阳江豆豉Aspergillus oryzae分离鉴定及其中性蛋白酶分析-论文.pdf

《阳江豆豉Aspergillus oryzae分离鉴定及其中性蛋白酶分析-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第28卷第5期OOD&MAC咖RYVo1．28。No．52012年9月蹒Sep．2012阳江豆豉Aspergillusoryzae分离鉴定及其中性蛋白酶分析IsolationandidentificationofAspergillusoryzaefrOmYangjianglobstersauceandneutralproteaseanalysis曲直蒋爱民吴兰芳孙韵栗俊广QuZhiJIANGAi—minWULan-fangSUNYunLIJun—guang(华南农业大学食品学院，广东广州510642)(Colle

2、geofFoodScience，SouthChinaAgriculturalUniversity，Guangzhou，Guangdong510642，China)摘要：对阳江豆豉分离菌株进行多项分类鉴定，并对该茵中癌、前列腺癌等生理功能，因此，豆豉正在引起人们的关性蛋白酶基因克隆和序列分析，预测菌株中性蛋白酶二级结注一。构。采用18SrRNA基因序列鉴定菌株，并以菌株中性蛋白按制曲微生物不同，豆豉可分为霉菌型和细菌型等，而酶的氨基酸序列为基础，应用DNAStarProtean软件对蛋白霉菌型又分为毛霉型、根霉型和

3、曲霉型_c]；按发酵时是否加酶的二级结构进行预测。通过形态和18SrRNA基因序列食盐，分为咸豉、淡豉；按成品含水量多少，分为干豉、湿豉和分析，鉴定该茵株为米曲霉Aspergillusoryzae。通过RT—水豉。阳江豆豉是米曲霉型加盐干豆豉。尽管豆豉在中国PCR和PCR从茵丝体中克隆了基因序列，与产中性蛋白酶有关的核苷酸序列有2113bp，推测出634个氨基酸序列。的历史悠久、品种繁多，然而中国国内对其发酵的微生物研关键词：阳江豆豉；18SrRNA基因序列；DNAStar；蛋白质究甚少]。在细菌型豆豉生产的研究

4、中发现参与细菌型豆二级结构豉发酵的微生物主要有豆豉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸Abstract：ToisolateandidentifythestrainsfromYangjinglobster菌和微球菌。但是国外对天培和纳豆的研究却有很大进展。sauce，thenthroughRT-PCRandsequenceanalysispredictedthe天培的生产一般是用少孢根霉，也可从优良的天培中分离到strainneutralproteasesecondarystructure．Using18SrRNAgene

5、sequencetoidentifystrainandbasedontheaminoacidsequenceof这一属的其他菌，如匐枝根霉、米根霉和无根根霉。自从thestrainneutralprotease，thesecondarystructureoftheprotease1934年北海道大学农学部半询教授成功地将分离的纯种纳waspredictedbyDNAStarProteansoftware．Themorphologyand豆苗(BacillusnattoNo．1)使用于纳豆的工业化生产后，至18Sr

6、RNAgenesequenceshowedthatthestrainwasAspergillus今已知与纳豆生产相关的主要纯菌种包括Bacillussubtilsoryzae．ClonedbyRT-PCRandPCRfromthemycelium，thegenesequencewas2113bpinthenucleotidesequenceofneutralprotease，IF03007、BacillusnattoSawamura06、Bacillusnattowhichdeduced634aminoacids

7、equences．SawamuraIFO339等。Keywords：Yangjianglobstersauce；18Sribosomalgenesequences；本试验拟从传统阳江豆豉中分离出一株高产蛋白酶米DNAStar：proteinsecondarystructure曲霉菌株，并对其进行分子鉴定，进而提取菌株RNA，通过反转录反应(RT—PCR)及PCR克隆菌株中性蛋白酶基因，从豆豉是一种典型的传统大豆发酵制品。大豆发酵成豆而推测氨基酸序列，通过DNAStarProtean软件，采用Chou—豉后，制品中

8、的可溶性氮、游离氨基酸、可溶性糖、维生素BFasman方法及Gamier-Robson法来预测蛋白质的二级结和Bz比原料显著提高，豆豉中异黄酮的总含量也比原料构。本试验将为该蛋白酶分离纯化层析柱的选择提供理论提高。由于大豆异黄酮具有抗氧化、抗菌、增强免疫、预防乳依据，并为进一步研究其生物学特征及分子改性奠定基础。基金项目：广东省重大专项(编号：2011A020102001