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时间:2020-04-03
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1、化学试剂对四膜虫观察的影响•结题报告化学试剂对四膜虫观察的影响摘要:通过这个实验,初步了解四膜虫的形态结构和功能特点,加人对淡水原生生物的认识度;通过这次自主实验,培养严谨的科学思维,掌握合理解决问题的科学方法,切实加强动手能力,初步具备科学探索精神;过酸、过碱都会导致四膜虫死亡,其总体趋势如下:正常状态下四膜虫为椭圆形或梨形,随着酸或碱浓度增加,细胞逐渐拉长、膨人并最后死亡;通过对比,发现碱对四膜虫破坏性比酸要大,即四膜虫更耐酸。关键词:化学试剂、四膜虫、观察影响前言:四膜虫(Tetrahymena)是一种单细胞真核生物,分布在全球的淡水水域中,属于原生生物
2、门(Protista)纤毛虫纲(Ciliophora),与一般人熟知的草履虫(Paramecium)在型态生理上十分相似。四膜虫外观呈椭圆长梨状,体长约50微米,全身布满数百根长约4・6微米长的纤毛,纤毛排列成数十条纵列,是不同种间纤毛虫分类的特征之一。四膜虫身体前端具有口器(oralapparatus),有三组三列的口部纤毛,早期在光学显微镜下观察时看似有四列膜状构造,因此据以命名。四膜虫易于在实验室里培养,这归功于研究人员已经找出可以适于四膜虫生长所需的液态培养基成分,因此四膜虫从早年开始即是一种实验生物学上所使用的模式生物(modelorganism),
3、用这种生物当作范例与工具,研究各种基础生物学的现象。在过去的50年中,以四膜虫为实验对象在基础生物学研究中取得了一系列突破性的成果,如端粒与端粒酚的发现、获得诺贝尔奖的核酶发现和组蛋白翻译后修饰功能的发现等。近年来,四膜虫大核的基因体(genome)也已经完成定序,所以在进入基因体时代的今日与后基因体时代,生物学家仍可以持续以四膜虫为材料进行研究。研究目的及意义:1•学习四膜虫的一般培养方法,掌握四膜虫液体培养基的制作方法;2.加强实验操作能力,学习并熟练掌握无菌操作台、高压蒸汽灭菌锅、显微镜、摇床筹使用;3.了解对照试验的设计,学习通过单一变量进行实验探究的
4、方法,消除偶然误差对实验结果的影响;4.通过这个实验,初步了解四膜虫的形态结构和功能特点,加人对淡水水生生物的认识度;5.观察并比较选定化学试剂对四膜虫观察的影响,从中深刻认识到生存环境対生命的重要意义;6.通过这次自主实验,培养严谨的科学思维,掌握合理解决问题的科学方法,切实加强动手能力,初步具备科学探索精神;7.通过小组共同努力完成实验,养成并提高小组成员的团队合作意识,及通过讨论的方法得到结论的能力,增强组员彼此间的联系和默契,为以后学习奠定基础。1>材料与方法1.1.材料:1.1.1.对象:大量的四膜虫,四膜虫培养液。1.1.2.试剂:培养:葡萄糖,蛋
5、白月东,无菌蒸憾水,NaOH溶液(用于调节PH为7.0——7.5),观察:NaOH(lmol/L,0.1mol/L,0.01mol/L,0.001mol/L);HCI(浓度同上);NaCI(浓度同上);蒸镭水;1.13.器具:天平,烧杯,玻璃棒,精密PH试纸,量筒,胶头滴管,酒精灯,试管,移液枪,高压蒸汽灭菌锅,锥形瓶,摇床,无菌操作台,恒温培养箱,显微镜,载玻片,盖玻片。1.2.实验原理细胞生存需要一定的条件,四膜虫也不例外。其形态比较固定,细胞较大,纤毛和伸缩泡及其本身都在不停地运动。一旦条件发生变化,四膜虫所发生的反应马上就可以被观察到。本实验通过对一些
6、常见的化学试剂(酸和碱),以不同浓度对四膜虫进行处理(高渗和低渗),观察较短时间内四膜虫细胞所发生的效应。1.3.实验方法1.3丄液体培养基的配置培养基配方⑴牛肉膏5已蛋口月东10g,葡萄糖斑双蒸水lOOOmL2)酵母浸出汁5g,蛋白豚10已葡萄糖lg,双蒸水lOOOmL培养基配制步骤:由于实验室条件限制,本组采用上述2)配方,lOOOmL大烧杯,5个300mL锥形瓶。1)用电子天平分别称量上述适量牛肉膏,蛋白月东,葡萄糖,转至烧杯中,并加入适量双蒸水溶解,沿着玻璃棒引流至lOOOmL大烧杯屮,并用双蒸水润洗烧杯若干次,润洗液均沿玻璃棒引流至大烧杯中,可以加热
7、加速溶解;2)调节pH值:配制浓NaOH溶液,待培养基冷却后调节pH至7.0(加入NaOH溶液时,注意安全,且注意pH测量);3)加入双蒸水定容至lOOOmL;4)将培养液分别转移至5个锥形瓶中,每个150mL5)高压蒸汽灭菌:将锥形瓶塞上硅胶盖并用报纸包好,用橡皮筋捆扎好,放入高压蒸汽灭菌锅(100摄氏度,15分钟)灭菌后取出。1.3.2.实验用品的灭菌将15只空试管和一盒移液枪头(ImL)塞好盖子,用报纸包好并用橡皮筋扎好,放入高压蒸汽灭菌锅(120摄氏度,20分钟)灭菌后取出,置于适宜位置。1.3.3•接种在无菌操作台上(事先紫外线灭菌20分钟),用酒精
8、给双手消毒后,用移液枪在酒精灯火焰附近
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