硝酸铅对小麦(triticum aestivum linn.)根尖有丝分裂的影响

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1、第26卷哈尔滨师范大学自然科学学报Vo1.26,No.22010第2期NATURALSCIENCESJOURNALOFHARBINNORMALUNIVERSITY硝酸铅对小麦(TriticumaestivumLinn.)根尖有丝分裂的影响水陈冬朋,于丽杰,朱宏(哈尔滨师范大学)【摘要】以小麦为材料,研究硝酸铅对小麦根尖细胞的遗传毒性效应.用不同浓度的硝酸铅溶液分别处理小麦根尖8h、16h、24h,通过常规染色体压片技术,测定小麦根尖的有丝分裂指数和染色体畸变现象.结果表明:小麦根尖随着硝酸铅浓度的增加和染毒时间的延长,有丝分裂指数逐渐下降,染色体畸变率、

2、细胞微核率逐渐上升.关键词:硝酸铅;小麦;有丝分裂指数;染色体畸变;微核变有明显的相关性,可作为反映外源性因素对细0引言胞染色体损伤强度的指标.因此微核试验成为监铅(Pb)是剧毒的重金属污染物之一1J,其测环境污染物对染色体损伤效应的一种简便、快污染源较多,如汽车尾气、含铅废液等,且具有不速、有效的监测方法.可降解性,可以在环境中长期存在】.重金属铅从文献资料可知铅可能直接作用于染色体从在植物中大量积累,不仅影响植物的生长和发育,而诱发染色体畸变及微核的形成.以小麦为材料,而且会进入食物链,对生态环境和人体健康造成用不同浓度的硝酸铅溶液分别处理小麦根尖,

3、测潜在威胁3J,进人人体的铅9O%储存在骨骼,定小麦根尖的有丝分裂指数和染色体畸变现象,10%随血液循环流动而分布到全身各组织和器研究硝酸铅对小麦根尖细胞的遗传毒性.官,影响血红细胞和脑、肾、神经系统功能],特1材料和方法别是婴幼儿吸收铅后,将有超过30%保留在体内【5J,影响婴幼儿的生长和智力发育,并损伤其1.1试验材料认知功能、神经行为和学习记忆等脑功能,严重者小麦,购自哈尔滨农贸市场.造成痴呆。。.鉴于重金属铅对人体如此严重的生1.2试验方法物毒性作用,美国环保总局(EPA)将其列人内1.2.1供试污染物分泌干扰物(又称环境激素)名单,因此对食物中

4、采用硝酸铅为试剂,配制Pb水溶液质量浓铅的检测具有重要意义.度分别为0.1~g/mL,1I~g/mL,lO~g/mL,微核(micronucleus,简称MCN)是一种在细100Ixg/mL,以蒸馏水做空白对照.胞核以外,游离于细胞浆中的小块染色质,是真核1.2.2小麦处理生物细胞中的一种异常结构,是染色体畸变在间小麦2O℃恒温箱中浸种40h后催芽,初生期细胞中的一种表现形式[8].由于它与染色体畸根长至1—2cm时,对小麦根进行染毒处理,设立收稿日期:2010—02—06黑龙江省教育厅项目(0551097);哈尔滨师范大学校基金资助哈尔滨师范大学自然科

5、学学报2010拄三组培养(8h、16h、24h),每组设置5个浓度(0.1~g/mL,lI~g/mL,10I~g/mL,100~g/mL);表1硝酸铅对小麦根尖细胞有丝分裂指数的影响卡诺固定液固定小麦根24h;将固定的材料转至70%的酒精中保存备用;使用时将其放在1mol/L的盐酸在60℃水解8min左右,直至根尖软化;蒸馏水浸洗3次,Schif试剂中染色30min,亚硫酸水溶液洗3次,5min/次;自来水洗1次,5min.1l叫染色后的材料按常规方法压片¨,在0.1ympus数码显微镜下镜检观察并拍照.1.3统计分析每个实验组观察1000个左右细胞,计

6、算有注.有丝分裂指数均镜检1000个细胞;代表P<0.05.丝分裂指数;染色体畸变畸变率;微核率:对表中各处理进行x2独立性检验¨引.结果有丝分裂指数(%)=(细胞分裂数/细胞总显示(见表1)不同处理与对照相比差异显著,在数)X100;实验剂量范围内,随着浓度的增加,染毒时间的延染色体畸变率(%)=(染色体畸变细胞数/长,硝酸铅溶液对小麦根尖细胞有丝分裂的抑制分裂细胞数)×100;作用显著增强,有丝分裂指数显著降低.微核率MCN(%。)=(带有微核的细胞数/观2.3不同处理的硝酸铅水溶液对小麦根尖细胞察细胞总数)×1000;染色体畸变的影响所得数据经统计

7、分析¨,进行各浓度及不同与对照小麦图谱相比,不同浓度硝酸铅溶液时间处理与空白对照间的差异显著性比较.处理实验组中,出现中期落后染色体图1A、染色体黏连或断片;后期及末期滞后染色体、染色体不2结果与分析同时到达两极、多核及微核、核形状不规则等染色2.1不同浓度的硝酸铅水溶液对小麦根尖染毒体畸变现象(图1B、C、D).过程的影响当染毒时间相同时,硝酸铅水溶液浓度越高染毒的小麦越容易腐烂;当硝酸铅水溶液浓度相同时,随着染毒时间的增加,小麦越容易腐烂.尤其在染毒时间为24h,浓度为100p~g/mL的硝酸铅水溶液下小麦腐烂程度尤为严重.而清水培养的小麦没有腐烂.

8、推论可能是由于硝酸铅水溶毒AB性在一定程度上导致小麦组织抵抗力下降引起的.当染毒

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