心衰心阳虚证候积分与缬氨酸代谢指纹图谱的相关性研究

《心衰心阳虚证候积分与缬氨酸代谢指纹图谱的相关性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、第8卷第l7期-总第97期◎照毫堡DLC#T~()IO教FC2010年09月·上半月刊心衰心阳虚证候积分与缬氨酸代谢指纹图谱的相关性研究曾瑞峰李俊广东省中医院急诊科(510120)摘要：目的探讨应用反相高效液相色谱(Reversed．phaseHighperformanceLiquidChromatography，RP．HPLC)的方法研究心衰心阳虚证患者血浆中缬氨酸(Valine，Va1)的图谱特点，结果以缬氨酸峰面积为自变量，心阳虚证候积分为应变量作散点图，可见心阳虚证积分有随缬氨酸面积增加而减少，但在统计学上不成立。结

2、论基于反相高效液相的方法测定氨基酸的代谢指纹图谱，具有选择性高、分析速度快和灵敏度高等优点。心阳虚证候积分与缬氨酸存在正相关的趋势。氨基酸代谢指纹图谱有望可用于找出心衰心阳虚患者的证候特点。关键词：心力衰竭；心阳虚；反相高效液相色谱；缬氨酸doi：10．3969／i．issn．1672．2779．20l0．18l30文章编号：1672—2779(2010)．18-0169．03心力衰竭(HeartFailure，HF)也称充血性心力衰竭，是由／min)，分离血浆，置于1．5mL的EP管中，置丁20℃冰箱中心肌炎、冠心病、高血

3、压病等病因使心功能减退、心排血量下保存。同时行BNP、血气分析等检查。降而出现的一种复杂的临床综合征，是大多数心血管疾病的最2．1．2实验方法终归宿，也是最主要的死亡原因。心衰严重影响着患者的生活2．1．2．1仪器与试剂高效液相色谱仪(美国Waters公司)：质量和寿命，且医疗费用高，给家庭、社会造成了沉重的医疗WatersALLIANCE2695，紫外检测器Waters2998；漩涡器(MSI负担，冈此心衰的防治一直是现代医学界中的研究热点。近年Minishaker)；离心机(Mircofuge16centrifuge)；

4、超纯水仪(ELIX来，随着中医药现代化研究逐渐成为焦点问题，学者们力图用Millipore0．22Bm)；称量仪(电子分析天平BS224，d=0．0001g)；现代科学方法论来衡量中医，而中医证型的量化、中医辨证的恒温水浴锅(上海申胜生物技术有限公司，型号W5018)；甲标准化则为热点之～。醇(AR优级纯，广州化学试剂厂)；乙腈(HPLC色谱纯，天1临床资料津市科密欧化学试剂有限公司，批号：20090522)；四硼酸钠1．I病例来源选择自2009年12月到2010年4月，于广东(上海雷磁创益仪器仪表有限公司)；2，4-二硝基

5、氯苯(GR省中医院门诊、急诊、留观、综合病区、心血管内科就诊或住分析纯，四JII西亚化工股份有限公司)，批号：200910261；无院的符合纳入标准的心衰心阳虚患者28例。水乙酸钠(AR优级纯，天津市百世化工有限公司)；冰乙酸(AR1．2诊断标准优级纯，天津市百世化工有限公司，批号：2009320)；三乙胺1．2．1中医诊断标准参照《中医诊断学》的标准进行。心阳(AR优级纯，天津市雷宇精细化工有限公司)；缬氨酸(Va1)虚证临床表现为心悸怔忡，心胸憋闷，或心痛，唇舌青紫，气(AR优级纯，中国药品生物制品鉴定所)。短自汗，畏寒

6、肢冷，面色咣白，舌淡胖，苔白滑，脉沉迟无力，2．1．2．2色谱条件色谱柱：KromasilC18柱(250mm×或微细，或结代。同时，经由两位(或以上)中医内科学副主4．6mm，5pm)；流动相A：甲醇；流动相B：醋酸盐缓冲液任医师以上职称的医师辨证为心阳虚证者。(25mmol／L，PH4．9)一甲醇一三乙胺体积比(90：10：0．15)。1．2．2中医证候积分参照《中药新药临床研究指导原则梯度洗脱程序：0~20min，50％~65％甲醇，50％一35％缓冲(2002年版)》中的心力衰竭，心阳虚证分级量化表制定相应盐(25m

7、mol／L醋酸钠一甲醇一三乙胺，三者体积比90：10：中医证候评分表。0．15，PH5．8)。运行时间：20min；检测波长360nm；柱温30℃；1．2．3西医诊断标准1985年Carlson—Boston诊断标准进样量：50~tL。1．3纳入标准符合中西医诊断标准，年龄≥4O岁；患者知2．1．2．3衍生试剂的配制精密称取2，4一二硝基氯苯适量，用情同意。乙腈溶解成浓度为10mmol／L的衍生化试剂。4℃避光保存。1．4排除标准①入选前28天内经冠状动脉造影术确诊为急2．1．2．4衍生化反应取血浆10o置于EP管中，加乙腈

8、2001xL，性心肌梗死；②因全身性疾病或酗酒导致的继发性心力衰竭；涡旋30s，离心15min(8000r／min)。取上清液100pL于另一EP③既往3个月冠状动脉旁路搭桥术(CABG)及经皮冠状动脉管中，加入pH9．0硼砂缓冲溶液2001xL、衍生试剂l00uL，涡旋介入治疗(PCI)