不同激素配比对百合鳞片愈伤组织诱导的影响.pdf

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1、黑龙江农业科学2014(9)：8～9HeilongjiangAgriculturalSciences不同激素配比对百合鳞片愈伤组织诱导的影响崔瑞峰，张丽霞，韩晓红(1．安阳工学院生物与食品工程学院，河南安阳455000；2．郑州大学教育系，河南郑州450006)摘要：为筛选出适宜百合鳞片愈伤组织诱导的最佳激素配比，以给百合大规模的培养与繁殖创造有利的条件，以百合鳞片作为外植体，利用正交试验设计，研究不同激素配比对百合鳞片愈伤组织诱导的影响。结果表明：以MS为基本培养基，2，4一D浓度，6一BA浓度，NAA浓度3个因素对愈伤组织诱导率的影响表现为6一BA>NAA>2，4一D。最优的激

2、素配比组合为A。BC3，即2，4-D0．6mg·I‘。，6一BA0．3mg·L，NAA0．9mg·Iy，其愈伤组织诱导率为91．21。关键词：百合；鳞片；愈伤组织；诱导中图分类号：$682．29文献标识码：A文章编号：1002—2767(2014)09—0008—02近年来随着百合在国内外鲜花市场的畅销，表l正交试验设计百合的生产和消费已逐年增加。传统的百合繁殖Table1Orthogonaltestdesign方法的繁殖系数比较小，尤其是经过多代繁殖以后，常会造成种性退化甚至病毒积累，从而影响百合的产量和质量_】。利用组织培养技术可以有效去除病毒和更新品种，加快百合的快速繁殖，缩

3、短百合的生育周期，弥补种球繁育的不足，是百合商品化及产业化发展的必然趋势，利用离体快繁技术是百合组培1．2．2培养基的配制选用MS为基本培养基，中研究最早和最多的一项技术_2]。自从Robbl_3]分别向培养基中添加不同浓度的2，4一D，6-BA，利用百合鳞片进行组织培养成功以来，关于这方NAA(见表2)组合配比试验，所有的培养基均用面的研究也日益增多。该试验选取百合鳞片为外8．OOg·L的琼脂固化，蔗糖浓度为25g·L，pH植体，研究不同激素浓度配比对外植体诱导率的5．6，加0．50g·L。的活性炭(Ac)以防止外植体褐影响，以期筛选出适宜百合鳞片愈伤组织诱导的化]。并添加适量激

4、素到配制好的培养基中，分最佳激素配比，为百合大规模的培养与繁殖创造装到50mL三角瓶中，分别贴上标签，在12l℃条有利的条件。件下灭菌30rain，备用。1材料与方法1．2．3材料的预处理取百合生长正常、无病虫1．1材料害的鳞茎，去掉最外面的一层鳞片，将根系切除，供试材料为市售百合，取其鳞片为外植体]。然后将鳞片剥下，放人洗衣粉中浸泡15～供试试剂有NAA、6-BA、2，4-D、75酒精和25rain，自来水流水冲洗2h，后置于超净工作台0．1HgCI等。供试器材有冰箱、天平、试剂瓶、上，采用75％酒精浸泡70S消毒，用无菌水冲洗量筒、烧杯、容量瓶、三角瓶、玻璃棒、精密pH试2遍，

5、然后转入0．1升汞中浸泡6rain，再用无纸(5．4～7．O)、封口膜、高压蒸汽灭菌锅、镊子、解菌水冲洗5～6次，每次清洗时间为2～3rain，剖刀和培养皿等。最后将消毒后的鳞片放在干净无菌的滤纸上，吸1．2方法干表面的水分备用。消毒过程中要不断晃动以便1．2．1试验设计为筛选出适宜百合鳞片愈伤充分消毒。组织诱导的最佳激素配比，利用正交试验设计，选1．2．4接种在接种之前要进行相关器材灭菌择2，4一D浓度，6-BA浓度、NAA浓度3个水平进处理]：培养皿、烧杯和金属器械均进行湿热灭行试验(见表1)。菌，灭菌后连同酒精灯放在超净工作台上，用紫外灯照射20rain，并用75酒精消毒，接

6、种前超净收稿日期：2014—03一l3工作台面要用75酒精擦洗。第一作者简介：崔瑞峰(1977一)，女，山西省吕梁市人，硕士，将已消毒的鳞片取出放在培养皿中，切成讲师，从事植物生物技术相关教学与科研研究。E—mail：897824064@qq．colll。0．2t0．4cm见方，左手拿三角瓶，右手轻取下封89期崔瑞峰等：不同激素配比对百合鳞片愈伤组织诱导的影响口膜，避免膜上的灰尘飞扬，造成污染。将三角瓶诱导率()一各处理的出愈块数／各处理的的瓶口靠近酒精灯火焰，瓶口略向下倾斜，以免空接种块数×100气中的微生物落入瓶中，然后用镊子将切好的外2结果与分析植体送入瓶中。镊子每次用后要灼

7、烧，培养瓶盖由表2可知，不同浓度2，4一D对愈伤组织诱上封口膜，做好标记，最后注明接种材料和培养基导率的影响差异不显著，不同浓度6-BA对愈伤名称及接种日期。每个处理接种10瓶，每瓶接种组织诱导率的影响差异均达到了极显著水平，不5块鳞片。接种后培养基置于光照强度1500～同浓度NAA对愈伤组织诱导率的影响差异显2000lx。光照时间10～12h。温度为25±2℃著。2，4一D浓度，6一BA浓度，NAA浓度3个因素的光照培养室内培养，随时观察记录。对愈伤组织诱导率的影响