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1、LaboratoryManualofPathogenicBiologyandImmunology病原生物学与免疫学实验指导(五年制临床医学专业使用)大连医科大学病原生物学实验室2007年9月目录病原生物学与免疫学实验的目的和要求……………………………………1病原生物学与免疫学实验室规则……………………………………………2第一部分病原生物的形态学观察实验一细菌形态学观察……………………………………………………4实验二线虫的形态学观察…………………………………………………20实验三细菌的人工培养法………………………………………
2、…………30实验四吸虫、绦虫的形态学观察…………………………………………53第二部分免疫学综合性实验实验五机体的免疫功能检测………………………………………………67第三部分综合性实验：临床标本的病原学检测实验六各种原虫的鉴别、粪便标本中寄生虫的检测……………………83实验七脓汁标本中细菌的分离鉴定………………………………………101实验八粪便标本中肠道致病菌的分离鉴定(1)……………………………114实验九粪便标本中肠道致病菌的分离鉴定(2)……………………………121实验十咽喉含漱液流感病毒的分离与鉴定………………………
3、………124第四部分病原生物学与免疫学综合性试验实验十一免疫功能低下与机会性感染……………………………………137第五部分病原生物的免疫学检测实验十二间接血凝法检测杜氏利什曼原虫特异性抗体、对流免疫电泳检测脑膜炎球菌可溶性抗原…………………145实验十三酶联免疫吸附试验检测血吸虫可溶性虫卵抗原、HBsAg……162第六部分病原生物的分子生物学检测实验十四PCR法检测病原生物……………………………………………169病原生物学与免疫学实验目的和要求ObjectiveandRequestofPathogenicBiologyan
4、dImmunologyExperiment1.实验前必须掌握与实验相关的医学微生物学、医学寄生虫学及医学免疫学基础理论,做好预习，明确实验目的与实验内容。2.在实验时,对操作的实验应按指导所列的步骤依次进行,仔细观察并认真记录实验结果或绘图；几人同做一项实验时,要注意分工协作,密切配合；对示教的实验要仔细观察,并联系有关理论进行积极思考；设计性实验严格按照科研程序完成;实验中注意科学合理地分配和运用时间。在实验过程中做到三严：严肃、严格、严谨。如实记录实验结果，按规定完成实验报告。对于失败实验结果要分析原因，必要时重复实验
5、。3.实验完毕,应认真分析实验结果,探讨实验原理,得出可能的结论。若实验结果与理论不符合时,要加以分析讨论,以逐步提高自己的科学思维能力。实验课后,须按时按要求递交实验报告。4.防止发生各种事故。5.严格遵守实验室规则。1病原生物学与免疫学实验室规则RulesofPathogenicBiologyandImmunologyLab1．进入实验室必须先穿本室的实验服,必要的实验指导,书籍和文具带入后,应放在实验台下的抽屉里,其它个人物品如书包,衣物等一律不得带入实验室。无菌操作时必须戴帽子和口罩。2.实验室内禁止饮食,吸烟,用
6、嘴湿润铅笔或标签,以手抚摸头面部等等行为。3.每项微生物学实验,都要坚持无菌操作,既要防止临床标本及纯培养物被污染,更要防止临床标本或纯培养中的病原微生物感染人体或污染环境。4.用过的吸管,滴管,试管,玻片等带菌器材,应放在指定的地方或含消毒液的容器内,不得放在桌面上或水池内,亦不得将带菌液体倾入水槽。酒精灯不可互相点燃,以防发生意外。5.实验过程中若不慎将传染性标本污染桌面、手及其他物品时，应立即报告老师紧急处理，不得擅自处理。常见处理如下：（1）皮肤破伤：先除尽异物，用无菌生理盐水洗净后，涂以2%红汞或2%碘酒，必要时
7、进行包扎。（2）灼伤：涂以凡士林油，5%鞣酸或2%苦味酸。（3）化学药品腐蚀伤：若为强酸，先用大量清水冲洗，再以5%碳酸氢钠或氢氧化铵溶液洗涤中和之；强碱腐蚀伤，则先以大量清水冲洗后，再用5%醋酸或5%硼酸溶液洗涤中和之。若受伤部位是眼部，经过上述步骤处理后，最后滴入橄榄油或液体石腊1、2滴，滋润之。（4）吸入病菌菌液：应立即吐入盛有消毒液的容器内消毒，并用1：1000高锰酸钾漱口；根据菌类不同，必要时需服药预防。2（5）细菌污染衣物：应立即脱下，放入3%来苏尔或3%氯胺液内浸泡半小时，或仔细包好经高压蒸汽消毒后清洗。（6
8、）菌液污染桌面：倾倒适量2-3%来苏尔或0.5%84消毒液于污染处，浸泡半小时后抹去。若手上沾有活菌，应浸泡于上述消毒液10-20分钟后，再以肥皂水冲刷之。6.不可擅自搬动示教,实验器材或室内设施.爱护公物,节约使用实验材料.如有损坏,应立即向指导教师报告,主动在破损物品登记本上登记,某些物品需按规定酌
