细胞生物学实验复习.doc

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1、实验一、细胞膜的渗透性1.细胞膜具有对物质选择透过的生理功能。脂溶性越高通透性越大，水溶性越高通透性越小；非极性分子比极性容易透过，小分子比大分子容易透过。水分子可通过由膜脂运动而产生的间隙。非极性的小分子如O2、CO2、N2可以很快透过脂双层，不带电荷的极性小分子，如尿素、甘油等也可以透过人工脂双层，尽管速度较慢，分子量略大一点的葡萄糖、蔗糖则很难透过，而膜对带电荷的物质如：H+、Na+、K+、Cl–、HCO3–是高度不通透的。2.hemolysis（溶血现象）：渗入红细胞的溶质能提高红细胞的渗透压，使水进入细胞，引起细胞吸水胀破；即红细

2、胞膜破裂，血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血现象。3.isotonicsolution（等渗溶液）：渗透压与血浆渗透压相等的溶液称为等渗溶液。4.Hypertonicsolution（高渗溶液）：渗透压高于血浆渗透压的溶液称为高渗液。5.Hypotonicsolution（低渗溶液）：渗透压低于血浆渗透压的溶液称为低渗溶液。6.semipermeable（半透性）：膜或膜状结构只允许溶剂(通常是水)或部分溶质(一般为小分子物质)透过，而不允许其他溶质(一般为大分子物质)透过的特性。7.osmosis（渗透作用）：膜两侧溶液浓度存在差异，造

3、成化学势能差，在势能差的驱动下，溶剂穿过对溶质不透膜的过程。一、实验材料及作用：150mmol/LNaCl,蒸馏水，5mmol/LNaCl，65mmol/LNaCl，0.8mol/L甲醇，0.8mol/L乙醇，0.8mol/L丙醇，0.8mol/L乙二醇，0.8mol/L丙三醇，2%TritonX-100，氯仿(三氯甲烷)。1.NaCl的作用：将正常红细胞悬浮于不同浓度的NaCI溶液中：等渗溶液中的红细胞保持正常大小和双凹圆碟形；渗透压递减的一系列溶液中，红细胞逐步胀大并双侧凸起，当体积增加30%时成为球形；体积增加45%～60%则细胞膜损

4、伤而发生溶血，这时血红蛋白逸出细胞外，仅留下一个双凹圆碟形细胞膜空壳，称为血影细胞（ghostcell）。正常人的红细胞一般在0.42%NaCI溶液中时开始出现溶血,在0.35%NaCI溶液中时完全溶血.2.甲醇：小分子、亲脂性的非极性分子甲醇为低渗溶液，容易溶解于脂双层，并迅速透过，提高红细胞的渗透压，促使水分进入细胞，引起溶血。3.乙醇：乙醇是脂溶性小分子，可以自由扩散进出细胞。红细胞外有相对高浓度的乙醇，大量乙醇分子顺浓度差进入红细胞，使红细胞内渗透压高于红细胞外渗透压，水通道开放，大量水分子进入红细胞，发生溶血。4.丙醇，丙二醇，丙

5、三醇的作用与甲醇，乙醇的作用相似，都是脂溶性分子，随着分子量的增加，分子的增大，溶血时间增加。5.去垢剂是一些具有亲水的极性基团和疏水的非极性基团的长链分子。非离子型去垢剂如TritonX-100((聚乙二醇辛基苯基醚))可与脂双层形成混合微团，它们主要与蛋白质疏水部位相互作用，一般不会引起蛋白质变性。而离子型去垢剂与蛋白结合后可改变蛋白质结构，使之变性，尤其是加热后可使蛋白质解离为单体，如十二烷基磺酸钠（SDS）等。多种去污剂可以溶解细胞膜上的磷脂化合物，从而使细胞膜破裂，释放出细胞内物质。6.氯仿：氯仿是很好的脂类萃取剂，不能够发生溶血

6、现象。实验二、植物细胞的胞吞作用和内膜系统的荧光显微观察分析及抑制恢复：叠氮化钠可抑制呼吸作用，从而阻断能量供应，但是没有发生溶血抑制，说明水孔蛋白不需要提供能量。水通道蛋白对水的通透性受氯化汞的可逆性抑制,对汞的敏感位点是结构域5与6之间的189位的半胱氨酸。氯化汞到达一定的浓度时就可以抑制水的通透性，从而抑制溶血现象的产生。水通道蛋白对氯化汞的敏感位点是结构域5与6之间的189位的半胱氨酸。半胱氨酸含有巯基，而β-巯基乙醇能消除氯化汞对水孔蛋白的抑制作用。因为β-巯基乙醇可以修复被氯化汞破坏的巯基，从而是水顺利通过。1、细胞伸长生长所需

7、要的物质分别在内质网(如蛋白质、脂类)和高尔基体(细胞壁的一些组分，如果胶、半纤维素)合成，运输小泡通过胞吐作用分泌至胞外或质膜上，促进新的细胞膜和细胞壁的生长。2、在细胞扩展增长过程中一些过剩的蛋白质、多糖、细胞壁前体物质等细胞成分，需要通过胞吞作用重新回到胞质中使之得以及时回收，循环利用，即细胞的内吞和外排两个过程保持基本的相对平衡。3、在整个膜泡吞排作用中，必须有能量的保证。4、内膜系统是指内质网、高尔基体、囊泡、溶酶体和液泡等细胞器和质膜。这些细胞器的膜是相互流动的,处于动态平衡,在功能上也是相互协同的。一、实验材料：1、水稻悬浮细

8、胞：非极性生长，生长速度慢。2、FM4-64染料：是一种膜染料，水溶性的苯乙烯类复合物，对细胞无毒性作用，能与质膜及内膜细胞器特异结合后发出高强度的荧光。FM4-64由一条亲脂的