质壁分离实验材料的改进初探.doc

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1、质壁分离实验材料的改进初探在常规的质壁分离实验操作屮，通常是以紫色的洋葱鳞叶作为实验材料，这是因为它的外表皮细胞较大液泡的细胞液屮含有紫色的花青素。在显微镜下观察，无论是处于正常状态还是质壁分离状态的细胞，都能看到其呈现紫色的液泡。但在实验操作屮，我们发现：（1）每个洋葱鳞茎只有最外2〜4层鳞叶外表皮呈现紫色，适合用作实验材料；而利用里面儿层鳞叶进行实验的观察效果则很不理想；（2）由于操作技巧还不够熟练，再加上外表皮与叶肉组织结合得较紧密，因此，不少学生在撕取时往往会连同表皮下一层茯至几层叶肉细胞一起撕了下来，结果导致在镜检时看到的是重叠的

2、细胞物像图。为此，课题组成员围绕更换实验材料以提高实验效果的可能性进行了探讨。因为在实验屮，我们也发现洋葱鳞叶的内表皮极易撕取，茯至会在鳞茎放置多LI后剥取鳞叶时H动脱离。有的学生提岀利用内表皮做实验材料将可避免上述镜检时的细胞重叠现象，但有的学生提出界议，由于洋葱鳞叶内表皮是无色的，因此很难获得理想的观察效果。如果通过染色的方法使洋葱鳞叶内表皮着色，是否就能替代外表皮进行实验呢？于是，我们做了以下探究实验。一、材料的准备分别于实验前六天、四天和一天对洋葱鳞茎作两种染色处理。为了不影响细胞的正常生理功能，特选用无毒的橙色1%与绿色1%两种食

3、川色素（上海颜料研究所；狮头牌；U落黄与果绿）作为染色剂。处理1（注射染色）用针筒抽取染液缓缓注入洋葱鳞叶内侧。处理2（浸泡染色）切取洋葱鳞叶，浸浴于培养皿的染液屮。为避免微生物的污染，培养1111需加盖。二、结果与讨论1•处理1的实验结果表1处理1（注射）的镜检效果处理效果①注射后一天的洋葱内表皮（绿色）++++②注射后一天的洋葱内表皮（橙色）+++③注射后四天的洋葱内表皮（绿色）+++++④注射后四天的洋葱内表皮（橙色）++++⑤注射后六天的洋葱内表皮（绿色）++++⑥注射后六天的洋葱内表皮（橙色）+++注：+的个数越多表示镜检效果越好

4、。上述镜检效果表明，经两种染液注射染色处理一夭的材料（洋葱鳞叶内表皮），因染色时间过短而导致细胞液着色较淡，镜检效果不理想；经两种染液注射染色处理六天的镇检效果与前者人致相似；经两种染液注射染色处理四天的材料的镜检效果嚴佳。在两种染液屮，绿色染液的处理效果显然比橙色染液的相应效果要更好些。2.处理2的实验结果表2处理2（浸泡）的镜检效果处理效果①浸泡一天的洋葱内表皮（橙色）+++②浸泡一天的洋葱内表皮（绿色）++③浸泡四天的洋葱内表皮（橙色）++++④浸泡四天的洋葱内表皮（绿色）+++⑤浸泡六天的洋葱内表皮（橙色）+++⑥浸泡六天的洋葱内表

5、皮（绿色）++注：+的个数越多表示镜检效果越好。上述镜检效果表明，与处理1相似，经两种染液浸泡处理一天的材料亦因染色时间太短而导致镜检效果不理想；浸泡染色处理六天的材料的镜检效果与前者大致相似；而镜检效果最佳的仍为浸泡染色处理四天的材料。在两种染液屮，橙色染液的处理效果显然比绿色液的相应效果更好些。资料来源《生物学教学》2002.10