热激对高温敏感核不育水稻芽生长及其蛋白质组分的影响.pdf

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1、第13卷第4期常德师范学院学报（自然科学版）VOI.13nO.42001年12月JournalofChangdeTeachersUniversit（yNaturalScienceEdition）Dec.2001"""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""文章编号：1009-381（82001）04-0073-03热激对高温敏感核不育水稻芽生长及其蛋白质组分的影响肖辉海陈良碧1胡一鸿（常德师范学院生物系湖南常德415000）摘要：温敏不育水稻培矮64S芽期经热激（38C）处理后，依据。与其在22C条件下相比较

2、，芽蛋白组分表现出明显差异；在大于97.4KD、小于14.4KD和66.2~42.7KD范围内1材料与方法分别新增2条、1条和3条蛋白质带，另有8条带加强（42.7~1.1栽培与处理14.4KD）和2条带减弱（97.4~42.7KD）。与热激条件下的常将水稻（Oryzasati1e）品种常规稻湘晚籼2号和规稻湘晚籼2号比较，培矮64S经热激（38C）后新增了4条高温敏感不育水稻培矮64S经消毒后分别播在大培蛋白质带，另有2条带加强和1条带减弱。在热激后，温敏养皿中，在恒温箱中进行催芽（25~28C暗培养），每不育水稻培矮64S芽中蛋白质组分的这些变化，必然引起植株体内某些酶系统的改变，以

3、致影响芽的正常生长发育，使份材料各设3个重复，待芽长到约0.5cm长时分两芽的生长受到明显的抑制。组移至人工气候箱中进行处理=一组处理条件为=无关键词：热激；高温敏不育水稻；蛋白质组分；生长；电泳光照，恒温38C，连续3天；另一组处理条件为=无光中图分类号：S330文献标识码：A照，恒温22C，连续3天。然后分取健壮的黄化芽进行蛋白质的电泳分析，另外，在处理完毕后的第10目前由于不育材料的增多，发现在水稻不育基天，分别测定芽长、芽鲜重和芽干重；每个处理取样因表达方面还有许多值得深入研究的问题。如杨振10株测量芽长，10株测量芽鲜、干重，每个处理重复玉等［1］最近的研究认为=籼型与粳型不育

4、系其基因3次，数据进行统计学分析。表达条件存在着很大的差异，籼型受光、温配合作用1.2蛋白质的提取制约，且温度尤为主导因素。孙宗修等［2］对籼型取处理完毕的黄化芽放入预冷的玻璃匀浆器5460S不育系的研究结果认为=该不育系属于温度敏中，按1：5（w/1）加入预冷的提取液（每100mI提取感型雄性不育。据报道=日本从水稻品种黎明辐射液中含0.1MTris-HCIpH7.5，50mmOIEDTAna2的M5代株系选出的材料进行光、温诱导试验结果，pH8.8，2%（1/1）的!-mercaptOethanOI，0.7MsncrOse）证明该材料的育性转换主要受控于温度，特别是夜磨成匀浆，冷冻离

5、心10mi（n10000r/min4C），上清液温。关于温敏不育水稻的光温反应特性、育性变化加等体积的饱和酚液，摇匀后静置5min，取酚液层加规律以及生理生化代谢特点，已作过较深入的研入5倍体积的乙酸铵溶液（0.1mOI/L，用100%的甲究［3］，但对温敏不育水稻，特别是对高温敏感雄性醇配制）沉淀蛋白质（至少3h以上）。5000g离心核不育水稻芽期在热激条件下的蛋白质组分变化的20min，倒掉乙酸铵溶液，再用1mI乙酸铵溶液冲洗研究尚未见报道。本文以常规水稻湘晚籼2号作对沉淀一次，离心同上，将蛋白质沉淀放在-20C下保照，研究了高温敏感雄性核不育水稻培矮64S芽期存备用。用时用样品缓冲

6、液（125mmOITris-HCI在热激条件下蛋白质组分的变化情况，以求探讨温pH6.8，4%（1/1）!-mercaptOethanOI，20%gIyceraI）复敏不育水稻不育基因的表达机理，为更好地利用温溶蛋白质，上样前将复溶的蛋白质在沸水中水浴加敏雄性核不育水稻这一两用不育系资源提供了理论热4min，待冷至室温后离心，上清液用于SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）。收稿日期：2001-09-121.3SDS-PAGE与染色修回日期：2001-09-28使用垂直电泳槽，电泳采用不连续系统，主要参第一作者：男39岁讲师博士生照LaemmI［i4］的方法，但稍有改动，浓缩胶=

7、0.125mOI/1湖南师范大学生命科学学院湖南长沙410081!国家自然科学基金资助项目（39370078）LTris-HCIpH6.8；分离胶=0.375mOI/LTris-HCI第13卷第4期常德师范学院学报（自然科学版）VOI.13NO.420012年12月JournalofChangdeTeachersUniversity（NaturalScienceEdition）Dec.2001!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!