丁内酯-i对绵羊卵母细胞体外成熟和受精的影响

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1、农业生物技术学报JournalofAgriculturalBiotechnology2008,16(1):66~70·研究论文·丁内酯玉对绵羊卵母细胞体外成熟和受精的影响*杨飞鸽, 倪和民, 郭勇, 刘烈琴, 张宏, 刘云海*（北京农学院动物科学技术系，北京102206）摘要：绵羊()卵母细胞经丁内酯I(BLI)抑制培养，然后转入成熟培养液培养不同时间，进行体外受精并观察胚胎发育情况。结果表明,解除8h抑制再培养8h组处于M域期卵母细胞率6.38%，显著低于其它组(<0.01)。继续培养16和20h的卵母细胞成熟率与对照组(常规培养24h)差异不显著

2、，培养24h组卵母细胞成熟率(70.83%)稍高于对照组(66.18%)，但差异不显著(>0.05)。培养16和20h组囊胚率分别为2.99%和13.64%与对照组24.39%差异显著(<0.05)，培养24h组的囊胚率20.33%与对照组差异不显著(>0.05)。表明BLI对绵羊卵母细胞的体外成熟有明显抑制作用，但其抑制作用是可逆的，而经BLI处理后未能提高绵羊卵母细胞体外受精和胚胎的整体发育能力。关键词：绵羊卵母细胞；丁内酯I(BLI)；体外成熟；体外受精中图分类号:S185文献标识码:A 文章编号:10061304(2008)01006605E

3、ffectofButyrolactone玉onMaturationandFertilizationofOvineOocytes YANGFeige,NIHemin,GUOYong,LIULieqin,ZHANGHong,LIUYunhai* Inordertoinvestigatenuclearmaturation,ovine()oocyteswereculturedbyinhibitingwith butyrolactone玉(BL玉).Theyweremoved,after8h,andmatured(IVM)randomlyinappropria

4、temediumfordifferent durationstoanalyzethesynchronizationofboththeirnuclearandcytoplasmicmaturation.TheresultsshowedthatonlytherateofovineoocytesinM域stage,inIVMgroupfor8h,wassignificantlylowerthanthatoftheothers(<0.01),buttherewerenosignificantdifferencesofbothoocytematurationa

5、ndblastocystratesamongallthegroups(>0.05).ItsuggeststhatsuchkindofinhibitionbyBLIshouldbereversiblealthough,itmaynotimprovethecleavageanddevelopmentalcompetenceofovineembryos. Ovineoocyte;butyrolactoneI(BLI); maturation; fertilization目前，从屠宰场获取家畜的卵巢收集卵母细胞，卵母细胞的核质成熟一直是卵母细胞体外成熟已成为

6、生产和研究中获得卵母细胞的主要途径，但研究的热点之一。Eppig（1985）研究表明，卵泡由于屠宰动物的年龄和体质上的差异从而引起卵母能分泌一些抑制因子，如cAMP（环磷酸腺苷）、次黄细胞个体间发育活力不同。就单个卵母细胞而言，当嘌呤、腺嘌呤核苷等，可使卵母细胞维持在减数分裂未成熟卵离开卵泡的抑制环境后，核的成熟加快，以抑制状态。随后多种抑制剂如磷酸二酯酶亚型抑制致当核成熟时，胞质尚未完全成熟，细胞核和细胞质剂Milrinone(马利兵等,2007)、Rolipram(周波等, 成熟不同步(Combelles .,2002)，进而导致了卵母2005)

7、、细胞周期蛋白依赖性激酶ROS和丁内酯I(细胞体外成熟整体水平和胚胎发育潜力低下。如果butyrolactoneI,BLI)（Ponderato .,2002)，用于建立能模仿卵泡抑制环境的培养体系，使卵母细胞研究卵母细胞的减数分裂机制、卵母细胞成熟抑制的核成熟在此环境中受到抑制，使卵母细胞有较充和发育潜力。分的时间完成相应的发育和成熟变化，尤其是细胞BLI能抑制成熟促进因子(maturation 质的成熟变化，将有助于提高卵母细胞受精后的胚promoting factor，MPF)的活性，因而能阻滞减数分胎发育潜力以及了解卵母细胞核成熟的过程。裂的

8、恢复(Kubellka,2000;Hashimoto ,*基金项目：北京市教育委员会科技发展计划重点项目(N