干旱胁迫下长豇豆茎干持绿性的关联分析-论文.pdf

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1、I,m澎江右J-：千学2014年第2期文献著录格式：鲁忠富，胡耀文，汪宝根，等．干旱胁迫下长豇豆茎干持绿性的关联分析[J]．浙江农业科学，2014(2)：202—203，207干旱胁迫下长豇豆茎干持绿性的关联分析鲁忠富，胡耀文，汪宝根，吴晓花，徐沛，李国景(浙江省农业科学院蔬菜研究所，浙江杭州310021)摘要：利用已建立的快速、准确的长豇豆种质苗期耐旱性鉴定技术体系鉴定了我国99份长豇豆微核心种质的重要耐旱性指标茎干持绿性。利用覆盖全基因组的1127个SNP标记进行核心种质群体的基因型分析和表型．标记关联分析，获得与茎干持绿性显著相关的SNP标记4个(P<10)。关键词：长豇豆

2、；耐旱；茎干持绿性；SNP；关联分析中图分类号：S643．4文献标志码：A文章编号：0528—9017(2014)02—0202—02豇豆[Vignaunguiculata(L．)Walp]起源于1．2处理设计非洲，是重要的豆类作物。长豇豆(‘种质材料直播于盆钵中，在玻璃温室中栽培。sesquipedalis)是豇豆的一个重要亚种，广泛种植于基质为营养土和蛭石(1：1)的混合物。实验设置东南亚与中国各地。目前我国长豇豆年栽培面积在正常对照组2个重复，干旱处理组3个重复。各20万hm以上，主要于夏秋季种植，以采摘嫩荚盆钵中均用量器量取等量基质装填，播种时各播5作为菜用。由于种植季节

3、正值高温，干旱成为制约粒种子，待第1对真叶平展后留取2株健壮一致的长豇豆生产的重要因素，严重影响长豇豆的产量和幼苗。胁迫处理前每盆钵每次均用等量且过量的水品质。挖掘、应用长豇豆耐旱基因是解决这一问题浇透基质。干旱处理组播种后18d停止浇水进行的重要手段。胁迫处理，在胁迫后第24d进行茎干持绿性表型茎干持绿性(Stg)是指植物在遇干旱胁迫时观察。能够在一定时期内保持其茎干叶绿素不被破坏，维1．3测定项目及方法持细胞正常生命功能的性状。该性状已被证明可作1．3．1基因型测定为豇豆、高梁、大麦等作物重要的耐旱性指标，并DNA提取。取各材料叶片组织0．1g加液氮研且具有测定简便、准确等优

4、点。关联分析是利磨成粉末，用Qiagene试剂盒参照说明书提用不同基因座等位变异(基因)间的连锁不平衡取DNA。关系进行标记与性状的相关性分析的遗传学方法，基因型测定。用Kaspar豇豆DNA高通量SNP以达到鉴定控制特定性状基因(或染色体区段)基因分型平台进行基因型分析，具体方法参考的目的。连锁不平衡是指群体内不同基因座基文献[5]。因问的非随机性关联。关联分析已被广泛用于动植1．3．2茎干持绿性鉴定物重要性状基因的挖掘、鉴定工作。本研究即将Stg分成0—5级：0级，茎干正常，无失利用基于SNP标记的关联分析开展豇豆耐旱性绿；1级，≤20％茎干失绿；2级，20％～40％茎研究．

5、、干失绿；3级，40％～60％茎干失绿；4级，60％～80％茎干失绿；5级：>80％茎干失绿至完1材料和方法全枯黄。1．1材料1．4关联分析以我国长豇豆微核心种质群体中的99份种质关联分析采利用Tassel2．1软件进行，在混为研究材料。合线性模型(MLM)下进行运算。所用群体的收稿日期2O13—12—18基金项目国家自然科学基金项目(30900985)作者简介鲁忠富(1963一)，男，浙江杭州人，实验师，从事蔬菜育种及新品种推广工作。E-mail：Iz~522@163．COlOr1。通信作者李国景E-mail：Guojing—li@yahoo．coln．cn。鲁忠富，等：干旱胁

6、迫下长豇豆茎干持绿性的关联分析目圜群体结构和亲缘关系系数采用文献[5]的征性的统计分布趋势，其Stg变异主要由品种的叶数据。绿素含量高低造成。而干旱处理组则呈现偏向低值的近正态分布的特点，表明干旱胁迫处理对多数植2结果与分析株造成了较重的胁迫，并且群体的Stg分布规律明对正常对照和干旱处理条件下豇豆微核心种质显，适宜进行关联作图分析。表1列出了对照和处群体的Stg调查结果(图1)显示，对照组没有特理组豇豆微核心种质群体茎干持绿性描述统计值。405O4535403O3525羹20152O151O10550O1330002000O02660O03000O03660O043300050

7、00O01000O02000O03000O04000O05000O01670002330O02670O03330O04000O04660O01O00001500002500003500O0450000100000stg值stg值图1正常对照和干旱处理下豇豆微核心种质群体的Stg值频率分布一一一一表1正常对照和干旱处理下豇豆微核心种质豇豆整合遗传图谱上，其中l一1481和1—1021l216群体茎干持绿性描述结果位点均定位于LG2上且紧密连锁，1—1286位点定位于LG10上。表2