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1、热带作物学报2011，32（9）：1704-1707ChineseJournalofTropicalCrops一种适用于多糖多酚植物的高质量RNA快速提取方法阮孟斌，李文彬，于晓玲，彭明*中国热带农业科学院热带生物技术研究所，海南海口571101摘要植物总RNA的提取是进行下游分子生物学实验的关键基础，高质量的RNA是下游实验成功的保障。许多植物由于其体内含有酚、多糖以及其他的一些次生代谢物，要获得这些植物高质量的总RNA比较困难。本文在多次实验的基础上，提出了改良LiCl沉淀法，该方法步骤少、效率高，使用此方法得到的棉花幼苗总RN
2、A经检测表明其质量比使用冷酚法提取的RNA要高得多，且完全满足后续实验的要求。使用此方法成功提取了香蕉叶片、根、木薯叶片的RNA，经检测表明，所得到的RNA完整性好，完全可以满足后续实验的要求，说明改良LiCl沉淀法是一种适用于多酚多糖植物的快速RNA提取方法。关键词RNA；LiCl沉淀法；多酚多糖植物；快速提取方法中图分类号Q522；Q942.6文献标识码ARapidIsolationofHigh-qualityRNAfromHighPhenol-,PolysaccharidePlantsRUANMengbin,LIWenbin,
3、YUXiaoling,PENGMingTheInstituteofBioscienceandBiotechnologyCATAS,Haikou,Hainan571101,ChinaAbstractHigh-qualitybiologicallyactiveRNAisolationiscrucialinplantmolecularbiologicalexperiment.Manyplantshavehighlevelsofendogenousphenolics,polysaccharides,andsecondarymetabolit
4、yes,soisolatinghigh-qualitybiologicallyactiveRNAfromtheseplantsisverydifficult.Inthispaper,amodifiedLiClRNApreparationmethodwasdevelopedtoisolateRNAfromcottonyoungplant,toyieldshigh-qualitytotalRNA.Thenthehigh-qualityRNAsweresuccessfullyisolatedunderthismethodfrombanan
5、aleaf,cassavaleafandbananaroot.AlltheseresultsshowedthatthemodifiedLiClRNApreparationmethodisuniversaltoisolatehigh-qualityRNAfromthoseplantsthathavehighlevelsofendogenousphenolicsandpolysaccharides.KeywordsRNA;LiClpreparationmethod;Highphenoi-polysaccharideplants;Rapi
6、disolationdoi10.3969/j.issn.1000-2561.2011.09.024植物RNA的提取是进行植物分子生物学研究热酚法以及LiCl沉淀法[2,3,10,12-14][12]。Alemzadeh等的一个重要前提，高质量、具有生物学活性的应用冷酚法成功提取多酚植物大叶藻的RNA，但RNA是下游相关分子生物学实验成败的关键。部该方法步骤较多，整个过程需要保持低温状态。棉分植物或植物器官体内含有大量的酚类、多糖类以花幼苗富含酚类化合物、多糖以及其他一些次生代及其他的一些次生代谢物，提取这些植物的RNA谢物质，且RN
7、A酶活性高，难以获得高质量相对比较困难。多糖的理化性质与RNA相似，在[15]应用冷酚法成功提取了棉花幼苗RNA。Ruan等提取过程中容易与RNA一起形成胶状沉淀，在后的RNA，但RNA质量不高，有多糖的污染。而续的反转录等实验中明显影响实验效果[1]。而酚类LiCl沉淀法需沉淀过夜，耗时长、效率低。因此，物质在提取过程中容易氧化成醌类物质并与RNA找到一种适用于多糖多酚植物高质量RNA快速提形成不可逆的结合，从而大大降低RNA的活性。取的方法可以为开展此类植物分子生物学的研究奠同时，由于不同植物、不同器官之间所含物质的差定良好的基
8、础。异，很难有一种提取方法可以适用于不同植物或不为了获得高质量的RNA并提高实验效率，本同器官的RNA提取[2-11]文对不同的植物RNA提取方法进行了比较、综合。多酚多糖植物RNA的提取大多采用冷酚法、和改良，得到了一种适用于棉花幼
