大豆空间诱变突变体的RAPD分析-论文.pdf

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1、核农学报2014，28(5)：0772～0776772JournalofNuclearAgriculturalSciences文章编号：1000—8551(2014)05-0772-05大豆空间诱变突变体的RAPD分析赵曦王广金李铁刘丽艳谭巍巍陆杰付亚书刘昭军(黑龙江省农业科学院生物技术研究所，黑龙江哈尔滨150086；黑龙江省农科院绥化分院，黑龙江绥化152052)摘要：本研究应用RAPD技术在分子水平进行大豆空间诱变突变体的差异性分析，为大豆空间诱变育种提供理论基础。首次应用RAPD标记对大豆空间诱变的12个品系及4个原始对照种进

2、行多态性分析。随机选用的70个RAPD引物对原始对照种及12个空间诱变品系进行扩增，共获得247条DNA谱带，其中多态性谱带39条，总多态性位点比率为15．8％，品系间多态性位比率在1．43％～10％之间，扩增片段长度在250—2100bp之间。因此，通过空间诱变能够在DNA水平上导致大豆遗传物质变异，并且RAPD是一种研究植物空间诱变材料的较有效的分子生物学方法。关键词：大豆：空间诱变；RAPD；多态性DOI：10．11869／i．issn．100—8551．2014．05．0772空间诱变育种是指利用返回式卫星或高空气球将航天处理

3、的大豆品种，经过5代筛选后趋于稳定的12作物种子带到太空，利用太空特殊的环境引起生物体份材料，以及4份原始对照品种，分别为I组绥03—DNA序列结构变化和染色体畸变，从而使生物体性状3068航天处理材料所得4个品系，按编号顺序1—4发生改变，这种丰富的变异来源开辟了大豆育种的新号为绥SP095022、绥SP095025、绥SP095030、绥途径，充实了大豆育种学的内容。在丰富的大豆种质SP095034，对照材料为绥03—3068；II组绥02—339资源中进行高产、优质、多抗的新品种培育，常规的育航天处理材料所得3个品系，按编号顺序

4、1—3号为绥种方法需要较多的人力、物力；空间诱变育种变异效率SP095045、绥SP095050、绥SP095056，对照材料为绥高、幅度大、变异性状稳定、无环境污染⋯，更重要的02—339；111组绥农18航天处理材料所得2个品系，编是易获得突变体，选育出具有创新性的品种“。随号1—2号，为绥SP095085、绥SP095092、对照材料为着航天事业的发展，航天诱变技术越来越受到人们的绥农18；IV组绥农4号航天处理材料所得3个品系，关注，目前国外的研究多数集中在空间条件下生长发编号1—3号，为绥SP095002、绥SP095011

5、、绥育及其遗传特性的变化，国内则更倾向于获得高SP095017，对照材料为绥农4号，共16份材料。产、优质、早熟、抗病性和抗逆性强的新品种1．2空间诱变处理(系)，而关于大豆航天育种的多数研究主要集中供试材料为大豆品种绥03—3068、绥02—339、绥在搭载的当代及其后代的诱变效应和突变体的筛农18和绥农4号，2006年将4份材料的种子各分为2选。本研究在此基础上应用RAPD技术对高世组，一组进行航天搭载处理，另一组在常温下保存。航代材料从分子水平上进行遗传多样性分析，快速鉴定天搭载种子于当年9月9日搭载航天实践八号卫星升突变植株，

6、为大豆育种提供强有力的技术支撑。空，卫星在近地点187km、远地点463km的近地轨道共运行355h，航程约900万km，于9月24日返回。同1材料与方法年冬季南繁种植SP，2007年种植sP，冬季海南加代种植SP，2008年种植sP，sP～sP采用昆合摘荚收1．1材料获，sP代进行单株选择收获，2009年种植sP代并决本文采用熟期适中、抗逆性强、高产质佳的4个经选，每一代以大豆丰产性状如四粒荚数、节问数、百粒收稿日期：2013-05—30接受日期：2013．11—10基金项目：国家转基因重大专项基金(2008ZX08009—003)

7、作者简介：赵曦，女，助理研究员，主要从事大豆分子生物学研究。E．mail：zhaoxi_99@126．corn通讯作者：刘昭军，男，副研究员，主要从事大豆、玉米分子生物学研究。E-mail：liuzhaojun7@yahoo．com．en774核农学报28卷检测出26个基因位点，仅2个为等位基因位点；在第为7．鼯5％(表3)。△口叭卯盯计Ⅱ组绥02—339航天处理材料中17个位点只检测到T在所有诱变材料中，同一个多态性引物在不同组a1个等位基因位点；在第Ⅲ组绥农18航天处理材料中材料中扩增，得到的多态性位点比率大部分是相同的。共检测出

8、10个基因位点，2个为等位基因位点。此引物$82在第1组1号绥SP095022和2号绥∞加"加5外，引物$201、$204和$205在I、Ⅱ和Ⅲ组中所扩增SP095025、第Ⅲ组2号绥SP095092和第Ⅳ组2号绥O出的