蚕豆根尖SCE技术检测浊漳河水质污染-论文.pdf

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1、毒理学杂志2013年8月第27卷第4期JToxicolAugust2013Vo1．27No．4中图分类号：X832文献标识码：A文章编号：1002—3127(2013)04—0300—03·实验研究·蚕豆根尖SCE技术检测浊漳河水质污染常惠丽，刘彤，刘瑞祥(1．长治市环境监测站，山西长治046000；2．长治学院生物科学与技术系)【摘要】目的利用姊妹染色单体交换技术(SCE)检测长治市浊漳河水体有机污染物的遗传毒性。方法以蚕豆为受试生物，采用姊妹染色单体交换分析对浊漳河水体3个不同样点的有机提取物所致的DNA损伤进行研究。结果各样点水样均能引起根尖细

2、胞不同程度的DNA损伤。在一定剂量范围内，SCE频率随有机提取物浓度的增加而增加，与阴性对照组比较，差异均具有统计学意义(P<0．01)，并且呈现一定的剂量一效应关系(r=0．9838，P<0．05)；3个样点对根尖细胞DNA损伤程度依次为暴马>石梁>北寨。结论浊漳河水体有机污染物可致蚕豆根尖细胞DNA损伤，SCE技术应用于水环境毒理学检测是一种行之有效的方法。【关键词】蚕豆根尖；SCE；水质污染；遗传毒性姊妹染色单体交换(SCE)是一种被世界公认的、用至20ml(即水样有机提取物)，4oC下避光保存，备用。于环境有毒化学物质检测的技术。自从Kihl

3、man和每个水样有机提取物设3个剂量：5、25和125ml／ml，Kronborg研究蚕豆姊妹染色单体交换以来，许多学者即1ml暴露液相当于原水样5、25和125ml，同时以报道了蚕豆SCE检测环境诱变剂方法学的研究。DMSO为阴性对照；原水用蒸馏水作对照。目前，蚕豆根尖细胞SCE技术已成为一种新的短期生1．3蚕豆根尖SCE试验常规浸种催芽，选择大多物学测试系统在水质监测方面加以推广和应用。数侧根长至1～1．5cm的蚕豆幼苗，浸入盛有BrdU溶地表水与人体健康直接相关，水体中的有机污染液的10ml小烧杯中(50~g／m1)，25℃处理20h后，物在低

4、剂量长期暴露的情况下可导致肿瘤甚至死取出分别浸入原水及水样有机提取物中避光染毒1h，亡。浊漳河是流经山西省长治市境内最大的河流，流水冲洗后再转入BrdU溶液中继续培养生长20h。为全面反映水体污染状况，本文应用这一技术对浊漳剪取侧根(0．5～1cm)，浸入盛有0．05％秋水仙素青河具有代表性的3个样点水样的原水和有机提取物进霉素瓶中，25c【=避光处理3．5～4h，加入新配制的卡行了遗传毒性研究，为长治市水环境生物监测及其对诺氏液固定24h后转入70％的乙醇中4℃保存。人体健康的影响提供参考。取上述固定根尖，切取根尖分生区约1mm，用2％纤维素酶和0

5、．5％果胶酶混合液于25℃酶解5h，1材料与方法以3．5mol／LHC1、37℃水解处理120min，用Sehiff试1．1材料蚕豆(Viciafaba)：购自长治市紫金西市剂染色至根尖呈深紫红色，常规压片后显微镜检验。场，山西大同地区当年产新鲜蚕豆。每个处理观察5个根尖，每个根尖选择20个分散良1．2水样采集与处理在长治市浊漳河流域设置好、染色体完整及分染清晰的中期相，油镜下观察统计3个采样点，分别为石子河暴马样点、浊漳南源北寨样SCE。凡染色单体端部出现的交换计为一次SCE，在点、主干流石梁样点，于2012年7月从每个样点采集染色单体中间出现的交

6、换计为2次SCE，发生在着丝水样各20L。静置24h后，过滤去除悬浮颗粒。采用点部位的，经判明不是两条染色单体发生扭转，计为一AmberliteXAD一2(美国Sigma)树脂吸附柱富集，控制次SCE。SCE频率以每细胞SCE数的平均值计算±s。流速在30—40ml／min，氮气排除水分，加入甲醇、丙1．4统计学方法对根尖细胞的SCE显微镜检验结酮、二氯甲烷各5Oml洗脱，洗脱液用旋转蒸发仪水浴果进行方差分析后，t检验，检测不同水样处理组与对浓缩，氮气吹干，再用二甲基亚砜(DMSO)溶解，定容照组之间的差异检验水准=0．05。基金项目：山西省高校科技

7、研究开发基金资助项目(20081043)；长治市2结果科技计划资助项目(20123055)作者简介：常惠丽，高级工程师，研究方向：环境毒理学。本实验中发现，3个样点原水均能诱导蚕豆根尖通讯作者：刘瑞祥，硕士，教授，研究方向：遗传毒理学。细胞SCE(表1)，与对照组相比，北寨样点差异无统计·302·毒理学杂志2013年8月第27卷第4期JToxicolAugust2013Vo1．27No．4中图分类号：R114文献标识码：A文章编号：1002—3127(2013)04—0302—05·实验研究·全氟辛酸与全氟辛基磺酸钾28d重复暴露毒理学效应比较研究宋

8、乃宁，李蕾，李海山，谢文平，艾文超，程桂林，王垮，陈会明(中国检验检疫科学研究院化学品安全研究所，北京100