重组人IFN-γ诱导自身免疫性疾病机制的初步探讨.doc

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1、重组人IFN-y诱导自身免疫性疾病机制的初步探讨作者：陈玲玲，郭于川，刘玉林【摘要】冃的观察IFN-Y是否能诱导健康人外周血和脐带血中B细胞分泌产生抗体，以及两者产生抗体的差异，初探IFN-Y是否通过影响CD5+B1细胞的功能而诱发自身免疫性疾病，为进一步阐明TFN-Y诱发自身免疫性疾病的机制、研究自身免疫性疾病的临床防治提供实验依据。方法无菌采集健康人外周血、脐带血，RosetteSepTM法分离得到B细胞，流式细胞仪检测B细胞纯度，将分离得到的外周血B细胞和脐带血B细胞分别经IFN-Y刺激，于培养的第3、5、7dELISA法检测抗体的含量变化，对照组为未加任何刺激的外周血

2、B细胞组和脐带血B细胞组。运用SAS统计软件将所得抗体的浓度进行统计学分析。结果经流式细胞仪检测，B细胞纯度为81.4%,两种来源B细胞经IFN-y刺激后，于第3d开始产生I刮。但是，在同一时间段，外周血与脐带血来源B细胞经培养后所产生IgM的量的差异均无统计学意义(P>0.05);在血液来源相同的情况下随着时间的延长产生TgM的量逐步增加，三个时间段产牛IgM的量进行两两比较的差异有统计学意义(P<0.01);所有实验组均未检测到TgG,空白对照组未检测到IgM、IgGo结论IFN-y可刺激B细胞分泌产生抗体，且对B细胞的种类没有选择性;只刺激产生IgM,而无I

3、gG产生，但其产生的抗体IgM的性质有待于进一步确定，其可能通过TTT型超敏反应机制诱导自身免疫疾病的发生。【关键词】IFN-y;CD5+B1细胞；口身免疫性疾病；IgMABSTRACTObjectiveTomakeapreliminarystudyonthepossibilityofIFN-YininducingtheBcellsinperipheralbloodandcordbloodtosecretantibodiesandthedifferencebetweenthetwokindsofantibodies,andtoexplorethepossibilityofIF

4、N-YinindueingautoimmunediseasesbyitsimpactonthefunctionofCD5+B1cel1ssoastoprovideexperimentalbasisforfurtherelucidationofthemechanismofIFN~Yininducingautoimmunediseasesandtheprevent!onandtreatmentofautoimmunediseasesinclinic・MethodsTheperipheralbloodandthecordbloodofthehealthywerecollectedu

5、ndersterileconditionandBcel1swereisolatedfromthemwiththemethodofRosetteSepTMandthepurityofBcellswasdetectedbyflowcytometry;thesecretedBcellsfromperipheralbloodandfromcordbloodwererespectivelystimulatedbyIFN-Yandthechangesofantibodycontentonthethird,thefifthandtheseventhdayafterculturewerede

6、tectedwithELTSA;nostimulationswereaddedtotheBcellsofperipheralbloodandcordbloodinthecontrol:theSASstatisticalsoftwarewasappliedinthestatisticalanalysisoftheantibodyconcentration.ResultsTheconcentrationofBcellsdetectedbyflowcytometrywas81.4%,theBcellsfrombothbloodsstartedexcretingIgMonthethi

7、rddayafterIFN-Ystimulation;thereexistednodiffereneeofstatisticalsignificancebetweentheTgMcontentexcretedbyBcellsinperipheralbloodaftercultureandthatincordbloodatthesametimepoint(P>:0.05)whi1etheTgMcontentfromeachofthebloodskeptincreasingwiththetimegoin