实验十八 霉菌的形态观察.doc

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1、实验十八霉菌的形态观察ery目的要求学习霉菌的标本制备方法，观察根•霉、毛•霉、青-霉、曲毎、白地芻的形态构造。材料1.菌种：白地霉（Ceotrichumcandiduni）摇瓶培养液；根霉（Rhizopussp.）＞毛霉（Mucorsp.）＞曲霉（Aspergillussp.）＞青霉（Penicilli—umsp.）平板。2.染料：乳酸石炭酸棉蓝液。3.其他：显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、解剖针、培养皿、玻璃棒、滤纸、20%甘汕。原理霉菌菌丝较大，细胞容易收缩变形，砲子容易飞散，在制备霉菌标本吋，常用乳酸石炭酸溶液作为介质，具有不使细胞变形，可杀菌防腐，不易干燥，能保持较

2、长时间等优点，若加入棉蓝，乂具有一定染色效果。霉菌的有些结构在制片过程屮易被破坏，影响观察，可采用载玻片培养法。此法便于直接显微镜下观察，尤其适用于根霉的假根，曲霉的足细胞及分生砲子链等结构的生长情况的观察，并且还可在同一标本上观察到微生物发育的不同阶段的形态。方法1.白地霉的观察取一块干净的载玻片，加一滴白地霉培养液，加盖玻片制成水浸标本片，在显微镜下观察片地霉菌丝及节饱子的形态。2.其他霉菌观察（1）-般观察法：加一滴乳酸石炭酸棉蓝液于洁净的载玻片屮央，用解剖针从菌落的边缘处挑取少量带有泡子的菌丝，放入乳酸右炭酸棉蓝液屮，再细心地把菌丝挑散开，加盖玻片，注意不要有气泡产生

3、。直于显微镜卜观察，菌丝呈蓝色，颜色的深度随菌龄的增加而减弱。观察根霉吋，注意观察其菌丝（无横隔）、假根、他子囊柄（与假根相对着生）、沦子囊、囊轴、囊托、砲子囊他子及厚垣孑包子。观察毛鐸时，注意观察其菌丝（无横隔）、他子囊柄、囊轴、他子囊泡子及厚垣砲子。观察曲霉时，注意观察其菌丝（有横隔）、足细胞，分生他子梗、顶囊、小梗（形状、层数及在顶囊上的着生情况），分生泡子的着生情况。观察青霉吋，注意观察其菌丝（有横隔），分生沦子梗，带状枝（小梗的轮数及对称性）,分生施子的着生情况。（2）载玻片培养法：%1湿室准备：在培养皿底部先放一张圆形滤纸，在滤纸上依次放上“Z”型玻璃棒、载玻片和

4、盖玻片（两片），盖上培养皿盖，用纸包扎好，高压（9.8X104Pa）灭菌20分钟。%1用接种环挑取少量霉菌葩子，直于湿室的载玻片的屮央，用无菌滴管滴加少量冷却至45°C左右的察氏培养基。%1将辍子在火焰上灼烧灭菌后，取无菌盖玻片盖在培养基上，然后轻轻压一下。川滴管取融化的石蜡将盖玻片的三边密封，如图19・1・（1）所示。%1将3〜5ml20%甘汕倒于湿室内，以保持湿度，如图19・1・（2）,将培养皿宜于28°C恒温箱中培养2天。%1将培养好的载玻片取出，置于显微镜卜观察。图19-1•霉菌的载片培养内容1.制片观察白地霉菌丝及节抱子形态。2.制片观察根霉、毛霉、青霉及1山霉的形

5、态构造。3.对根霉、曲霉、青霉作载片培养，观察其形态构造。作业1.绘出所观察到的各种霉的形态图，注明各种结构的名称。2.列表比较根霉、毛霉、Illi霉、青霉形态结构及繁殖方式的异同。3.为什么在实验屮的一般培养条件下难观察到霉菌的有性饱子？