利用糖厂滤泥生产根瘤菌菌剂-论文.pdf

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1、第32卷第3期大连工业大学学报V01．32NO．32013年5月JournalofDalianPolytechnicUniversityMay2013文章编号：1674—1404(2013)03—0187—04利用糖厂滤泥生产根瘤菌菌剂刘晓举，陈宝娣，郭继强(大连工业大学生物工程学院，辽宁大连I16034)摘要：测定了甘蔗糖厂滤泥的成分，确定滤泥中含有足够根瘤菌生长所需要的营养元素。在滤泥中接种根瘤菌进行培养实验，分析了根瘤菌在滤泥中的生长状况。利用单因素实验和响应面的方法，分析优化了大豆根瘤菌在滤泥中生长的最佳条件：温度29℃，pH7．5，总糖总氮比7：1O，湿度72．97，接

2、种量5I．3mL／kg。脱水滤泥可以作为根瘤菌生长的载体。关键词：滤泥；大豆根瘤菌；根瘤菌菌剂中图分类号：TS249．4文献标志码：AProductionofrhizobiainoculantusingsugarmillfiltermudLIUXiaoju，CHENBaodi，GUOJiqiang(SchoolofBiologicalEngineering，DalianPolytechnicUniversity，Dalian116034，China)Abstract：Thecompositionofthecanesugarmillfiltermudsuggestedthatthe

3、reareenoughnutritiveelementforthegrowthofrhizobiuminthefiltermud．Thecellgrowthofrhizobiainthefiltermudwasanalyzed．Withsinglefactortestandresponsesurfacemethodology，theoptimumconditionforgrowthofrhizobiais：temperature29℃，pH7．5，theratiooftotalsugarandtotalnitrogen7：10，humidity72．97，inoculumsize

4、offiltermud51．3mL／g．Thissuggestedthatthedehydrationfiltermudcanbeusedtothegrowthofrhizobia．Keywords：filtermud；soybeannodulebacteria；rhizobiainoculantO引言瘤菌菌剂。滤泥是甘蔗糖厂主要的废弃物，其中含有丰1实验富的营养物质1]，如糖分、蛋白质等，直接丢弃不仅污染环境而且浪费资源_2]。目前糖厂滤泥一般1．1材料与仪器用于生产开发滤泥饲料、有机肥_3]。根瘤菌肥料材料：甘蔗糖厂滤泥，广西大新县雷平永鑫糖在农业生产中扮演重要的角色，根瘤菌

5、菌剂是含业有限公司；大豆根瘤菌，分离自大豆根瘤，辽宁有根瘤菌的产品，在播种过程中可以接种在种子瓦房店农场提供；YMA培养基[6]，根瘤菌标准培或者土壤中使用¨4]。根瘤菌经过发酵培养之后转养基。入固体粉末载体中，经过一段时间的增值和适应仪器：微量凯氏定氮仪；7200型分光光度计，之后就形成了根瘤菌菌剂。实验室中常用的根瘤上海分析仪器厂；原子吸收分光光度计，上海精密菌培养基耗费比较大，工业中用工业污泥代替培仪器科学有限公司。养基生产根瘤菌，含有充足营养成分的滤泥作为1．2实验方法培养基便成了可能[]。本研究以甘蔗糖厂滤泥作1．2．1糖厂滤泥成分测定为培养基培养大豆根瘤菌，优化了培养

6、条件，确定氮的测定：凯氏定氮法[7]。了固体滤泥可以作为菌体生长的载体，即制成根糖的测定：3，5-二硝基水杨酸法l6]。收稿日期：2012-10—10．基金项目：国家科技支撑计划项目(2011BAE16B02)．作者简介：刘晓举(I987一)，男，硕士研究生；通信作者：郭继强(1956一)，男，教授．网络出版时间：2013-01—11T10：27．网络出版地址：http：／／www．cnki．net／kcms／detail／21．1560．TS．20130111．1027．001．html188大连工业大学学报第32卷磷的测定：钼酸铵分光光度法]。2．2根瘤菌在不同湿度滤泥中的生

7、长曲线金属元素的测定：原子吸收光谱法_g]。由图1可知，供试菌在含水72．97和含水1．2．2根瘤茵在不同湿度糖厂滤泥和YMA培84．85的滤泥培养基中生长量较大。4个培养养基中的生长曲线基中供试菌由对数生长期转入稳定生长期的时间以培养基中菌浊度为指标绘制根瘤菌的生长均为18h左右。故可选择培养18h为测残糖时曲线_1。间节点。对2个优势培养基生长曲线比较分析，1．2．3糖厂滤泥培养根瘤菌条件优化从开始的适应阶段到对数生长阶段2种培养基基1．2．3．1单因素实验本一致，菌体生长量