烟草by-2细胞和蚕豆叶肉细胞原生质体微丝骨架及latrunculin b处理对其分布的影响

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1、浙江大学学报(农业与生命科学版)36(5)：497～502，2010JournalofZhejiangUniversity(Agric．&LifeSci．)文章编号：1008—9209(2010)05—0497—06DOI：10．3785／j．issn．1008—9209．201005．004烟草BY一2细胞和蚕豆叶肉细胞原生质体微丝骨架及latrunculinB处理对其分布的影响叶露飞，刘成科，孟春梅一，洪健(1．浙江大学生物技术研究所，浙江杭州3100292．浙江大学分析测试中心，浙江杭州310029)摘要：用酶解法分别制备烟草BY．2悬

2、浮培养细胞和蚕豆叶肉细胞的原生质体，应用激光共聚焦显微镜观察经TRITC-鬼笔环肽荧光染色的2种原生质体的微丝骨架空间分布，以及观察用1O和20“mo1．L_。微丝抑制剂latrunculinB分别处理2种原生质体后对其分布的影响．结果表明：激光共聚焦显微镜清楚地显示出2种细胞原生质体中微丝精细排列的均匀网络结构；共聚焦显微成像显示了随latrunculinB处理时间的延长微丝解聚和微丝骨架分布的动态过程．建立原生质体制备、微丝骨架荧光染色、1atrunculinB处理及激光共聚焦显微观察的实验体系为进一步研究植物微丝骨架的功能奠定了基础．关

3、键词：原生质体；微丝骨架；latrunculinB；激光共聚焦显微镜中图分类号：Q944．42；Q945．34；Q71文献标志码：AYELu—fei，LIUCheng—ke，MENGChunmeiT。，HONGJian·。(j．[nstituteofBiotechnology，ZhejiangUniversity，Hangzhou310029，China2．CenterofAnalysisandMeasurement，ZhejiangUniversity，Hangzhou310029，China)Microfilamentcytoskelet

4、onsinBY-2protoplastsandbroadbeanmesophyllprotoplastsandtheeffectoflatrunculinBontheirdistribution．JournalofZhejiangUniversity(Agric．&LifeSci．)，2010，36(5)：4975O2Abstract：ProtoplastsoftobaccosuspensionculturedBY一2cellsandbroadbean(Viciafaba)mesophyllcellswerepreparedbyenzymed

5、igestion．ThemicrofilamentcytoskeletonsinprotoplastswerelabelledbyTRITC—phalloidinstaining．Laserscanningconfocalmicroscopy(LSCM)revealeddelicatemicrofilamentnetworkswhichevenlydistributedintheprotoplasts．LSCMalsorecordedthedynamicprocessofmicrofilamentdepolymerizationanddist

6、ributionafterrespectivetreatmentwith10and2O／~mol-L一latrunculinB．Thisstudyofprotoplastpreparation，microfilamentstaining，latrunculinBtreatmentandLSCMsetstheexperimentalfoundationsforfurtherstudiesofmicrofilamentcytoskeletoninplantcellsKeywords：protoplasts；microfilamentcytoske

7、leton；latrunculinB；confocallaserscanningmicroscope细胞骨架是真核细胞内由丝状蛋白多聚体管、微丝和中问纤维．在植物细胞中是否存在中构成的、遍布于整个细胞质的网络结构，包括微间纤维仍无定论．微丝骨架(microfilament收稿日期20091l05基金项目国家自然科学基金资助项目(30770091；30270873)．作者简介IJ-r露飞(1984)，男，湖北武汉人，硕士研究生，从事分子植物病理学研究E—mail：yelufei@gmail．com通信作者洪健，男，教授，从事分子植物病理学研究T

8、el：0571—86971179；E—mail：jhong@zju．edu．cn浙江大学学报(农业与生命科学版)第36卷cytoskeleton)主要由球状肌动蛋白