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1、食用菌学报@2014.21(2):19~21文章编号:1005—9873(2014)02—0019—03金针菇不同生长时期培养基质中菌丝相对生物量的确定余昌霞,陈建华。,曹晖,陈明杰,汪虹,王言。(上海市农业科学院食用菌研究所,农业部南方食用菌资源利用重点实验室,国家食用菌工程技术研究中心,国家食用菌加工技术研发分中心,上海市农业遗传育种重点开放实验室,上海201403;上海雪榕生物科技股份有限公司,上海200333;。上海海洋大学食品学院,上海201306)摘要:在考察了金针菇(Flammulinavelutipes)培养料中
2、DNA含量、基质对菌丝DNA提取影响的基础上,以工厂化瓶栽金针菇培养物为材料,以菌丝DNA含量为指标,检测了菌丝长满基质、幼菇约3cm、8cm和子实体采收时(约16cm)4个生长阶段培养瓶中不同部位基质的菌丝相对生物量。结果表明:不同位置培养基质菌丝相对生物量有明显差异;在子实体生长过程中,菌丝体生物量消耗速度与基质和子实体间的距离成反比。关键词:金针菇;培养基质;生物量随着食用菌栽培技术的深入研究,仅仅定性料及不同生长阶段的FV培养瓶(D1:菌丝发满观察基质长满菌丝、菌丝洁白粗壮,依靠经验判时;D2:金针菇幼菇约3cm高时;D
3、3:子实体约断菌丝生长、成熟状况,确定从养菌到出菇管理8cm高时;D4:子实体16cm高待采收时),由上模式的切换越来越不能满足现有的工厂化、大规海雪榕生物科技股份有限公司提供。模生产管理的精细要求,建立定量指标以衡量菌1.2方法丝生长发育阶段、揭示生长现象与其生理代谢的1.2.1构建金针菇FV标准曲线关系引起越来越多的重视[1]。笔者在之前的工按文献ElO.11]构建FV标准曲线。作中探讨了用菌丝DNA含量衡量菌丝在培养基1.2.2培养料DNA含量及其对测定菌丝DNA质中相对生物量的方法,并在对香菇135培养基提取的影响质中菌
4、丝生物量的研究中发现,香菇菌丝在长满将未接种的培养料置于低温冰箱中冻结、转培养料后一段时间内菌丝生物量保持着一定速入冷冻干燥机中充分干燥保存。取适量培养料度的上升,到达一定水平如果不能转入出菇环研钵中充分研磨后,精确称取10、20mg,CTAB节,则生物量会保持一定水平不再变化;对生产法提取其DNA,确定单位质量培养料的DNA含中不同产量的菌棒分析结果表明,其中剩余菌丝量,每处理5个重复。量与子实体的产量呈反比关系[8_9]。在此基础将冷冻干燥的金针菇培养料与标准培养菌上,本实验检测了不同生长阶段工厂化栽培的金丝按四种不同比例混
5、合,充分研磨后,精确称取针菇培养基质中不同位置的菌丝生物量变化,希10mg混合物,CTAB法提取DNA,除去基质本望对肉眼不可见的基质内菌丝生物量积累、子实底DNA含量后与标准曲线比对,确定培养料对体生长过程中菌体营养变化进行分析判断。金针菇FV菌丝DNA提取的影响率,每处理5个重复。1材料与方法基质对DNA提取的影响率[IRs](%)=(混1.1供试材料入菌丝生物量一实测菌丝生物量)/混入菌丝生供试金针菇菌种FV、灭菌后未接种的培养物量X100%收稿日期:2013—10—08原稿;2014—03—10修改稿基金项目:国家食用菌
6、产业技术体系(编号:CARS.24)的部分研究内容作者简介:余昌霞(1985一),女,2011年毕业于上海海洋大学,硕士,研究实习员,主要从事食用菌生理栽培研究。本文通讯作者E-mail:caohuicat@126.com20食用菌学报第21卷1.2.3不同生长时期、不同位置培养物中菌丝相表1基质对金针菇FV培养菌丝DNA含量的影响Table1EffectofF.velutipescultivationsubstrate对生物量onmyceliumDNAextraction从D1,D2,D3和D4不同生长阶段的培养瓶(各三瓶)中
7、分别按图1所示在S、Z、W、a、b、C部分取样,样品分别于低温冰箱中冷冻后转入冷冻干燥机中充分干燥,研钵中充分研磨,准确称取10、20mg冻干物,CTAB法提取DNA,确定不同位置和不同生长阶段培养物中FV菌丝的相对生物量;每个生长阶段在3个培养瓶中独立取样,每个样品设5个测定重复。实验重取不同批次的相同数量样品重复测定一次。2.3金针菇FV培养料中菌丝相对生物量分别检测D1的阶段不同位置的培养物中DNA含量,换算成相对的菌丝生物量结果如图2。一∞口眦)§山l】【q墨一∞uh芸咖划粗培坨¨傩£j0a,b和c为瓶子上中下部位约1.
8、5cm厚的培养料层,z和w为贴近接种孔和贴近瓶壁位置约1.5cm厚2.0cm宽的圆环,s为接种块sabzbwczewSamplesa,bandCwereintheformofaroundflatcakeof取样位置Samplingsiteculturemater
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