维细胞；细胞增殖；胶原；瘢痕0引言激素在增生性瘢痕的治疗中已广泛应用，并取得了较好的治疗效果，但其作用机制尚未完全阐明[1].我们通过人皮肤成纤维细胞的
6、体外培养，观察氢化可的松对细胞增殖及其胶原合成的影响，进一步探讨激索在增生性瘢痕治》了中的作用机制.1材料和方法1.1材料DMEM高糖培养基及小牛血清(HyClone),胰蛋白酶(Gibco),四甲基偶氮哇盐(MTT)及离解蛋白DispaseII(Sigma),氢化可的松(华美公司),二甲基亚飒(DMSO,TBD公司)，3H脯氨酸(北京原子能研究所).皮肤组织取自手术患者所取的全厚或中厚瘢痕皮肽，刮除皮下脂肪组织，尽快放入盛有DMEM培养液中备用.1・2方法将取下的标本切取5IninX5mm人小的小块置于含青霉素和
7、链霉素各100ku/L的DMEM溶液中，2h后将组织标本浸于2.5g/Ldispase中，37°C条件下2~4h后，表皮被完整的撕下，余下的真皮组织用PBS反复冲洗后，剪成「2cm的小块，加入30~50倍体积的1g/LI型胶原酶,37°C条件下继续消化3〜5h.当成纤维细胞大部分从胶原纤维屮分离出来时，用100目滤网过滤，以去除大的组织残渣.滤液离心去上清液，细胞记数后接种于75cm2培养瓶中，置37°C含50mL/LC02孵箱中培养，每3~4d换液1次，待细胞融合后，进行细胞传代培养.取第二代人皮肤成纤维细胞，以
8、1XI04/孔接种于96孔板，无血清培养孵育24^48h,使细胞同步于休止期.弃上清液，加入培养基和氢化可的松，分别进行成纤维细胞形态、数量及生物合成的检测.氢化可的松浓度分别为0.05,0.1,0.2,0.3和0.5g/L,设空白对照组.倒置显微镜观察各组成纤维细胞形态与数量变化，同时，细胞用20g/L戊二醛固定后进行扫描电镜观察・MTT比色法测定成纤维细
