外源DNA直接导入技术及在大豆育种中的应用-论文.pdf

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1、山西农业科学2013，41(5)：503—505，514JournalofShanxiAgriculturalSciencesdoi：10．3969~．issn．1002-2481．2013．05．27外源DNA直接导入技术及在大豆育种中的应用任海红．任小俊，王英，刘学义(1．山西省农业科学院经济作物研究所，山西汾阳032200；2．汾阳中学，山西汾阳032200)摘要：外源DNA直接导入技术又称花粉管通道法，是中国学者自主创新发明的分子育种方法。由于该方法具有能直接得到转化种子、操作简便经济、转化频率高、材料多样性等优点，目前在多种农作物育种

2、中得到应用。介绍了外源DNA直接导入技术的方法及其在大豆育种中的应用，并对该技术进行了评价。关键词：外源DNA直接导人；大豆；育种；应用。中图分类号：$565．103．2文献标识码：A文章编号：1002—2481(2013)05-0503-04DirectIntroductionExogenousDNATechniqueandApplicationinSoybean‘BreedingRENHai—hong，RENXiao-jun’，WANGYing2，LIUXue-yi(1．InstituteoftheEconomicCrops，ShanxiA

3、cademyofAgriculturalSciencesFenyang032200，China；2．FenyangSeniorMiddleSchool，Fenyang032200，China)Abstract：DirectintroductionexogenousDNA，alsonamedpolentubepathway，wagamolecularbreedingmethodinventedbyChinesescholars．Themethodhasbeenwidelyusedincropgeneticimprovementatpresent，

4、becauseithastheadvantagesthattransformseedscanbedirectlygot，withhightransformfrequency，easyandsimpletohandle，materialvariety，etc．Thisarticlede-scribestheprinciplesofthedirectintroductionexogenousDNAtechnique，anditsapplicationinsoybeanbreeding．Finally，thetechnologyhasbeeneval

5、uated．Keywords：directintroductionexogenousDNA；soybean；breeding；application外源DNA直接导入技术又称花粉管通道明的分子育种技术，2O世纪80年代由周光宇先法，是周光宇先生于20世纪80年代建立的。它生建立，是一种不依赖于植物细胞和组织培养的既不同于农杆菌介导法等转基因技术需冗长繁转化系统【6】。该方法可用于任何开花植物，根据操琐的组织培养过程，也不同于传统的人工杂交育作方式的不同，其又分为子房注射法和柱头滴注种方式，而是以植物为受体，直接将目的基因导法，这2种方法大同小异

6、。人，然后对大量的变异材料，通过筛选鉴定获得该方法是利用大豆开花授粉后形成花粉管带有目的性状的后代，从而达到改良品种的目通道，将外源DNA采用氯仿一异戊醇核糖核酸的。该方法简单易行，已在玉米【l】、水稻田、小麦[31、酶法提取后，经纯度检测(DNA的A≥1．8，高粱嗍、棉花[51等作物上广泛应用，并培育出了一A≥2)后，配制成500txg／mL备用。供体总些具有高产、优质和抗病虫等优良性状的农作物DNA大小接近50kb。当花冠高于最高花萼新品种及新品系。0．5—1．0mm时，即大豆自花授粉6～32h为受笔者就外源DNA直接导人技术的方法及其精和

7、原胚发育时期，此时期用剪刀剪去柱头，用在大豆分子育种中的应用进行了概述，并对该技微量进样器滴5LDNA液于切口处，并用原稀术进行了评价。释液1×SSC作对照。3d后进行成活率调查，并随时去掉新长出的次生花芽171。所获导人后代基1外源DNA直接导入技术本按常规育种程序进行田间种植、选择和考种鉴外源DNA直接导人技术是我国自主创新发定一般3～4代稳定。收稿日期：2013-02—19基金项目：现代农业大豆产业技术体系(CARS一04)作者简介：~(1974-)，女，山西汾阳人，助理研究员，硕士，主要从事大豆育种和栽培研究工作。刘学义为通讯作者。·5

8、03·山西农业科学2013年第4l卷第5期皂角、鹰嘴豆、野生豆、国育100—4、吉林16号2外源DNA直接导入技术在大豆DNA导入吉林25号、吉林27