dot-elisa和rt-pcr检测南方水稻黑条矮缩病毒灵敏度的比较

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1、Dot.ELISA和RT.PCR检测南方水稻黑条矮缩病毒灵敏度的比较刘珊珊·,周倩1,2,高必达-.2,李有志一,张政斌,郭海明(1.湖南农业大学植物保护学院,湖南长沙410128;2.植物病虫害生物学与防控湖南省重点实验室,湖南长沙410128;3.湖南省植保植检站,湖南长沙410005)摘要:南方水稻黑条矮缩病毒(Sou~emriceblack.streakeddwarfvirus,SRBSDV)是近年来在我国南方稻区和越南危害严重的一种新病毒,主要由白背飞虱传播,造成水稻大面积减产。检测田间白背飞虱、杂草和水稻植

2、株的带毒率是南方水稻黑条矮缩病预测预报的基础。为寻找一种适合大量样本的检测方法,以感染南方水稻黑条矮缩病毒的水稻植株和带毒的白背飞虱为材料,比较了斑点免疫测定法(Dot—ELISA)和反转录一聚合酶链式反应(RT.PCR)两种检测方法的灵敏度。试验结果表明:RT.PCR技术的检测灵敏度LLDot-ELISA技术检测灵敏度高。关键词:南方水稻黑条矮缩病毒;反转录.聚合酶链式反应;斑点免疫测定;检测灵敏度中图分类号:$432.4文献标识码:A文章编号:1006.060X(2014)01.0052.03Comparisono

3、fSensitivityofDot-ELISAandRT-PCRinDetectingSouthernRiceBlackStreakedDwarfVirusLrUShan-shan1,ZH0UQian.一,GAOBi—da,一,LIYou-zhi,一,ZHANGZheng.bins,GUOHai.ming{1.CollegeofPlantProtection,HNAU.Changsha410128,PRC2.HunanProvincialKeyLaboratoryforBiologyandControlofPlantD

4、iseasesandPlantPests,Changsha410128,PRC:3PlantProtectionandQuarantineStationofHananProvince,Changsha410128,PRC1Abstract:Southernriceblackstreakeddwarfvirus(SRBSDV),anewvirus,hadcausedaseriousricedwarfdiseaseinsouthernChinaandVietnaminrecentyears,whichmainlysprea

5、dbythewhitebackedplanthopper(WBPH),leadingtoseriousreductionofriceproduction.DetectingtheinfectedrateofWBPH.weedsandriceplantsinfieldiSthefoundationofforecastingtheSRBSDV.TOfindadetectingmethodwhichissuitableforalargenumberofsamples.theSRBSDVinfectedriceplantsan

6、dWBPHweretakenasthematerialstocomparethesensitivityofDotimmunoassayfDotELISA)andreversetranscription.polymerasechainreaction(RT.PCR).TheresultsshowedthatthesensitivityofRT.PCRwashigherthanthesensitivityofDot-ELISA.Keywords:SRBSDV;RT.PCR:Dot.ELISA:detectionsensit

7、ivity南方水稻黑条矮缩病毒(Southerniiceblack—水平的检测,具有准确高效、灵敏快速的特点,但操作streakeddwarfvirus,SRBSDV)引起的水稻病害由华南比较复杂,成本高。血清学检测技术是以抗原抗体特异农业大学周国辉教授于2001在广东省首次发现,2008年性反应为基础的检测技术,具有快速灵敏经济的特点,被鉴定为斐济病毒属中一暂定新种[1】。该病毒主要通过并且操作简单,但如果抗体非特异性结合容易造成假阳白背飞虱传播,危害水稻,玉米、小麦等禾本科作物和性【】。为了寻找一种适合SRBSDV

8、大量样本检测的方一些田间杂草。最近几年由SRBSDv引起的水稻矮缩病法,比较了RT.PCR和Dot.ELISA两种检测方法的灵敏在我国南方和越南发生严重。2009年湖南、江西等九省度,以期为基层植保人员检测SRBSDV提供参考。受害面积达到数千公顷,2010年,发病范围扩大至西南1材料与方法及长江中下游部分单季稻区,江淮局部地区也

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