生精方对肾虚型少弱精子症不育患者精子印记基因H19表达的影响-论文.pdf

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1、中医杂志2014年7月第55卷第13期JournalofTraditionalChineseMedicine，2014，Vo1．55，No．13生精方对肾虚型少弱精子症不育患者精子印记基因H19表达的影响连方，孙金龙，郭亮，孙振高，吴海萃(1．山东中医药大学附属医院，山东省济南市文化西路42号，250011；2．山东中医药大学临床医学院)基金项目：山东省自然科学基金高校、科研单位联合专项计划资助项目(2009ZRB14036)；高等学校博士学科点专项科研基金联合资助项目(20093731110006)[摘要]目的观察生精方治疗

2、肾虚型少弱精子症不育患者，临床疗效及可能作用机制。方法将67例少弱精子症不育患者随机分为治疗组34例和对照组33例，治疗组给予生精方，每日1剂；对照组给予五子衍宗丸，每次6g，每日2次，共治疗l2周。于治疗前后检测患者精子印记基因H19的表达，观察两组患者治疗前后肾虚证候评分、精液常规检查指标变化，观察配偶临床妊娠率及不良反应。结果治疗组治疗后印记基因H19丢失率明显降低(P<0．05)；两组患者治疗后肾虚证候评分、精子密度、(a+b)级精子活力均明显改善(P<0．05或P<0．01)；治疗后治疗组印记基因H19丢失率、肾虚证

3、候评分、精子密度、(a+b)级精子活力明显优于对照组(P<0．05或P<0．01)。治疗组临床妊娠率为55．88％，对照组为33．33％，治疗组明显优于对照组(P<0．05)。结论生精方可以改善少弱精子症不育患者的精液质量，提高临床妊娠率，其机制可能与改善精子印记基因H19的表达有关。[关键词]少弱精子症；印证基因；生精方；肾虚证基因组印记即遗传印记，是指通过单亲传递某年龄(32．12±4．04)岁；平均肾虚证候评分些遗传学性状的现象。正常情况下，某些印记基因(16．62±3．82)分，平均精子印记丢失率呈现亲源依赖性的单等位

4、基因表达，而另一等位基14．71％，平均精子密度(9．85±5．80)10／ml，因不表达或表达极弱¨J。人H19印记基因即属此平均精子活动力(a+b)级(25．88±7．04)％，类，该基因定位于11p15．5，不具备表达蛋白质的平均正常精子形态率(14．76±2．97)％。对照组功能，只在mRNA水平上发挥作用，具有调控精中继发不育者8例，原发不育者25例；年龄26～子成熟及其他基因表达的作用。本研究以精子45岁，平均年龄(30．27±5．46)岁；平均肾虚证印记基因H19为靶点观察生精方对男性少弱精子候评分(17．21±

5、3．47)分，平均精子印记丢失率症不育患者的干预作用，为进一步的临床和实验研21．21％，平均精子密度(11．62±6．50)10。／ml，究提供依据。平均精子活动力(a+b)级(28．70±8．06)％，1临床资料平均正常精子形态率(14．70±2．68)％。两组患1．1一般资料者临床资料比较差异无统计学意义(P>0．05)，67例男性少弱精子症不育患者均来自2011年具有可比性。7月至2012年1月山东中医药大学附属医院中西1．2诊断标准医结合生殖与遗传中心门诊，采用随机数字表法分男性不育症诊断标准参照《世界卫生组织男为治

6、疗组34例、对照组33例。治疗组中继发不育性不育标准化检查与诊疗手册》J，性功能正常、者7例，原发不育者27例；年龄24～43岁，平均未采取避孕措施1年以上女方未孕者，即可诊断；少弱精子症诊断标准J：取精液后60min内，a级通讯作者：f_lian@163．corn，(0531)68617800精子活力<25％或(a+b)级精子活力<50％，中医杂志2014年7月第55卷第l3期JournalofTraditionalChineseMedicine，2014，Vo1．55，No．13同时精子密度<20×10／m

7、行精子印记基因

8、H19检查。治疗完成后观察配偶中医辨证标准参照《-ft药新药临床研究指导临床妊娠率。原则》[53拟定，肾虚型男性不育主症：不育，性欲不良反应：观察两组患者治疗前后血、尿、便淡漠，精液稀少，精子活动力低下；次症：腰膝酸常规及肝肾功能血清学指标检查。软或腰膝酸痛，大便溏薄，夜尿频多或余淋不尽，2．3统计学方法舌淡苔薄白，脉沉细弱。以上主症“不育”必须采用SPSS17．0统计软件进行统计分析。计量具备，兼具其余各项中1项和次症中的2项，即可资料以均数-4-标准差(±S)表示，两独立样本均诊断。数比较采用t检验，计数资料采用x检验。1

9、．3纳入标准3结果符合上述诊断及辨证标准；男方精子质量密度3．1两组患者治疗前后精子H19基因印记丢失率在(10～20)10。／ml，属轻度少、弱精子症患者；比较女方妇科检查无异常；自愿接受本试验方案。H19基因的eDNAPCR产物长度为637bp，经1．4排除标准RsaI酶