乙肝两对半定量检测.doc

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1、乙肝两对半定量检测乙肝两对半定性和定量都是检测乙肝病毒标志物五项指标，即乙肝表面抗原及抗体(HBsAg和HBsAb)；e抗原及e抗体(HBeAg和HBeAb)；核心抗体(HBcAb)。所不同的是定性是以阴性、阳性形式报告结果，有条件的医院使用酶标仪读取结果，可以得到一个比值，可以粗略估计乙肝病毒感染情况；而定量是以较为先进的发光技术及特殊的检测仪器检测乙肝标志物的含量，可以直观的反映抗原或抗体存在的多少，因而在诊断，动态监测病情变化和治疗效果，以及判断预防接种后抗体产生量能否起到预防作用等方面具有重要意义。与定性相比，乙肝两对半定量

2、检测具有如下优势：1、极大地提高了检测的灵敏度　　时间分辨荧光免疫定量技术（TRFIA）定量检测HBsAg灵敏度可达0.2ng/ml,而定性检测的灵敏度是2ng/ml，定量检测可提高检测的灵敏度。因此，在急性乙肝早期能及早检出HBsAg，确证乙肝病毒感染，缩短窗口期；其次，可发现低浓度HbsAg携带者，在部分慢性乙肝患者中，由于机体缺乏对HBV包膜蛋白的免疫应答，HBsAg表达较低，定性检测可出现HBsAg和HBsAb均阴性的情况，TRFIA技术则可避免这些情况的发生，为正确判断病情提供依据。2、能动态观察疗效和监测病情1）监测病情

3、变化定量分析HBsAg和HBsAb的浓度变化，可预见急性乙肝是否处于恢复期。如HBsAg浓度降低，HBsAb浓度逐渐升高，可说明病情正往恢复期发展；反之，HBsAg浓度处于较高水平或上升趋势，而HBsAb一直处于较低水平，则易发展为慢性乙肝或病毒携带者。2）观察治疗效果定量分析HBeAg和HBeAb的浓度变化，可反映病情变化和治疗效果。定量测定能明确检测HBeAg向HBeAb转换的时期，即表现为HBeAg浓度下降和HbeAb升高的过程。高浓度的HBeAg还可间接提示病毒处于高复制状态，具有较高的传染性。高浓度的HBeAb一方面提示病

4、情好转，而在某些时候（如肝功能指标很差）则可能与肝坏死、肝硬化、肝癌有关。3）监测感染状况HBcAb浓度的高低可反映病毒感染的状态。高浓度的HBcAb提示乙肝急性感染，恢复期浓度降低，慢性乙肝呈HBcAb持续高浓度；而低浓度的HBcAb一般为恢复期或既往感染。4）判断病情演变乙肝两对半定量检测有利于对慢性肝炎活动性或非活动性的判断，非活动性慢性乙肝各项指标相对稳定，活动性往往呈现进行性变化。3、TRFIA技术两对半定量和PCR技术DNA定量可互相补充　　血清HBV-DNA荧光定量PCR测定可以直接反映血液中病毒复制状态，具有很多临床

5、应用价值，但不能完全反映病毒复制静息期肝细胞内HBV病毒状态。HBV-DNA阴性并不完全代表体内HBV已被清除，结合“两对半”各项指标更能客观反映体内HBV病毒状态。4、HBsAb的定量测定能够对乙肝的预防起到监督作用　　HBsAb的定量测定能够对抗体是否真正具有免疫力作出正确评价，对乙肝的预防起到监督作用。HBsAb的含量在10mlU/ml以上血清定性检测即可呈阳性结果，但并不提示机体都一定具有免疫力，而HBsAb的含量10-100mlU/ml之间的样本，定性虽为“阳性”，但此时机体对HBV的免疫力较弱，甚至不能预防乙肝病毒感染；

6、只有HBsAb的含量达到100mlU/ml以上时才可确定具有抵抗乙肝病毒入侵的作用。作定量检测，可根据HBsAb的含量判断机体对乙肝病毒的免疫状态及乙肝疫苗的免疫效果。因此定量测定对乙肝疫苗免疫力的评价和高危人群预防免疫具有重要意义，特别是在少年儿童预防乙肝方面。时间分辨荧光免疫定量技术（TRFIA）是用三价稀土离子及其螯合剂作为示踪物，如铕（Eu3+）、铽（Te3+）及钐（Sm3+）、镝（De3+）等代替传统的荧光物质、放射性同位素、酶和化学发光物质，来标记抗体、抗原、多肽、激素、核酸探针或生物活性细胞，待反应体系（如抗原抗体免疫

7、反应、生物素（链）亲和素反应、核酸探针杂交反应、靶细胞与效应细胞的杀伤反应等）发生后，用时间分辨荧光仪测定最后产物中的荧光强度，根据荧光强度和相对荧光强度比值，判断反应体系中分析物的浓度，达到定量分析的目的。