超高效液相色谱在药物分析中的应用

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1、万方数据天津药学TianjinPharmacy2009年第2l卷第6期超高效液相色谱在药物分析中的应用。郝桂明，唐素芳(天津市药品检验所，天津300070)摘要超高效液相色谱(UPLC)是近年来发展的以超高速度、超高分离度、超高灵敏度为特点的新型液相色谱技术。其应用于复杂体系快速分析所表现出的优势，已引起r药物分析丁作者的重视。本文对近年来超高效液相色谱在药物分析中的应用进行了综述。关键词超高效液相色谱，液相色谱技术，药物分析中图分类号：R917文献标识码：A文章编号：1006-5687(2009)06-0064-06Applicationsofult

2、raperformanceliquidchromatographyinpharmaceuticalanalysisHaoGuiming，TangSufang(TianjinMunicipalInstituteforDrugControl，Tianjin300070)ABSTRACTUltraperformanceliquidchromatography(UPLC)，anewseparationtechniqueinliquidchromatographywithitsfea-tureof'‘hishspeed，resolutionandsensitiv

3、ity”，hasattractedmoreattentionofthepharmaceuticalsanalysts．Thispresentpaperre-viewedrecentapplicationsofUPLCinpharmaceuticalanalysis．KEYWORDSUPLC，liquidchromatographictechnique，pharmaceuticalanalysis2004年3月，Waters公司率先推出了第一台商品化的超高效液相色谱系统(acquity，UPLCTM)。超高效液相色谱(ultraperformanceli

4、quidchromatography，UPLC)系指一种采用小颗粒填料色谱柱(粒径小于2肛m)和超高压系统(压力大于105kPa)的新型液相色谱技术，能显著改善色谱峰的分离度和检测灵敏度，同时大大缩短分析周期，因此特别适用于微量复杂混合物的分离和高通量研究。问世4年来，超高效液相色谱质谱联用技术(UPLC—MS“)发展很快，现已成功应用于农药残留物检测、水质和环境监测、化妆晶质量控制、药物及制剂的分析检测和质量控制、中药复杂组分分析及代谢组学等领域。现仪从UPLC的原理及优点出发，综述UPLC及其联用技术在药物分析领域中的应用，讨论目前UPLC存在的局

5、限性，并对其进一步应用进行展望。1UPLC的原理及优点1．1UPLC的原理UPLC的理论基础为范德米特(VanDeemeter)方程。HE7I’P=AdP+B／v+CdP2v式中：HETP为理论塔板高度；A为涡流扩散系数；dP为填料粒径；B为分子径向扩散系数；C为传质凶子；秒为流动相线速度。由该方程可得出结论：颗粒度越小柱效越高；每个颗粒度尺寸有自己的最佳柱效的流速；更小的颗粒度使最高柱效点向更高流速(线速度)方向移动，而且有更宽的线速度范围。所以降低颗粒度不·收稿13期：2009-07-03但提高柱效，同时也提高速度。但是，应当看到在使用小颗粒的固定

6、相时，会使△p大大增加，使用更高的流速会受到固定相的机械强度和色谱仪系统耐压性能的限制。然而，只要使用很小粒度的固定相，并且只有在达到最佳线速度时，其具有的高柱效和快速分离的特点，才能显现出来。因此要实现超高效液相色谱分析，除必须制备出装填粒度小于2¨m固定相的色谱柱外，还必须提供高压溶剂输送单元、低死体积的色谱系统、快速的检测器、快速自动进样器和高速数据采集、控制系统等。上述几个单独领域最新成果的组合，才促成超高效液相色谱的实现。1．2UPLC的优点基于1．7斗m小颗粒技术的UPLC与人们熟知的高效液相色谱(HPLC)技术，具有相同的分离原理。不同的

7、是，UPLC不仅比HPLC具有更高的分离能力，而且结束了人们多年不得不在速度和分离度之间取舍的历史。使用UPLC可以在很宽的线速度、流速和反压下进行高效的分离工作，并获得优异的结果。1．2．1提高分离度UPLC发挥了1．7斗m颗粒提供柱效增高的全部优越性。尤其是1．7斗m颗粒提供的柱效比5Ixm颗粒提高了3倍。因为分离度与粒度的平方根成反比，1．7¨m颗粒的分离度比5Ixm颗粒提高了70％。在梯度分离中也具有同样的优越性，此时分离能力用峰容量衡量。万方数据天津药学TianjinPharmacy2009年第21卷第6期1．2．2提高分析速度由于UPLC系

8、统采用1．7p,m颗粒，柱长则可以比使用5lxm颗粒时缩短3倍而保持柱效不变，而且使分离在高3